趙霞

（南陽醫(yī)學高等?？茖W校，河南 南陽473061）

巴洛沙星穩(wěn)定性研究

趙霞

（南陽醫(yī)學高等?？茖W校，河南 南陽473061）

目的研究巴洛沙星在光、熱、濕等因素影響下的穩(wěn)定性。方法通過高效液相色譜法觀察巴洛沙星在高溫60℃、高濕（92±5）%RH、光照（4 500±500）Lx條件下的外觀性狀、水分、有關物質(zhì)的變化。結果巴洛沙星在高溫條件下水分由8.7%降至2.5%；在光照條件下，外觀性狀變成黃色結晶性粉末，新增光降解雜質(zhì)兩種。結論巴洛沙星在光、熱、濕等因素影響下的穩(wěn)定性差，包裝、貯藏應避免高溫、光照。

巴洛沙星；穩(wěn)定性；高效液相法

巴洛沙星（Balofloxacin）屬于第4代頭孢菌素類抗生素。巴洛沙星類藥物是近年來發(fā)展迅速的抗菌藥，屬于新型、廣譜、高效的抗生素，對各科感染都顯示出優(yōu)良的臨床治療效果，其結構式見圖1。由于巴洛沙星第8位碳上引入了甲氧基，故對光的敏感性、細胞毒性、光毒性顯著降低。

隨著對喹諾酮類藥物基礎與臨床研究的深入，對其構效關系、作用機制、耐藥機制及穩(wěn)定性的研究逐步深化，并積極探索其抗菌作用以外的新用途。由于氟喹諾酮類的理化特性，對光和熱具有不穩(wěn)定性［1］?，F(xiàn)觀察光、熱、濕等因素對巴洛沙星的影響實驗，采用HPLC法［2-4］觀察其外觀性狀、水分、有關物質(zhì)的變化。

1 實驗材料

1.1 儀器

生化培養(yǎng)箱（型號：LRH-150B，廣東省醫(yī)療器械廠生產(chǎn)）；PYX-DHS-50×65隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海市躍進醫(yī)療器械一廠生產(chǎn)）；Agilent1260高效液相色譜儀（美國Agilent）；787 703 KF Titrino卡氏水分測定儀（瑞士萬通）。

1.2 試劑和材料

乙腈（色譜級，美國）；磷酸二氫鉀（AR級，廣州化學試劑廠生產(chǎn)）；巴洛沙星原料片（批號20090601，江蘇聯(lián)環(huán)藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)）。

2 實驗方法及結果

2.1 影響因素實驗

2.1.1 實驗條件取巴洛沙星原料片研成細粉，敞開放在稱量瓶中，攤成≤10mm厚的薄層，分別放置于：60℃恒溫箱；（25± 2）℃，相對濕度（92±5）%RH培養(yǎng)箱及（4 500±500）Lx光照箱中，分別于第5、10天取樣，觀察樣品的性狀、水分、有關物質(zhì)等的變化。

2.1.2 實驗方法性狀觀察采用直觀法；水分觀察采用水分測定第一法（費休氏法）［5］。

有關物質(zhì)的觀察采用HPLC法。色譜柱：C18；流動相A：0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（含0.2%三乙胺，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）－乙腈（75∶25）；流動相B：乙腈。進行線性梯度洗脫，見表1。檢測波長為294 nm。

表1 HPLC法觀察條件

供試液：取樣品約50 mg置于100 m l量瓶中，用流動相A超聲溶解并稀釋至刻度作為供試品溶液；精密量取供試品溶液適量，用流動相A稀釋制成每1 m l中約含3μg的溶液，作為對照溶液。按高效液相色譜法測定，取供試品溶液20μl注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分色譜峰保留時間的4倍。巴洛沙星峰的保留時間約為10分鐘，理論板數(shù)按巴洛沙星峰計算，應不低于3 000，巴洛沙星峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應符合規(guī)定。取對照溶液20μl注入高效液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%。精密量取供試品溶液、對照溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分色譜峰保留時間的4倍。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰面積之和與對照溶液色譜圖主峰面積的比值為總雜質(zhì)。

2.1.3 實驗結果高溫60℃、高濕（92±5）%RH、光照（4 500± 500）Lx條件下，實驗樣品的外觀性狀、水分、有關物質(zhì)與0天結果進行比較，結果見表2。

結果表明，巴洛沙星在高溫條件下水分由8.7%降至2.5%；在光照條件下，外觀性狀變成黃色結晶性粉末。這說明巴洛沙星的包裝、貯藏應避免高溫、光照。

表2 巴洛沙星影響因素的實驗結果

2.2 光照實驗

2.2.1 實驗方法取上述樣品平攤在玻璃表面皿上約3mm厚，放置于光照箱中4 500 Lx照度進行光照，于30天取樣檢查。HPLC法檢測方法同上，觀察其外觀性狀及有關物質(zhì)含量的變化。

2.2.2 實驗結果（1）外觀性狀：巴洛沙星原料在光照下，外觀性狀由類白色結晶性粉末變?yōu)辄S色結晶性粉末，且隨光照時間的延長，顏色不斷加深。

（2）有關物質(zhì)檢測結果：巴洛沙星在光照前有關物質(zhì)HPLC色譜圖未檢出雜質(zhì)，在光照后樣品有關物質(zhì)HPLC色譜圖中新增雜質(zhì)兩種，RRT（相對保留時間）為0.53分鐘和2.20分鐘，見表3。表明本品對光較敏感。

表3 巴洛沙星光照3 0天實驗結果

巴洛沙星影響因素實驗結果顯示：在光照條件下，樣品由類白色結晶粉末變?yōu)辄S色結晶粉末，新增光降解雜質(zhì)1（RRT為0.53分鐘）和雜質(zhì)2（RRT為2.20分鐘）。所以本品應避免光照。

3 討論

本品在強光照射下顏色發(fā)生變化，這可能和其結構中某些基團對光不穩(wěn)定有關，因此包裝、貯藏應避免高溫、光照。本研究建立了巴洛沙星含量測定的HPLC法，經(jīng)過方法學驗證，證實本文建立的方法專屬性好、精密度高、準確可靠。相比文獻報道的方法，本方法具有操作簡便易行、分析快速、成本較低等優(yōu)點。在方法學建立過程中，發(fā)現(xiàn)巴洛沙星對流動相的pH值十分敏感，流動相pH值稍有變化，就會導致巴洛沙星相對保留時間發(fā)生很大改變。因此，在樣品測定過程中，應準確控制每次配制的流動相的pH值，保證巴洛沙星保留時間基本一致。

［1］Jun Wang，Wei Li，Chen Guili，et al.Photodegradation of Fleroxacin Injection:Different Products with Different Concentration Levels［J］.AAPS PharmSciTech，2011，12（3）：872-878.

［2］陳小平，王效山.巴洛沙星有關物質(zhì)測定方法的改進［J］.中國藥業(yè)，2005，14（9）：33-34.

［3］劉紅輝，劉艷飛.反相高效液相色譜法測定巴洛沙星有關物質(zhì)的方法學研究［J］.湖南師范大學學報，2006，3（4）：72-74.

［4］米亞嫻，吳燕，李華龍，等.反相高效液相色譜法測定巴洛沙星片的含量及有關物質(zhì)［J］.天津藥學，2008，20（5）：10-12.

［5］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（2010年版）二部［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

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1671-1246（2015）18-0156-02