趙 媛 （貴州省六盤水市鐘山區(qū)農(nóng)業(yè)局 553000）

常見稀釋粉對豬精液品質(zhì)的影響試驗

趙 媛 （貴州省六盤水市鐘山區(qū)農(nóng)業(yè)局 553000）

精液保存是人工授精的重要組成部分，為篩選出最適合運用于生產(chǎn)的精液稀釋粉，選取了貴州市場最為廣泛的比利時CXM、西班牙Bio、美國Vim3種精液稀釋粉，進行稀釋保存對比試驗，檢測3種精液稀釋粉對精液稀釋與保存的效果。結(jié)果表明， “CXM”稀釋粉對精液稀釋及活力保存方面顯著優(yōu)于其余兩組 （P＜0.05），且精液保存48h后輸精活力還能達到0.72，與其余兩者稀釋粉相比對精液稀釋與保存的效果最佳，適宜在生產(chǎn)中運用。

豬；精液；成活率；精液稀釋；人工授精；試驗

隨著人工授精技術(shù)的廣泛推廣，精液保存技術(shù)也越來越受到重視。精液保存是為了延長精子的貯存時間和維持其受精能力，便于長途運輸，擴大精液的使用范圍，提高種公豬的配種效能。這對于充分發(fā)揮良種公畜的遺傳潛力，降低傳染病的傳播幾率，加快畜群品種改良步伐具有重要意義[1]。目前精液的保存方法主要是通過稀釋后置于15～25℃環(huán)境中進行常溫保存[2]。由于稀釋液所提供的弱酸性環(huán)境，使得精子的運動能力和代謝效率受到了一定的抑制，因此常溫保存只能在一定時間范圍內(nèi)延長精子的存活時間和保持受精能力。精液保存時間、保存效果是人工授精應(yīng)用成敗的關(guān)鍵因素[3]，因此篩選出保存時間長、保存效果良好的稀釋粉，對人工授精技術(shù)和母豬繁殖性能的發(fā)揮有重要的經(jīng)濟效益[4]。故判斷出適合貴州豬場使用的精液稀釋粉勢在必行，本試驗為此展開了研究。

1 材料與方法

1.1 精液與稀釋粉

新鮮精液由貴州省六盤水市某種豬場提供。經(jīng)調(diào)查，貴州市場上最常見的精液稀釋粉有3種，均采購于農(nóng)業(yè)部定點市場——貴陽市農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料綜合批發(fā)市場：比利時CXM（產(chǎn)品批 2010-F-016577）、 美國 Vim Semen（產(chǎn)品批號EXP20150103）、 西班牙 Bio Pig（產(chǎn)品批號 24/05/2014-4），各精液稀釋粉均在保質(zhì)期內(nèi)。

1.2 主要儀器

顯微鏡、17℃恒溫冰箱、恒溫電熱板、精密溫度計、恒溫水浴鍋等。

1.3 精液的稀釋

稀釋粉按使用說明進行配比溶解，配制好的精液稀釋液置于37.5℃恒溫水浴鍋內(nèi)。按 《豬常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)范 （GB/T 25172-2010）》進行稀釋[5]，精液稀釋后進行精子活力檢查，活力不低于0.7時，進行分裝。稀釋液總量以體積V計，按公式1計算：

V1—采精量，單位ml；

C—精子密度，單位108個/ml；

S—每頭份總精子數(shù)，單位108個；

V2—每頭份劑量，單位ml。

稀釋好的精液置于22～25℃下1～2h后，平放入17℃恒溫箱內(nèi)避光保存。保存的精液每隔4～8h搖動一次，防止底層的精子被壓死。

1.4 精液稀釋后的活力觀察

本試驗采用間隔12h觀察制，稀釋后進行首次觀察記錄，每次觀察記錄間隔時間為12h?；盍z測時，用移液器取稀釋好的精液中層精液20ul，置于37.5℃恒溫電熱板上，在400倍鏡下進行檢查。每次用移液器取精液3滴，并且每個樣滴觀察1個視野，視野內(nèi)的觀察選擇較為清晰的中層觀察。

1.5 數(shù)據(jù)記錄

每次觀察結(jié)果登記于Microsoft Office Excel 2007，利用Spss 18.0軟件進行數(shù)據(jù)分析，通過對各組間數(shù)據(jù)差異顯著性分析對各組精液稀釋粉稀釋、保存效果進行評判。

2 結(jié)果與分析

2.1 原精液活力檢測

經(jīng)檢測，本試驗用原精液密度為2.1×108個/ml，活率為0.92，可以進行下一步試驗。

2.2 精液稀釋保存效果檢測

精液經(jīng)3種精液稀釋液稀釋后，立即進行檢測，檢測所得第一次活力觀察計時為0h，每間隔12h對保存效果觀察一次，每次觀察3個樣滴，登記于表中，詳細(xì)記錄觀察時間、觀察到的每組活力，并計算出每組數(shù)據(jù)的平均值，最終通過Spss 18.0軟件進行數(shù)據(jù)分析，結(jié)果見附表。

附表 3種稀釋粉不同時間段對精液活力保存效果觀察結(jié)果

附表顯示，各組精液稀釋后活力均有所下降，CXM組對保護精液活力不受打擊能力顯著優(yōu)于Bio組和Vim組 （P＜0.05），Bio組對保護精液活力不受打擊能力與Vim組相比，差異不顯著 （P＞0.05）。稀釋精液保存至輸精最低要求活力0.7時，CXM組保存48h后活力顯著優(yōu)于Bio組和Vim組（P＜0.05），活力可達0.72，Bio組與Vim組保存不到12h時活力已降至0.7以下，差異顯著 （P＜0.05）。

3 討論

精液在稀釋時，活力有所下降[6]，其應(yīng)激因素有來自滲透壓、溫度、稀釋劑的打擊，也有稀釋速度的打擊等[7]。比較3種稀釋粉在稀釋時對保護精液活力不受打擊能力從弱到強為CXM組＜Bio組＜Vim組。

精液稀釋液在保存精液時，CXM組保存48h后活力顯著優(yōu)于Bio組和Vim組 （P＜0.05），活力可達0.72，說明CXM對精液活力保存能力在3種豬精液專用稀釋粉中最佳。Bio組與Vim組保存不到12h時活力已降至0.7以下，差異顯著（P＜0.05）。它們保存稀釋精液活力至輸精最低要求時的保存時間從強到弱為CXM＞Bio＞Vim。通過附表可看出，精液稀釋后活力隨保存時間延長而下降，這與陳清森等[8]報道相同。

4 結(jié)論

本試驗對比了貴州市場上常見3種豬專用精液稀釋粉對精液的稀釋保存效果，所對比的精液稀釋粉在稀釋保存時均對原精液有一定的打擊，且根據(jù)其打擊性大小，可以按它們打擊性從弱到強排列為CXM精液稀釋粉＜Bio精液稀釋粉＜Vim精液稀釋粉；3中豬專用精液稀釋粉在對精液稀釋保存的能力從強到弱排列為CXM精液稀釋粉＞Bio精液稀釋粉＞Vim精液稀釋粉；綜合分析，CXM稀釋粉對精液稀釋及活力保存方面顯著優(yōu)于其余兩組 （P＜0.05），且48h內(nèi)輸精活力還能達到0.72，與其余兩者稀釋粉相比對精液稀釋與保存的效果最佳，適宜在生產(chǎn)中運用。

[1]鮮紅，鄭鴻培，等.豬精液常溫保存研究進展[J].黑龍江動物繁殖，2004（1）：42-43.

[2]高飛，岳奎忠，楊增明，等.豬精液液態(tài)保存的研究進展[J].中國畜牧雜志，2004，40（6）：46-49.

[3]孫德林，等.豬人工授精與產(chǎn)業(yè)化工程[M].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社，2005.

[4]吳同山，胡艷娟，張守全，等.不同稀釋劑對母豬繁殖性能的影響[J].PIG TODAY，2007（3）：21-23.

[5]GB/T 25172-2010，豬常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)范[S].

[6]俞湘麟，吳昊晏，曹建國，等.不同精液稀釋粉與保存溫度對豬精液的保存效果[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2009（9）：52-53.

[7]霍立軍.長期液態(tài)保存的公豬精液中精子的活率，線粒體活性，獲能和頂體完整性檢測[D].哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2002.

[8]陳清森，譚岳華，胡斌，等.四種豬精液稀釋粉的比較試驗[J].國外畜牧學(xué)（豬與禽），2012（8）：65-66.

趙媛，女，中級畜牧師。