邵 晞 王壽禹

（1.江蘇省連云港市畜產(chǎn)品檢測中心，江蘇 連云港222001；2.江蘇省灌云縣畜禽改良站，江蘇 灌云222200）

奶牛性控凍精輸精技術是通過人為地干預而繁殖出人們所期望性別后代的一種繁殖新技術。根據(jù)牛精液中含X染色體和Y染色體精子的DNA含量不同，利用正負電磁場把這兩種類型的精子分離后，選擇性的將含X（DNA）染色體的精子分裝冷凍，用于奶牛的人工授精，進而使懷孕母牛多產(chǎn)母犢牛的技術。當前，奶牛產(chǎn)業(yè)處于低迷階段，性控凍精輸精技術可以快速擴繁母犢牛的數(shù)量，加快奶牛良種繁育進程，擴增良種能繁母牛群體，全面降低生產(chǎn)成本，促進集約化水平的提高，成為國內外奶牛良種擴繁和產(chǎn)業(yè)化推廣應用的一項嶄新技術。通過大面積推廣應用可快速提高奶牛良種化率和擴大奶牛養(yǎng)殖規(guī)模，助推奶牛產(chǎn)業(yè)提質增效，加速奶牛產(chǎn)業(yè)化進程。

1 技術實施前期準備

奶牛性控凍精輸精技術作為一種繁殖新技術，重點做實前期準備工作，預先明確待解決的關鍵技術，加以實施推進。

1.1 選定試驗應用奶牛場

2008年起，選定連云港錫云奶牛養(yǎng)殖場、東辛農(nóng)場奶牛養(yǎng)殖場、板浦奶牛養(yǎng)殖小區(qū)、東辛農(nóng)場奶牛養(yǎng)殖小區(qū)4個大型奶牛養(yǎng)殖場區(qū)，飼養(yǎng)奶牛數(shù)量達5 000多頭，均具有較好的養(yǎng)殖技術基礎，集約化程度不高，奶牛良種化率低，個體產(chǎn)奶量年均偏低，連續(xù)5年實施性控凍精輸精與常規(guī)精液輸精繁育比較試驗和技術推廣。

1.2 選定新技術實施內容

自2008年始，在選定奶牛場應用性控凍精對發(fā)情奶牛輸精，提高母牛犢生產(chǎn)數(shù)量，收集應用有效數(shù)據(jù)，同步應用奶牛全混合日糧（TMR）技術，建立高效擴繁技術體系，分析匯總技術應用成效，形成奶牛性控精液輸精和奶牛集約化生產(chǎn)集成技術，提高奶牛養(yǎng)殖的科學技術水平，提升奶牛產(chǎn)奶量和牛奶品質。

1.3 選定待解決關鍵技術

奶牛性控凍精輸精技術試驗與推廣，需準確鑒定母牛發(fā)情，用性控精液適時對發(fā)情奶牛輸精提高其產(chǎn)母犢的比率與數(shù)量，科學做好常見繁殖疾病的防治，促進奶牛綜合飼養(yǎng)管理，提高集約化生產(chǎn)水平。

2 新技術具體應用做法

順利實施奶牛性控凍精輸精技術，必須扎實做好能繁母奶牛的群體選定、技術培訓、人工授精及懷孕母牛養(yǎng)殖管理等工作，重點對實驗過程收集整理的數(shù)據(jù)實時分析，及時對新技術加以改進提高，從而獲取新技術成功的科學成果。

2.1 開展全面技術培訓

新技術科技含量高，培訓掌握技術要領是關鍵。一是邀請大學教授到試驗基地開展技術培訓，重點講解奶牛發(fā)情鑒定技術、性控凍精適時輸精技術、常見繁殖疾病的預防和治療技術，以及奶?？茖W飼養(yǎng)管理技術等。二是現(xiàn)場實施輸精操作演練，組織相關場戶技術人員實施操作實練，現(xiàn)場學習操作與交流提高，為新技術推廣應用奠定技術基礎。三是推廣應用奶牛全混合日糧（TMR）技術，做到性控精液輸精技術與和全混合日糧（TMR）飼喂同步應用，進一步提升奶牛集約化生產(chǎn)的綜合水平。

2.2 選定奶牛試驗群

科學選定年齡在15月以上，體重400kg左右，以體成熟為主要指標，膘情適中，且無疾病和遺傳病史，卵泡發(fā)育良好的青年母牛，組建起待試驗奶牛群，建立起完善的試驗編號和生產(chǎn)檔案，確定試驗數(shù)量和欄舍，及時調整到同一欄舍，調配精干飼養(yǎng)人員，實施科學統(tǒng)一的飼養(yǎng)管理，穩(wěn)定技術應用試驗群體。

2.3 購用優(yōu)良性控精液

人工授精優(yōu)質性控精液是提高產(chǎn)母犢牛比例，縮短奶牛繁殖改良世代間隔的高效技術途徑。通過使用優(yōu)質性控精液，使奶牛繁殖在性別上實現(xiàn)人為控制，使優(yōu)質奶牛群體在短時間內實現(xiàn)快速擴繁，通過輸用遺傳性能好的優(yōu)質性控精液，使最優(yōu)秀青年母牛懷孕生產(chǎn)出更多的母犢牛，迅速提高牛群整體素質。選購經(jīng)過后裔測定的高產(chǎn)荷斯坦奶牛性控精液待配，可充分利用現(xiàn)有優(yōu)質公、母牛的遺傳潛力，提高奶牛的整體生產(chǎn)水平。

2.4 準確鑒定母牛情期

發(fā)情奶牛一般都有明顯的外部行為表現(xiàn)，如興奮不安、哞叫、弓腰舉尾，運步次數(shù)增加，頻繁排尿；反芻、采食和泌乳減少，追爬其它?；蜢o立接受爬跨等，當奶牛被其他母牛爬跨而站立不動時，要留心奶牛是否可實施配種。實踐生產(chǎn)中采取外部行為觀察法、陰道粘液測試法和直腸檢查法相結合的方法，進行綜合判斷而確定最佳適配期。奶牛處于發(fā)情初期，粘液量少，且清亮透明、稀薄，牽縷性中等，有流動性，pH值偏酸；到發(fā)情中期時，粘液逐漸增多，變?yōu)榘胪该鳎瑺靠|性和pH值增加；而到發(fā)情后期時，粘液又減少，粘稠如玻璃棒狀，牽縷性很強，PH值中性偏堿。在發(fā)情奶牛站立時常懸吊于陰門外（稱為吊線），遇到這種情況一般即可認定該牛正在發(fā)情階段，由于受孕后奶牛或非發(fā)情期奶牛也有少量粘液流出，所以還必須根據(jù)粘液的pH值和牽縷性進一步斷定。將專用試紙侵入陰門部流出的新鮮粘液1秒鐘與標準比色卡對照，讀取pH值，如pH值在6.8左右，說明牛進入發(fā)情期，再測試粘液牽縷性，測出粘液牽縷性在6～8次，一般可認定為發(fā)情奶牛。

2.5 適時進行輸精

確定母牛發(fā)情進入可配期后，盡快做好輸精前各項準備，一是做好細管精液解凍。將0.25mL的細管凍精從液氮中取出，封口端朝上、棉塞端朝下，置于35℃的水中，靜置20s實施解凍。二是做好全面消毒準備。對發(fā)情奶牛和金屬輸精器實施清洗消毒，輸精人員做好準備，盡量縮短精液解凍到輸入母牛體內的時間。三是做好性控精液輸入。人工授精采用直腸把握法實施，將含有性控精液的輸精器插入陰道，緩慢通過上宮頸口，越過子宮頸皺璧，暢通抵達子宮體處。將輸精器深入到子宮體的深部或孕側子宮再進行輸精，做到輕插、適度、慢推、緩出，防止精液到流。試驗顯示受胎率達56.2%，達到常規(guī)凍精的受胎水平，母犢牛產(chǎn)出率由原來的50%提高到90%以上。

2.6 抓好妊娠奶牛飼養(yǎng)管理

加強對已輸入性控精液的妊娠母牛的全程管理。配備使用專用沙床運動場，搭建防暑涼棚，安裝噴淋裝置，做到防暑降溫，牛舍冬暖夏涼，避免水泥地面和磚面對奶牛肢蹄的損傷，持續(xù)供給潔凈飲水和全混合日糧。按時防疫和消毒，保障日常飼料投喂營養(yǎng)平衡。

具體完整的性控精液人工授精技術路線為：

2.7 匯總比較擴繁總體成效

自2008年始，連續(xù)5年實施性控精液人工授精和常規(guī)輸精對比試驗，2008年至2013年，性控精液人工授精和常規(guī)輸精奶牛數(shù)分別為4324頭和926頭，常規(guī)輸精奶牛產(chǎn)仔數(shù)為866頭，其中母犢牛432頭，母犢產(chǎn)出率為49.9%；性控精液人工授精奶牛產(chǎn)仔數(shù)為4 023頭，其中母犢牛3 688頭，母犢產(chǎn)出率為91.7%。根據(jù)記錄相關生產(chǎn)數(shù)據(jù)，對情期受胎率、產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)母犢數(shù)、母犢產(chǎn)出率和擴繁母牛的年產(chǎn)奶量進行數(shù)據(jù)匯總，對比取得性控精液人工授精比較優(yōu)勢數(shù)據(jù)（詳見表1、2），數(shù)據(jù)統(tǒng)計比較顯示，實施性控精液繁育的母牛后續(xù)產(chǎn)奶量明顯高于常規(guī)輸精所產(chǎn)母牛，生產(chǎn)經(jīng)濟效益極為顯著（詳見表3）。

表1 奶牛性控精液輸精技術應用產(chǎn)犢統(tǒng)計比較表

表2 奶牛性控精液輸精技術應用年產(chǎn)奶效益比較表

表3 奶牛性控精液輸精技術應用效益統(tǒng)計表

3 技術應用注意事項

奶牛性控凍精輸精技術作為一項新技術，技術科技含量高，輸精時間把握好，輸精操作要求嚴，必須細心謹慎，不求快速，只求精準。

1）輸精要防控應激。輸精操作時，若母牛努責過甚，可采用喂給飼草、捏腰、拍打眼睛、按摩陰蒂等方法使之緩解。若母牛直腸呈罐狀時，可用手臂在直腸中前后抽動以促使松弛。

2）操作要準確緩慢。人工輸精時，操作時要精準緩慢，做到輸精器輕插、適深、緩出，掌握好力度和深度，防止損傷子宮頸和子宮體，避免子宮輸精感染或損傷。

3）精液要解凍即用。要把握好精液品質，保持精子活力在3.5以上。解凍后的性控精液應立即輸精，延期輸精應正確保存，細管凍精解凍后以0～4℃保存為好，10h內授精應用，否則精子活力下降明顯，影響精液質量。

4）輸精要控時適量。適宜的輸精時間為母牛發(fā)情開始后12h左右或排卵前，一般掌握早晨發(fā)情傍晚輸精，中午發(fā)情夜間輸精，傍晚發(fā)情早晨輸精。情期內輸精1～2次，兩次間隔8～12h。選定輸精時機至關重要，輸精時間過早，待卵子排出后，精子已衰老死亡：輸精過晚，排卵后輸精的受胎率又很低。

5）輸精要方法得當。一定要把握好輸精方法及輸精部位。與新鮮精液做人工授精相比較，一般用冷凍精液輸入母畜生殖道的有效精子數(shù)大為減少，冷凍精液輸入母畜生殖道以后，其有效存活時間較自然交配大大縮短。輸精時務必將精液全部輸入到子宮頸內口以前的部位，方可保證較高的受胎率。

4 技術應用創(chuàng)新成效

采用性控凍精人工授精技術，要做到定場、定位、定量、定人、定責任，形成一套行之有效的技術實施體系，進而促進奶牛產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

1）提高了奶牛發(fā)情鑒定水平。選擇適齡待配青年母牛進行觀察鑒定，從母牛行為狀態(tài)、陰道粘液的發(fā)展變化結合直腸檢查，綜合確定了發(fā)情母牛最佳適配時期，發(fā)情母牛配種受孕率明顯提高。

2）研發(fā)了輸精綜合技術體系。通過利用性控精液人工授精，詳細做好生產(chǎn)記錄，統(tǒng)計分析產(chǎn)母犢數(shù)和生產(chǎn)時間，科學改進輸精時間和數(shù)量，改進子宮頸輸精為子宮體深部或孕側子宮角輸精方法，確定一次性情期輸精時間和數(shù)量，大大提高了受胎率和產(chǎn)仔率，全面形成了性控精液輸精綜合技術體系。

3）引用了奶牛TMR綜合飼養(yǎng)技術。從改善奶牛的飼養(yǎng)環(huán)境和營養(yǎng)供給兩方面入手，應用全混合日糧先進的飼養(yǎng)技術，持續(xù)供應粒度均勻的飼料，適時階段性調整全混合日糧配比，保持營養(yǎng)穩(wěn)定與平衡，提高奶牛生產(chǎn)與產(chǎn)奶。

4）做實了奶牛常見繁殖疾病防治。對配種奶牛進行全程跟蹤管理，及時發(fā)現(xiàn)和掌握母牛的異常變化。對適繁母牛做到包括子宮、卵巢和其它繁殖器官疾病的有效的預防和治療，保障繁殖母牛妊娠期安全，大大提高產(chǎn)犢成活率。

5 技術應用在生產(chǎn)中的實際意義

1）母犢牛產(chǎn)出比率高，直接效益明顯。奶牛公、母犢牛的市場價格差一般在1 000元以上，在母牛懷孕期間飼養(yǎng)管理同成本的情況下，用性控凍精冷配，母犢牛產(chǎn)出率提高40%多，懷孕母牛的產(chǎn)犢效益顯著提高。

2）繁育母牛產(chǎn)奶量高，生產(chǎn)效益顯著。與常規(guī)冷凍精液配種相比，使用性控凍精，可以大量的繁殖出母牛后代，快速提高母牛養(yǎng)殖群體總量，進而增加群體產(chǎn)奶量，達到母牛數(shù)和產(chǎn)奶量雙提高，全面提高生產(chǎn)效益。

3）繁育母牛優(yōu)質快速，優(yōu)化群體改良。對能繁母奶牛推廣應用性控凍精技術，可短期繁殖出大量的優(yōu)質高產(chǎn)的母牛后代，優(yōu)質品種引進與改良一步到位，促進了牛群的淘汰速度，全面優(yōu)化奶牛養(yǎng)殖群體。

4）推廣性控凍精便捷，促進產(chǎn)業(yè)發(fā)展。推廣應用性控凍精改良奶牛，繁育出高比例的母犢牛，擴增優(yōu)質高產(chǎn)的母牛群體，保障了奶牛產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。