多菌靈對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)影響及在子實(shí)體的殘留研究*

劉新銳，黎志銀，謝寶貴，高 敏，鄧優(yōu)錦，江玉姬

（1.福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心，福建 福州 350002；2.福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002；3.福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002；4.福建省莆田市藥品檢驗(yàn)所，福建 莆田 351100）

多菌靈對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)影響及在子實(shí)體的殘留研究*

劉新銳1，2，黎志銀1，2，謝寶貴1，2，高 敏4，鄧優(yōu)錦1，2，江玉姬1，3**

（1.福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心，福建 福州 350002；2.福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002；3.福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002；4.福建省莆田市藥品檢驗(yàn)所，福建 莆田 351100）

以香菇9319為材料，在拌料和出菇階段使用多菌靈，研究多菌靈對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)和子實(shí)體殘留的影響。結(jié)果表明，多菌靈對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)有明顯抑制作用。在出菇期噴灑300 g/667m2的多菌靈，其在子實(shí)體的半衰期為0.67 d，出菇階段按100 g/667m2的量噴灑子實(shí)體1次，間隔7 d和3 d檢測(cè)其含量低于1 mg·kg－1，但高于0.1 mg·kg－1，若量超過(guò)100 g/667m2的量使用，子實(shí)體的殘留量易超過(guò)1 mg·kg－1。因此，在香菇生產(chǎn)中應(yīng)謹(jǐn)慎使用多菌靈。

香菇；多菌靈；農(nóng)藥殘留；無(wú)公害；綠色食品

香菇 [Lentinula edodes(Berk.)Sing.]是僅次于雙孢蘑菇的世界第二大類食用菌，是中國(guó)食用菌生產(chǎn)的一個(gè)重要組成部分，也是我國(guó)出口創(chuàng)匯的主要品種[1]。目前我國(guó)香菇栽培主要是以大棚季節(jié)性栽培為主，栽培方式比較粗放，在香菇栽培每一個(gè)環(huán)節(jié)中，均可能受到真菌、細(xì)菌、粘菌、放線菌、病毒和蟲害等的危害，輕者降低菌棒成活率，影響香菇產(chǎn)量及品質(zhì)，重者導(dǎo)致菌棒報(bào)廢，產(chǎn)量絕收，嚴(yán)重影響經(jīng)濟(jì)效益[2-4]。而采用化學(xué)藥劑進(jìn)行防治常常是病蟲害防治工作中最有效、最直接的手段，但如果使用不當(dāng)，容易對(duì)香菇造成藥害，產(chǎn)品不合格進(jìn)而對(duì)人體健康構(gòu)成危害[5]。

多菌靈（Carbendazim）曾是國(guó)內(nèi)登記可在食用菌上使用的農(nóng)藥產(chǎn)品（http://www.chinapesticide.gov. cn/），為苯并咪唑類廣譜內(nèi)吸性殺菌劑，對(duì)許多真菌（子囊蔭、半知菌和擔(dān)子菌） 有抑制和殺滅作用[6]，胡建偉等[7]的研究結(jié)果表明毛霉、根霉、木霉、曲霉和青霉菌絲對(duì)多菌靈較敏感。要海蘭等[8]通過(guò)室內(nèi)與棚內(nèi)試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)多菌靈WP500倍、l 000倍兩種濃度處理對(duì)綠色木霉菌、黑根霉菌有極顯著的抑制效果，因而有時(shí)被用于食用菌的生產(chǎn)中。

本文針對(duì)香菇生產(chǎn)的特點(diǎn)，選擇在菌棒制作和出菇管理這兩個(gè)重要環(huán)節(jié)中使用多菌靈，以研究其對(duì)香菇生長(zhǎng)發(fā)育的影響以及在子實(shí)體中殘留的情況，探討多菌靈在香菇生產(chǎn)中的合理使用及殘留控制，為香菇的安全生產(chǎn)、產(chǎn)品質(zhì)量的控制提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1供試菌株

香菇9319，中高溫型品種，福建省龍巖市香菇栽培場(chǎng)種植品種。

1.2培養(yǎng)基

PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯（去皮） 20%、葡萄糖2%、瓊脂2%。

種植培養(yǎng)基：木屑78%、麥麩20%、石膏2%，含水量60%。

1.3農(nóng)藥

50%多菌靈可濕性粉劑，購(gòu)于福州市植保站。

1.4多菌靈對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)的影響

1.4.1 PDA平板測(cè)定

將50%多菌靈可濕性粉劑按0.5 g·kg-1、1 g·kg-1、2 g·kg-1的量直接溶于滅菌的PDA培養(yǎng)基，倒平皿，香菇菌絲接種于平板中，以不加多菌靈的作對(duì)照，于25℃下培養(yǎng)，待對(duì)照組快長(zhǎng)滿時(shí)，測(cè)量各個(gè)處理菌落直徑大小，計(jì)算生長(zhǎng)速度。

1.4.2 種植培養(yǎng)基測(cè)定

在種植培養(yǎng)基中，每千克干料分別拌入多菌靈0.5 g、1 g、2 g、4 g、8 g，以不加多菌靈的栽培料為對(duì)照，常壓滅菌24 h，冷卻后接入香菇菌種，置于25℃下培養(yǎng)，測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度。

1.5多菌靈拌料在香菇子實(shí)體中殘留量測(cè)定

根據(jù)多菌靈拌料對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)影響的試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)計(jì)每千克干料拌入多菌靈1 g、2 g和4 g三個(gè)處理，以不加多菌靈作對(duì)照，出菇后采收第1潮子實(shí)體檢測(cè)多菌靈的殘留量。

1.6多菌靈噴施香菇子實(shí)體殘留消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)

根據(jù)NY/T 788-2004《農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》中多菌靈的使用規(guī)范，設(shè)計(jì)其使用劑量為使用說(shuō)明推薦最高用量的1.5倍，即300 g/667m2。在香菇菌棒開袋后子實(shí)體長(zhǎng)至離成熟期1/3大小時(shí)開始噴施，施藥后2 h、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d采樣，檢測(cè)子實(shí)體中多菌靈的含量。

1.7多菌靈不同噴施方法的殘留試驗(yàn)

設(shè)計(jì)多菌靈的使用量分別為100 g/667m2、200 g/667m2、300 g/667m2，施藥次數(shù)1次，子實(shí)體采收間隔期分別為7 d、3 d、2 d、1 d；施藥2次，則間隔5 d第2次施藥，在施藥后2 d進(jìn)行采收。

1.8檢測(cè)方法

多菌靈的檢測(cè)方法，參照GB/T 23380-2009《水果、蔬菜中多菌靈殘留的測(cè)定高效液相色譜法》。

2 結(jié)果與分析

2.1多菌靈對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)的影響

PDA培養(yǎng)基及種植培養(yǎng)基中不同濃度多菌靈對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)影響見(jiàn)表1、表2。

表1 PDA培養(yǎng)基中不同濃度多菌靈對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)影響Tab.1 The effects of carbendazim on mycelia growth of Lentinula edodes in PDA medium

表2 種植培養(yǎng)基中不同濃度多菌靈對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)影響Tab.2 The effects of carbendazim on mycelia growth of Lentinula edodes in artificial medium

從表1和表2可以看出，在PDA和種植培養(yǎng)基中添加多菌靈，均對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)產(chǎn)生很強(qiáng)的抑制作用，且達(dá)到極顯著水平。隨著多菌靈添加量的增加，對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)的抑制作用加強(qiáng)。添加同濃度的多菌靈，PDA培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)抑制率高于種植培養(yǎng)基中，這可能是由于在PDA培養(yǎng)基中，多菌靈可濕性粉劑直接添加，未經(jīng)高溫滅菌，而在種植培養(yǎng)基中，多菌靈經(jīng)高溫滅菌，多菌靈含量可能有所降解，因此對(duì)菌絲的毒性降低。

2.2多菌靈拌料栽培對(duì)香菇子實(shí)體農(nóng)藥殘留量影響

每千克香菇種植培養(yǎng)料干重中分別拌入1 g、2 g和4 g的50%多菌靈可濕性粉劑，新鮮香菇子實(shí)體均可檢測(cè)到多菌靈，其含量分別是0.028 mg·kg-1、0.036 mg·kg-1、0.021 mg·kg-1，符合我國(guó) 《NY/T 749-2003綠色食品食用菌》限定的0.1 mg·kg-1要求。

2.3多菌靈噴施香菇子實(shí)體殘留消解動(dòng)態(tài)

待香菇子實(shí)體長(zhǎng)到1/3大小時(shí)開始噴施多菌靈，其在香菇子實(shí)體中的殘留量情況見(jiàn)表3，并以2 h（1/12 d）為對(duì)照。

表3 香菇中多菌靈的消解動(dòng)態(tài)Tab.3 Degradation of carbendazim in Lentinula edodes

由表 3可見(jiàn)，消解方程為 y=17.2866e-1.0395x，R2為0.9647。多菌靈在香菇子實(shí)體中消解比較快，其 T1/2為 0.67 d，噴施 2 h的殘留量為16.191 mg·kg-1，經(jīng)過(guò)1 d后消解至4.585 mg·kg-1，消解量達(dá)11.606 mg·kg-1。噴施4 d后，多菌靈在子實(shí)體中的殘留量?jī)H為0.022 mg·kg-1，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于0.1 mg·kg-1，達(dá)到綠色食品要求。

2.4不同施藥方法與香菇子實(shí)體農(nóng)藥最終殘留量的關(guān)系

根據(jù)香菇的栽培特點(diǎn)，從施藥劑量、施藥次數(shù)及采收間隔期這三方面考察多菌靈在香菇子實(shí)體中的殘留情況。多菌靈在香菇子實(shí)體上的施藥方法及殘留結(jié)果見(jiàn)表4。

由表4可見(jiàn)，噴施3種劑量多菌靈7 d后采收的香菇子實(shí)體，多菌靈的殘留量均小于0.1 mg·kg-1，達(dá)到綠色食品要求。噴施劑量100 mg·kg-1，采收間隔期3 d，其殘留量為0.736 mg·kg-1，只符合無(wú)公害限量要求。而其它施藥方法，香菇子實(shí)體中多菌靈的殘留均超過(guò)限量要求，施藥次數(shù)2次的殘留量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于施藥1次的，隨著施藥劑量的提高，其殘留量也增加，同時(shí)施藥后采收的間隔期越短，多菌靈的殘留量也越大，易造成香菇子實(shí)體的殘留量嚴(yán)重超標(biāo)。因此，要在香菇生產(chǎn)中安全使用多菌靈，必需間隔7 d或以上才能采收。

表4 不同施藥方法香菇子實(shí)體中多菌靈殘留量Tab.4 The residues of carbendazim with different dosage in Lentinula edodes

3 結(jié)論與討論

多菌靈因高效低毒被廣泛使用于作物上，已有的研究結(jié)果表明其也是食用菌生產(chǎn)中常見(jiàn)污染菌木霉等雜菌的有效防治藥劑[8]。張浩等[9]用50%多菌靈可濕性粉劑噴灑平菇子實(shí)體，研究多菌靈的殘留動(dòng)態(tài)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)原始沉積量為3.214 mg·kg-1時(shí)的半衰期為2.58 d。本文使用50%多菌靈可濕性粉劑噴灑香菇子實(shí)體原始沉積量16.19 mg·kg-1時(shí)的半衰期為0.67 d，表明子實(shí)體和施藥量的不同將影響農(nóng)藥半衰期，此外，平菇一般栽培于溫度較低季節(jié)，香菇9319栽培于溫度較高的夏、秋季節(jié)，可能環(huán)境溫度的不同也是影響農(nóng)藥半衰期長(zhǎng)短的重要因素之一。

噴灑使用濃度、使用次數(shù)和采收間隔期對(duì)多菌靈的殘留量影響顯著。本次試驗(yàn)中使用100 g/667m2的量，并且使用1次，采收間隔期在3 d以上，產(chǎn)品能達(dá)到無(wú)公害殘留的標(biāo)準(zhǔn)。而使用同樣劑量、噴灑2次，由于采收間隔期縮短，導(dǎo)致殘留量高，為6.474 mg·kg-1，遠(yuǎn)高于無(wú)公害殘留的標(biāo)準(zhǔn)。噴灑量在200 g/667m2以上且間隔期低于3 d時(shí)都將引起多菌靈殘留量的超標(biāo)。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，夏秋栽培香菇9319時(shí)，使用合適劑量的多菌靈，在采收間隔期保證7 d及以上時(shí)，多菌靈在香菇子實(shí)體中的殘留符合無(wú)公害要求或綠色標(biāo)準(zhǔn)。多菌靈在香菇栽培過(guò)程中的降解，時(shí)間是一個(gè)非常重要的影響因素。

在培養(yǎng)料中拌入多菌靈，可以降低培養(yǎng)菌棒的污染率，但也會(huì)影響香菇菌絲的生長(zhǎng)，使用濃度越高，對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)的抑制越強(qiáng)，在拌藥量為0.5 g·kg-1時(shí)，菌絲抑制率為10%，達(dá)到顯著效果。暴紀(jì)春等[10]的研究結(jié)果也表明，多菌靈對(duì)香菇菌絲生長(zhǎng)影響較強(qiáng)，在生產(chǎn)中不宜使用或要嚴(yán)格控制拌料時(shí)的濃度。同時(shí)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，在拌料中使用多菌靈含量低于4 g·kg-1，香菇子實(shí)體多菌靈的含量未超過(guò)1 mg·kg-1。

綜上分析，在香菇生產(chǎn)中拌料使用多菌靈容易影響香菇菌絲的生長(zhǎng)，在出菇階段噴灑多菌靈，劑量使用不當(dāng)、采收時(shí)間間隔期縮短都容易造成子實(shí)體殘留的超標(biāo)，因此多菌靈在香菇生產(chǎn)中應(yīng)慎重使用。食用菌在生產(chǎn)過(guò)程中一般不用或較少使用農(nóng)藥，但有些季節(jié)性生產(chǎn)的菇類，有時(shí)會(huì)發(fā)生較為嚴(yán)重的有害生物為害，應(yīng)盡量采用物理或生物的方法防控。農(nóng)藥的使用即影響食用菌菌絲的生長(zhǎng)，又容易造成食用菌產(chǎn)品農(nóng)殘超標(biāo)，特別是產(chǎn)品要求達(dá)到綠色食品以及產(chǎn)品定位對(duì)外貿(mào)易時(shí)應(yīng)杜絕使用，從源頭上控制污染，這樣產(chǎn)品才能符合日本、歐盟等對(duì)多菌靈極低限值，避免遭受貿(mào)易損失。

[1]謝福泉，謝寶貴，羿紅，等.福建省袋栽香菇主要菌株交配型測(cè)定及品種鑒別[J].福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，33（4）：521-526.

[2]陳俏彪，吳全聰，吳應(yīng)淼.浙江省代料香菇病蟲害調(diào)查[J].食用茵學(xué)報(bào)，2006，13（2）：69-73.

[3]胡清秀，宋金娣，管道平.食用菌病蟲害危害分析與防治關(guān)鍵控制點(diǎn)[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2008，24（12）：401-406.

[4]劉建密，李晶，上官舟建.代料香菇病蟲害及其防治[C]//海峽兩岸第十屆菌物學(xué)暨第三屆食藥菌學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集.武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011：339-343.

[5]吳應(yīng)淼，陳俏彪，毛可紅，等.代料香菇病蟲害綜合防治技術(shù)[J].中國(guó)食用菌，2006，25（5）：51-52.

[6]肖奎，葉華智.多菌靈對(duì)茶樹菇菌絲生長(zhǎng)的影響及其在子實(shí)體中的殘留[J].中國(guó)食用菌，2008，27（3）：31-33.

[7]胡建偉，龔明福，彭英，等.多菌靈和石灰對(duì)5種霉菌的抑制效果[J].中國(guó)蔬菜，2003（3）：41.

[8]要海蘭，把存芳，賈秀芬，等.食用菌主要雜菌—綠色木霉、黑根霉藥劑防治試驗(yàn)[J].食用菌，2010，32（4）：60-61.

[9]張浩，張祥輝，逯忠斌，等.食用菌中多菌靈和噻菌靈殘留動(dòng)態(tài)的研究[J].食用菌，2009，31（2）：36-37.

[10]暴紀(jì)春，趙桂云，趙洪彬，等.不同濃度度的多菌靈對(duì)食用菌菌絲生長(zhǎng)的影響[J].中國(guó)林副特產(chǎn)，2006（1）：12，49.

木耳炒臘肉

黑木耳味甘性平，有涼血、止血作用，主治咯血、吐血、衄血、血痢、崩漏、痔瘡出血、便秘帶血等，因其含鐵量高，可以及時(shí)為人體補(bǔ)充足夠的鐵質(zhì)，所以是一種天然補(bǔ)血食品。黑木耳含有維生素k和豐富的鈣、鎂等礦物質(zhì)，能減少血液凝塊，預(yù)防血栓等癥的發(fā)生，有防治動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病的作用。

主料：干黑木耳、臘肉、胡蘿卜、青辣椒

輔料：植物油、鹽、姜、味極鮮、雞精、蒜苗

做法：

1把木耳用溫水泡，去蒂洗凈，臘肉泡3小時(shí)，用蒸鍋蒸30分鐘，晾一會(huì)切片。

2胡蘿卜洗凈去皮切菱形、姜切末，蒜苗、青辣椒洗凈切段。

3熱鍋涼油，油熱8成，下姜末、胡蘿卜翻炒出香味，下木耳、辣椒、鹽翻炒均勻。

4加臘肉、少許水燜炒2分鐘，加蒜苗、味極鮮、雞精翻炒均勻即可。

黑木耳最好用溫水泡；臘肉多泡可減少咸味；先加少許鹽翻炒木耳、胡蘿卜，這樣臘肉不用加鹽。

中國(guó)食用菌信息網(wǎng)

2015.04.30

Effects of Carbendazim on Mycelia Growth of Lentinula edodes and Residue in Fruit Body

LIU Xin-rui1,2,LI Zhi-yin1,2,XIE Bao-gui1,2,GAO Min4,DENG You-jin1,2,JIANG Yu-ji1,3
(1.Mycological Research Center,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;2.College of life sciencer, Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;3.College of Food Science,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;4.Putian institute for drug control,Putian 351100,China)

The effect of carbendazim on mycelia growth of Lentinula edodes strain 9319 and residue in fruit body were studied, and carbendazim was used in the artificial medium and fruiting phase.The results showed that mycelia growth of Lentinula edodes strain 9319 was restrained obviously.In the mushroom phase carbendazim was sprayed on fruit body 300 g per 667 m2one time,then its half－life in fruit body was 0.67 day.While spraying carbendazim on fruit body 100 g per 667 m2one time and then after three day and seven day,the carbendazim in fruit body was less than 1 mg·kg－1,but over 0.1 mg·kg－1.The carbendazim in fruit body would be over 1 mg·kg－1if the carbendazim used over 100 g per 667 m2.So it should be careful use the carbendazim in Lentinula edodes cultivation.

Lentinula edodes;carbendazim;pesticide residue;non－pollution;green food

A

1003-8310（2015）03-0068-04

10.13629/j.cnki.53－1054.2015.03.017

國(guó)家支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2013bad16b03）；福建省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目（K83139295）。

劉新銳（1980－），男，碩士，助理研究員，主要從事食用菌方面研究。E－mail:liuxr3623@163.com

**通信作者：江玉姬（1965－），女，博士，教授，主要從事食用菌栽培、安全生產(chǎn)方面研究。E－mail:jyj1209@163.com

2015－03－10