■繆萬榮 楊正德 羅愛平 劉 燕

（1.貴州大學動物科學學院，貴州貴陽 550025；2.貴州大學釀酒與食品工程學院，貴州貴陽 550025）

犢牛代乳料是哺乳期犢牛液態(tài)飼料階段的主要日糧形式，代乳料、犢牛料人工哺育方案是促進早期斷奶犢牛由以真胃、小腸消化為主的酶消化向前胃機能發(fā)育并形成微生物消化的重要技術環(huán)節(jié)[1]。牛乳蛋白是牛屬動物長期進化過程中所形成的初生犢牛最理想的食物蛋白來源，其蛋白質的營養(yǎng)與免疫特性及氨基酸的組成與比例較非乳源性蛋白更易為犢牛消化吸收和有效利用[2-5]。自20世紀80年代歐盟對牛奶生產實行配額制，乳源性蛋白供應日趨緊張，探求消除或降低代乳料中廉價非乳源性蛋白的營養(yǎng)抗原應激成為領域研究重點[6]。隨著飼料原料工業(yè)技術的發(fā)展與進步，國內外對犢牛代乳料中非乳源性蛋白的原料選擇與飼喂效果已有較為廣泛的研究與應用，但由于非乳源性營養(yǎng)抗原應激導致犢牛腹瀉與生產性能低下，替代比例長期徘徊在50%左右，而對代乳料、犢牛料特定哺育方案的研究則未見報道[7]。鑒于初生犢牛早期斷奶存在真胃與小腸消化酶系發(fā)育不全、代乳料中各種非乳源性營養(yǎng)抗原應激、瘤胃微生物區(qū)系發(fā)育滯后等生物學障礙，于2014年9月至2014年12月在貴州省清鎮(zhèn)市奶牛養(yǎng)殖示范基地，研究非乳源性蛋白不同替代比例代乳料中添加非抗生素營養(yǎng)調控劑、外源復合酶制劑以及代乳料-犢牛料不同過渡時間的哺育方案對初生～2月齡犢牛生長發(fā)育效果的影響，為犢牛早期斷奶技術和奶公犢的肉牛資源化利用提供技術參數。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

選擇品種來源一致、平均出生時間1.83 d的中國荷斯坦初生健康公犢36頭，按實測初生重（38.00±2.83）kg基本一致的原則隨機分為9組，每組4頭，每組1欄，散欄連槽飼養(yǎng)。

1.2 試驗設計

以代乳料中非乳源性蛋白不同替代比例、非抗生素營養(yǎng)調控劑、外源復合酶制劑以及代乳料-犢牛料不同哺育方案為試驗因子，每個因子設3個水平，采用L9（34）正交試驗設計。各因子的設計水平根據本研究小組前期研究基礎[2-3]進一步優(yōu)化確定。非乳源性蛋白替代比例設70%、85%、100%3個水平，相當于代乳中相應加入全脂奶粉25%、12.5%、0%；非抗生素營養(yǎng)調控劑設0.24%、0.36%、0.48%3個水平，其中含甘露寡糖300 mg/g，嗜酸乳桿菌、芽孢桿菌、枯草桿菌各3×108cfu/g；復合酶制劑設0.10%、0.20%、0.40%3個水平，其中含α-淀粉酶1 200、胃蛋白酶7 500、糖化酶42 500活性單位/g；哺育方案設為代乳料7周+犢牛料1周過渡（7+1）、代乳料5周+犢牛料3周過渡（5+3）、代乳料3周+犢牛料5周過渡（3+5）3個水平。試驗設計見表1。

表1 L9（34）正交試驗設計

1.3 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平

代乳料中非乳源性蛋白以大豆?jié)饪s蛋白為主，膨化大豆為輔；乳源性蛋白以全脂奶粉為主，低蛋白乳清粉為輔。能量以糊化淀粉為主，植物油為輔。犢牛料蛋白全部來源于以豆粕為主的常規(guī)植物性蛋白；礦物元素及維生素參照NRC（2001）[4]犢牛營養(yǎng)需要設計。粗飼料以玉米青貯為主，玉米酒糟為輔。代乳料采用等DE、等CP設計，營養(yǎng)組成為：DE 17.17 MJ/kg、CP 22.96%、鈣1.22%、磷0.80%。犢牛料營養(yǎng)組成為：DE 15.45 MJ/kg、CP 22%、鈣1.20%、磷0.75%。

1.4 飼養(yǎng)管理與測定指標

1.4.1 飼養(yǎng)管理

犢牛于出生后1 h內真胃灌飲初乳4 L，以后哺喂常乳，日喂2次。以引入日為試驗1日齡，1～3日齡哺喂常乳，日哺喂量按參試犢牛平均體重及預期增重之和的16%；從4日齡開始，逐漸用代乳料取代常乳，至19日齡全部飼喂代乳料，日飼喂量以DM計按參試犢牛平均體重及預期增重之和的2%，代乳料用溫水按1（代乳）∶7（溫水）的比例調制成乳狀飲喂；2周齡開始隨意投放少許青粗飼料任其自由采食。每天飼喂2次（7:00，16:00），每次喂料前清洗奶桶，清掃圈舍及食槽；專人觀察記錄犢牛精神狀態(tài)和健康狀況，按牛場常規(guī)程序免疫。

1.4.2 測定指標

體重：犢牛初生重于初生時（喂初乳前）實測，試驗體重分別于試驗第31、62日齡早飼前用感量1 kg的磅秤空腹稱重。

體尺：按常規(guī)測量犢牛的胸圍、體斜長、體高和管圍。初生體尺于稱測初生重后測量，另2次體尺于稱重當日早飼前空腹測量。

1.5 數據的統(tǒng)計及處理

試驗數據用Excel 2007和SPSS 18.0進行整理、統(tǒng)計分析。結果以“平均數±標準差”表示，以 P＜0.05為差異顯著，以P＜0.01為差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 犢牛ADG正交優(yōu)化分析

表2 犢牛ADG正交優(yōu)化分析

由表2可知，4因子對犢牛ADG的調控效果，初生～1月齡以非乳源性蛋白比例為主效因子，以85%水平效果最佳，ADG為778 g，比100%、70%替代比例分別提高163 g（P＜0.01）、90 g（P＜0.05）；以非抗生素調控劑為次效因子；正交優(yōu)化方案為B2C2A1D2。1～2月齡以非抗生素調控劑為主效因子，以0.36%水平效果最佳，ADG為837 g，比0.48%、0.24%水平分別提高159、155 g（P＜0.01）；以復合酶制劑為次效因子；正交優(yōu)化方案為C2D2B2A1。綜合初生～2月齡整個試驗期，以非抗生素調控劑為主效因子，以0.36%水平效果最佳，ADG為802 g，比0.48%、0.24%水平分別提高148 g（P＜0.01）、118 g（P＜0.05）；以非乳源性蛋白比例為次效因子，以85%水平效果為好，ADG為779 g，比100%、70%替代比例分別提高135 g（P＜0.01）、62 g（P＞0.05）；再次為復合酶制劑，以0.20%水平略好；哺育方案的影響相對較小，以代乳料7周+犢牛料1周過渡的方案稍好；正交優(yōu)化方案為C2B2D2A1。

2.2 犢牛體尺發(fā)育

試驗犢牛胸圍、體斜長、體高及管圍見表3。4個因子對犢牛初生～2月齡同一生長階段體尺的影響差異均不顯著（P＞0.05）。試驗犢牛1、2月齡胸圍、體斜長分別是初生時的1.14、1.22倍，1.12、1.20倍；體高、管圍分別是初生時的1.08、1.13倍，1.06、1.18倍。隨著日齡的增長，機體組織器官不斷生長發(fā)育，犢牛初生～2月齡體尺的生長總體以代表體積的體尺——胸圍和體斜長生長強度為大，體高與管圍的生長強度則相對較小。

根據“任何物體的重量等于體積乘以密度”的物理學原理，以實測體重（kg）為因變量，以胸圍（m2）×體斜長（m）代表犢牛體積為自變量，應用回歸原理推導出犢牛體重估測回歸公式[8]：

體重（kg）=胸圍（m2）×體斜長（m）×96.08-10.80（R2=0.992 0，SE=2.70%，P＜0.01）。

表3 試驗犢牛體尺發(fā)育

3 討論

3.1 4因子對早期斷奶犢牛ADG的綜合調控效果

降低或消除非乳源性營養(yǎng)抗原應激和促進包括前胃在內的整個消化系統(tǒng)發(fā)育，是保證犢牛早期斷奶人工培育成功的技術關鍵。對犢牛ADG的影響，非乳源性蛋白在1月齡內為主效因子，1月齡后影響減小，初生～2月齡整個階段為次效因子，以85%替代比例效果為好；非抗生素調控劑在初生～1月齡階段為次效因子，1～2月齡階段及初生～2月齡整個階段為主效因子，均以0.36%水平效果最佳。表明初生犢牛1月齡前對乳源性蛋白存在一定的依賴性；隨著年齡增長，1月齡后對乳源性蛋白的依賴性逐漸降低，而非抗生素調控劑不僅補充了能促進和改善瘤胃形態(tài)與機能發(fā)育為主的有益微生物，且其中的甘露寡糖能調節(jié)胃腸微生態(tài)平衡，從而發(fā)揮消化道菌群在屏障、營養(yǎng)和免疫上的正常功能[9-10]。理論上70%非乳源性蛋白替代比例代乳中乳源蛋白更高，對犢牛的營養(yǎng)抗原應激相對較小，應比85%替代比例有更好的ADG表現(xiàn)，可能以大豆?jié)饪s蛋白為主要非乳源性蛋白來源的代乳料使犢牛提早接觸并適應了植物性飼料，有利于促進包括前胃在內的整個消化系統(tǒng)的提前發(fā)育，弱化了犢牛對乳源性蛋白的依賴，有待進一步研究。復合酶制劑在1月齡內犢牛ADG的影響較小，但1～2月齡階段上升為次效因子，以0.20%水平的效果最佳。表明，犢牛初生～1月齡尤其3周齡內的食物由全乳(常乳)逐漸過渡為代乳，乳源性蛋白比例較高，非乳源性營養(yǎng)抗原影響較小，而4周齡后，犢牛的食物全部為代乳，非乳源性營養(yǎng)抗原攝入增加，消化酶系應激加劇，補充外源復合酶可使消化環(huán)境改善，有效消除或降低各種營養(yǎng)抗原應激的影響，提高養(yǎng)分的消化吸收與利用，與趙曉靜等[11]、刁其玉等[12]、王力生等[13]報道相符。本試驗所用非抗生素營養(yǎng)調控劑和復合酶制劑與其他試驗因子對犢牛消化道內環(huán)境的協(xié)同機制以及最適添加水平有待進一步研究。

3.2 犢牛體尺、體重及其回歸關系

代乳料中非乳源性蛋白不同替代比例、非抗生素營養(yǎng)調控劑、復合酶制劑以及不同哺育方案對初生～2月齡犢牛同一生長階段體尺未見顯著影響。經回歸分析得中國荷斯坦公犢體重估測公式：體重（kg）=胸圍（m2）×體斜長（m）×96.08-10.80。但由于樣本容量與生長階段的局限，公式是否適用于中國荷斯坦公犢其他體重階段的體重估計，有待進一步研究。

4 結論

①在合理添加以甘露寡糖為主的非抗生素營養(yǎng)調控劑與補充外源復合酶的輔助下，代乳中使用85%的非乳源性蛋白對初生～2月齡中國荷斯坦公犢可取得良好的增重效果，最佳優(yōu)化組合方案為非抗生素調控劑0.36%、非乳源性蛋白85%、復合酶制劑0.20%以及哺育方案代乳料7周+犢牛料1周過渡。

②中國荷斯坦公犢初生～2月齡體尺與體重的回歸關系為：體重（kg）=胸圍（m2）×體斜長（m）×96.08-10.80。