用高效液相色譜法測定曲匹布通片溶出度的效果探析

李 姮

（江蘇省連云港市藥品檢驗(yàn)所 江蘇 連云港 222000）

曲匹布通片是臨床上常用的利膽藥。該藥具有療效確切、副作用小等特點(diǎn)，是目前臨床上治療膽道疾病的首選藥。曲匹布通片對患者的膽囊平滑肌具有鎮(zhèn)靜的作用，能促進(jìn)其膽汁的生成。該藥是七十年代未由日本研發(fā)的，并于1981年應(yīng)用于膽道疾病的臨床治療中。我國于1984年由株州湘江制藥廠（現(xiàn)湖南省千金湘江藥業(yè)有限公司）將該藥研制成功，并于同年上市。溶出度是指片劑等固體制劑在規(guī)定溶劑中溶出的速度和程度，它是反映片劑等固體制劑質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)。過去，我國主要采用紫外分光光度法測定曲匹布通片的溶出度，但效果欠佳。近年來，大量的臨床實(shí)踐證實(shí)，用HPLC法測定曲匹布通片溶出度的效果較好，具有準(zhǔn)確、快速、靈敏度高等優(yōu)勢。為了進(jìn)一步探討用HPLC法測定曲匹布通片溶出度的效果，我們進(jìn)行了以下試驗(yàn)：

1 儀器與試劑

1.1 儀器 Waters-2695型高效液相色譜儀，Waters-2996型紫外檢測器，Empower色譜工作站，ZRS—8G智能溶出試驗(yàn)儀（由天津大學(xué)儀器廠生產(chǎn)），塞多利斯BP211D電子分析天平。

1.2 試劑 曲匹布通對照品（由中國藥品生物制品檢定所生產(chǎn)），曲匹布通片（為三個(gè)不同廠家的三批藥品），色譜甲醇，純化水，分析純冰醋酸。

2 方法與結(jié)果

2.1 色 譜 條 件 采用 XDB-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm,5 μm），以甲醇 ：0.1mol-1醋酸溶液（70：30）為流動(dòng)相，將流速設(shè)為1.0 ml/min，將檢測的波長設(shè)為270nm，將柱溫設(shè)為30℃，理論塔板數(shù)（色譜的柱效參數(shù)之一）＞3000，色譜圖中相鄰兩峰的分離度＞1.5。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取曲匹布通對照品100.2mg，置于200ml的量瓶中，向其中加入適量的甲醇，然后進(jìn)行超聲溶解，使之稀釋至刻度，即制得對照品儲(chǔ)備液。精密量取5ml的對照品儲(chǔ)備液，將其置于50ml的量瓶中，用甲醇將其稀釋至刻度，即制得對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取6片曲匹布通片，將其研碎，精密稱取15mg的曲匹布通藥粉，置入1000ml的量瓶中，在瓶中加入500ml的磷酸鹽緩沖溶液（pH值為7.4）。對此溶液進(jìn)行超聲溶解，將其稀釋至刻度后搖勻，用0.45μm的濾膜對此溶液進(jìn)行過濾。然后精密量取此濾液5ml，將其置于10ml的量瓶中，用甲醇將這5ml的濾液稀釋至刻度，即制得供試品溶液。

2.4 線性關(guān)系考察 精密稱取對照品溶液10μL、20μL、30μL、40μL、50μL，分別將其置于50ml的量瓶中，加入甲醇-水（80∶20）溶液稀釋至刻度，并按上述色譜條件進(jìn)樣。以曲匹布通片的質(zhì)量（X）為橫坐標(biāo)，以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸分析，即得出回歸方程和線性范圍。結(jié)果為：Y=6.13×106X+4130，r=0.9997，曲匹布通片的濃度在0.501μg～2.505μg的范圍內(nèi)與吸收度的線性關(guān)系良好。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量取20μL的對照品溶液，將其注入色譜儀內(nèi)，分別在0h、2h、4h、6h、8h測定其峰面積。結(jié)果表明，在12h內(nèi)，曲匹布通對照品溶液峰面積值無明顯變化，其峰面積的標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）為0.9%，表示其穩(wěn)定性良好。2.6 精密度試驗(yàn) 在上述色譜條件下，取曲匹布通對照品溶液20μL重復(fù)進(jìn)樣六次，記錄其峰面積。結(jié)果表明，曲匹布通峰面積的RSD為0.6%。

2.7 加樣回收率試驗(yàn) 分別量取曲匹布通供試品溶液10ml，將其加入到2ml、4ml、6ml的對照品溶液中，然后用甲醇將此混合液定容到20ml的量瓶中，即制得加樣回收的供試品溶液。精密量取20μL加樣回收的供試品溶液注入色譜儀中進(jìn)行分析，以曲匹布通的峰面積計(jì)算其回收率。結(jié)果見表1。

表1 曲匹布通的加樣回收率

2.8 對曲匹布通片溶出度的測定 精密量取供試品溶液10μL注入液相色譜儀中，共測定3個(gè)廠家的3批樣品。結(jié)果顯示3批樣品的溶出量均在80%以上。

3 討論

曲匹布通片是目前臨床上治療膽道疾病的首選藥。該藥的主要成份為曲匹布通。溶出度是反映片劑等固體制劑質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)。目前，大多數(shù)藥品生產(chǎn)企業(yè)已將進(jìn)行溶出度檢測作為控制藥品質(zhì)量的一個(gè)重要手段[5]。過去，我國主要采用紫外分光光度法測定曲匹布通片的溶出度，但此方法具有一定的局限性。近年來，任啟惠[6]等學(xué)者研究認(rèn)為，用HPLC法測定曲匹布通片溶出度的效果較好。

本次研究的結(jié)果證實(shí)，用HPLC法測定曲匹布通片溶出度的效果顯著，具有靈敏度高、重現(xiàn)性好、分離度好、準(zhǔn)確、快速等優(yōu)勢。

[1] 竺心影.藥理學(xué)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,1990:303.

[2] 國家藥品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)第四冊 2002;93

[3] Royal Hanson, Vivian Gray.溶出度實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2007:129.

[4] 吳靜.HPLC法測定羅紅霉素片溶出度[J].中國藥事,2008,22（1）:70.

[5] 國家藥典委員會(huì).中國藥典[S]. 2010二部.北京:人民衛(wèi)生出版

[6] 任啟惠,何建梅.利福平片的溶出度測定[J].藥物分析雜志,1995,15（29）:262-263.