3%苦參堿水劑對黃瓜灰霉病的室內毒力測定和田間防治效果

吳紅玉，陳澤林，侯滿芝，郝曉娟，王美琴*

(山西農業(yè)大學 農學院，山西 太谷 030801)

摘要：苦參堿是一種新型的植物源農藥，對農業(yè)生產上病蟲害的低毒高效防治有著重要意義。本試驗以黃瓜灰霉病為防治對象，采用菌絲生長速率法和常規(guī)噴霧法，對3%苦參堿水劑進行了室內毒力測定和田間藥效試驗。結果表明：苦參堿水劑對黃瓜灰霉病菌的毒力較強，毒力回歸方程為Y=4.649 1+0.523X，EC50為4.687 5 mg·L-1，僅為對照藥劑腐霉利EC50的1/30。同時，田間藥效結果顯示：隨著3%苦參堿水劑用量的增加，對黃瓜灰霉病的田間防治效果增強，當用量為900 mL·hm-2時對黃瓜葉片和果實分別達到了70.36%和90.49%的防治效果。建議在生產中使用900 mL·hm-2的3%苦參堿水劑來防治灰霉病。

關鍵詞：3%苦參堿水劑；黃瓜灰霉病；毒力測定；田間藥效

收稿日期：2015-06-09修回日期：2015-07-09

作者簡介：吳紅玉(1988-)，女(漢)，河北邢臺人，碩士，研究方向：植物病害生物防治

通訊作者：*王美琴，副教授，碩士生導師。Tel:13935492918;E-mail:sxndwmq1973@163.com

基金項目：山西省科技攻關項目(20120311016-2)；博士科研啟動項目(2013YJ10)

中圖分類號：S43文獻標識碼：A

Toxicity Test and Field Efficacy of 3% Matrine AS against Cucumber Gray Mold

Wu Hongyu, Chen Zelin, Hou Manzhi, Hao xiaojuan, Wang Meiqin

(AgriculturalCollege,ShanxiAgriculturalUniversity,taigu030801，China)

Abstract:Matrine AS is a new botanical pesticide, it is very important for the prevention and control of the pest and plant diseases in the future agricultural production. In order to definite the control effect of 3% matrine AS against cucumber gray mold, the mycelium growth rate method and spraying method were adopted to test the toxicity and field efficacy. The results showed that the toxicity of matrine AS againsted Botrytis cinerea was better than procymidone, the virulence regression equation was Y=4.649 1+0.523X, EC50 was 4.687 5 mg·L-1 only 1/30 of the contrast. Meanwhile, the field efficacy results showed that the control effect of 3% matrine to the cucumber gray mold enhanced with the increased dosage. When the dosage is 900 mL·hm-2, the control effect on cucumber leaves and fruits reached 70.36% and 90.49%, respectively. Therefore, the recommended dosage of 3% matrine AS is 900 mL·hm-2 for the prevention and control of gray mold.

Key words:3% matrine AS; Cucumber gray mold; Toxicity test; Field efficacy

灰霉病是保護地栽培中的重要病害之一，可以侵染番茄、黃瓜、茄子、西葫蘆和草莓等，導致幼果腐爛和葉片枯萎，造成巨大的經濟損失。對于灰霉病的防治，目前還主要以化學防治為主。常用藥劑有以腐霉利為代表的二甲酰亞胺類、以多菌靈為代表的苯并咪唑類、以嘧霉胺為代表的苯胺咪唑類和以百菌清為代表的保護性殺菌劑[1,2]。由于多年來殺菌劑的廣泛使用加上灰霉病菌本身具有寄主范圍廣、產孢量大、遺傳變異快和適合度高等特點，使得該病菌對多種殺菌劑產生了抗藥性[3,4]，導致常規(guī)化學防治防效下降。因此選擇高效、低毒、對環(huán)境無污染的生物源農藥可以減緩其變異和產生抗藥性的速度。苦參堿是從苦參中提取的一類生物堿，有高效、低殘留、對人畜低毒的特點，是一種新型的環(huán)保型生物源農藥[5～7]?，F(xiàn)階段對于苦參堿水劑在醫(yī)用抗癌[8,9]和蟲害防治[10～14]方面的應用較多，在病害防治方面相對較少。孟晶巖[15]等比較了腐殖酸銅水劑與苦參堿水劑對蘋果樹腐爛病菌的毒力與田間藥效，證明0.5%苦參堿水劑對蘋果樹腐爛病病菌的抑制效果優(yōu)于福美胂。為了研究苦參堿水劑在設施果蔬灰霉病上的防治效果，本試驗以黃瓜灰霉病為目標，測定了苦參堿對黃瓜灰霉病的室內抑菌作用和田間防效，以期為苦參堿在防治保護地灰霉病的應用方面提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1供試材料

試驗地：晉中市太谷縣農家大棚。黃瓜品種為卓越(青島新干線蔬菜科技研究有限公司)。

供試藥劑：試驗藥劑：3%苦參堿水劑(北京三浦百草綠色植物制劑有限公司)；對照藥劑：50%腐霉利可濕性粉劑(住友上海菱農化工有限公司)。

供試菌株：黃瓜灰霉病菌(山西農業(yè)大學植物病理實驗室提供)。

培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂粉15 g，1 000 mL蒸餾水，pH7.0)。

1.2試驗方法

1.2.13%苦參堿水劑對黃瓜灰霉病菌的毒力測定

母液的配制：用無菌水將3%苦參堿水劑與50%腐霉利可濕性粉劑分別制成1 000 mg·L-1的母液，置于4 ℃的冰箱中保存，使用時用無菌水稀釋至所需濃度。

含藥平板的制備：將PDA培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右，按照藥液與培養(yǎng)基為1∶9的比例制成含藥平板。其中，苦參堿濃度分別為3 mg·L-1、7.5 mg·L-1、15 mg·L-1、37.5 mg·L-1和75 mg·L-1；腐霉利濃度分別為20 mg·L-1、40 mg·L-1、60 mg·L-1、80 mg·L-1和100 mg·L-1。以加入等量無菌水為對照，每個處理4次重復。

接種和測量：用直徑為5 mm打孔器從培養(yǎng)2 d的病菌菌落邊緣取菌絲塊，置于含藥PAD平板中央。然后置于23 ℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng)，以十字交叉法測定第4天的菌落直徑，按以下公式計算抑菌率，并根據(jù)抑菌率的機率值(Y)和質量濃度的對數(shù)值(X)求毒力回歸方程和EC50。

抑菌率/%=[(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對照菌落直徑-5 mm)]×100%

1.2.23%苦參堿水劑對黃瓜灰霉病的田間藥效試驗

本試驗共設5個處理(表1)，在大棚中以2行為一個小區(qū)，小區(qū)面積為14.25 m2。每個處理4個小區(qū)，共20個小區(qū)。每個處理用水量2.5 kg，使用背負式手動工農-16型噴霧器噴霧，均勻噴灑于黃瓜植株上。試驗于2014年2月18日開始，每7天一次，共施藥4次，到3月11日噴藥結束。在3月16日進行調查。調查方法參照農業(yè)部農藥檢定所生物測定室編著的《農藥田間藥效試驗準則(一)》中“殺菌劑防治蔬菜灰霉病藥效試驗準則”有關內容。

病情指數(shù)={Σ[(各級病葉(果)數(shù)×相對級數(shù)值)]/調查總葉(果)數(shù)×9}×100

防治效果/%=[(對照區(qū)病情指數(shù)—處理區(qū)病情指數(shù))/對照區(qū)病情指數(shù)]×100%

表1　農藥使用劑量

2結果與分析

2.13%苦參堿水劑對黃瓜灰霉病菌的毒力測定

室內毒力測定結果表明(表2)：所測試的不同濃度苦參堿水劑對黃瓜灰霉病菌均有抑制作用，隨著苦參堿濃度含量的增加，抑制率逐漸增強，其中毒力回歸方程Y=4.649 1+0.523X，EC50為4.687 5 mg·L-1；對照藥劑50%腐霉利可濕性粉劑的EC50則高達141.304 7 mg·L-1。當苦參堿濃度為75 mg·L-1時對灰霉病菌的抑制率為76.30%。

2.23%苦參堿水劑對黃瓜灰霉病的田間防治效果

在試驗前田間沒有病果，幾乎沒有病葉，并均被摘除，所以初始病情指數(shù)記為0。防治效果由表3可以看出：黃瓜灰霉病對葉片的為害較小，清水對照葉片病指僅為6.31。試驗藥劑3%苦參堿水劑對黃瓜灰霉病的防效隨著濃度的增加而增加，用藥量為900 mL·hm-2時對黃瓜葉片上灰霉病的防效為70.36%，與對照藥劑50%腐霉利可濕性粉劑(1 500 g·hm-2)相比差異不顯著。

對果實的防效由表4可以看出：黃瓜灰霉病對果實的為害較大，清水對照病指達到42.18，3%苦

表2　室內毒力測定結果

注：同列不同字母表示0.05水平差異顯著，下同。

Note : different letters in each column mean significantly different at the level of 0.05, the same as below.

表3　3%苦參堿水劑防治黃瓜灰霉病試驗結果(葉片)

表4　3%苦參堿水劑防治黃瓜灰霉病試驗結果(果實)

參堿水劑對灰霉病果的防效隨著濃度的增加而增加，當濃度為900 mL·hm-2時防效達到90.49%，與其他處理相比差異顯著。而處理2的濃度為675 mL·hm-2的防治效果與對照藥劑之間差異不顯著，分別為78.47%和75.68%。

3結論與討論

本試驗結果顯示，3%苦參堿水劑無論室內毒力還是田間試驗，均對黃瓜灰霉病有較強的抑制效果?？鄥A對黃瓜灰霉病菌的EC50僅為4.6875 mg·L-1，而對照藥劑50%腐霉利可濕性粉劑的EC50為141.304 7 mg·L-1是它的30倍。并且，田間藥效結果與室內毒力測定結果相吻合，3%苦參堿水劑用量為900 mL·hm-2對田間黃瓜果實灰霉病的防治效果為90.49%，與對照藥劑50%腐霉利可濕性粉劑1 500 g·hm-2的防治效果之間差異不顯著，這對于代替和減少化學藥劑的使用具有重要的意義。

目前，苦參堿在農業(yè)害蟲的防治上應用較多，對其機理的前期研究也取得了一定的成果[17]，而作為殺菌劑的使用則相比之下很少，已報道的僅有對梨黑星病[18]、小麥白粉病[19]、番茄[20]和辣椒[21]病毒病、果樹腐爛病[15,22]等少數(shù)幾種植物病害，對其作為殺菌劑的推廣應用缺乏理論指導，急需增加苦參堿在防治植物病害方面的研究。而且現(xiàn)階段，對苦參堿作為農藥使用方面的研究，只停留在將苦參堿的提取物經過簡單加工后直接作用在病蟲害的防治上，其生物活性成分研究很少。因此，苦參堿農藥的作用機理、作用范圍以及對有害生物的影響等也有待于進一步的研究。

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(編輯：張貴森)