張思雅+何敬琦

摘要：目的：采用高效液相色譜法建立蘭索拉唑含量測(cè)定方法。方法：AlltimaTM C18（4.6mm×250mm，5μm）為色譜柱；流動(dòng)相為甲醇-水-三乙胺-磷酸（600：400：5：1.5）[用磷酸溶液（1→10）調(diào)節(jié)PH值至7.3]；檢測(cè)波長(zhǎng)為284nm；流速為1.0ml/min。結(jié)果：本方法加樣回收率測(cè)定平均回收率為100.08%，RSD為0.42%（n=6）。準(zhǔn)確度試驗(yàn)符合測(cè)定要求。蘭索拉唑濃度在0.09mg/ml～0.21mg/ml范圍內(nèi)，具有良好的線性關(guān)系。重復(fù)性、中間精密度、進(jìn)樣精密度試驗(yàn)均符合方法學(xué)試驗(yàn)要求。供試品溶液在室溫條件下5小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可有效控制注射用蘭索拉唑的含量。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法 蘭索拉唑 含量測(cè)定

中圖分類號(hào)：O657 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-3791（2015）02（b）-0000-00

蘭索拉唑?yàn)楸讲⑦溥蜓苌铮瑸槔^奧美拉唑之后的新一代的質(zhì)子泵抑制劑，能有效地抑制胃酸分泌，治療胃酸相關(guān)性疾病。國(guó)外大量臨床應(yīng)用證明，蘭索拉唑?qū)ο詽冇泻芎玫寞熜?，由血液吸收入壁?xì)胞后作用于壁細(xì)胞質(zhì)子泵即抑制H+/K+-ATP酶的活性，從而持續(xù)抑制胃酸分泌。

蘭索拉唑不耐酸，目前比較普遍給藥方式為口服的蘭索拉唑腸溶片和腸溶膠囊，起效較慢，而改變給藥途徑為靜脈給藥的注射用蘭索拉唑提高了蘭索拉唑的生物利用度，縮短了起效時(shí)間。為保證產(chǎn)品質(zhì)量，我們擬用高效液相色譜法對(duì)其含量測(cè)定方法進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

Agilent 1260高效液相色譜儀；AlltimaTM C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；MS105型精密電子天平（梅特勒）；蘭索拉唑?qū)φ掌罚ㄅ?hào)：100709-201304，含量為99.8%，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；注射用蘭索拉唑（30mg，以C16H14F3N3O2S計(jì)，自制）；甲醇、三乙胺、磷酸均為色譜純，水為注射用水。

2 含量測(cè)定方法

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，AlltimaTM C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-水-三乙胺-磷酸（600：400：5：1.5）[用磷酸溶液（1→10）調(diào)節(jié)PH值至7.3]，檢測(cè)波長(zhǎng)為284nm；流速為1.0ml/min；柱溫30℃；進(jìn)樣量20μl。調(diào)節(jié)流動(dòng)相比例使蘭索拉唑峰的保留時(shí)間約為16分鐘。

2.2 測(cè)定法

精密稱定樣品，約含蘭索拉唑15mg，置100ml容量瓶中，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml與甲醇-水（60：40）溶液適量，超聲使溶解，用甲醇-水（60：40）溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取蘭索拉唑?qū)φ掌?，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

3 方法學(xué)試驗(yàn)

3.1 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

按照制劑處方，分別稱取18mg、15mg、12mg的蘭索拉唑?qū)φ掌犯?份，分別加入處方量的輔料于同一100ml容量瓶中，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml與甲醇-水（60：40）溶液適量，超聲使溶解，用甲醇-水（60：40）溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液分別作為測(cè)定濃度120%、100%、80%的供試品溶液，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算測(cè)得量和回收率，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

加入量（mg）

測(cè)得量（mg）

加樣回收率（%）

平均回收率（%）

RSD（%）

18.01

18.07

100.33

100.08

0.42

18.03

17.99

99.78

18.10

18.08

99.89

15.02

15.01

99.93

15.04

15.06

100.13

15.08

15.16

100.53

12.02

12.12

100.83

12.01

11.95

99.50

12.05

12.03

99.83

結(jié)果表明：含量測(cè)定平均回收率為100.08%，RSD為0.42%，準(zhǔn)確度試驗(yàn)符合測(cè)定要求。

3.2 線性范圍試驗(yàn)

儲(chǔ)備液的制備：稱取蘭索拉唑?qū)φ掌?5mg，置50ml容量瓶中，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml與甲醇-水（60：40）溶液適量，超聲使溶解，用甲醇-水（60：40）溶液稀釋至刻度，作為儲(chǔ)備液。

精密量取上述溶液3ml、4ml、5ml、6ml、7ml，分別置10ml容量瓶中，加甲醇水（60：40）溶液稀釋至刻度，作為線性試驗(yàn)溶液。分別精密量取20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以蘭索拉唑濃度與相應(yīng)峰面積計(jì)算線性回歸方程，y=13263x-368.8，相關(guān)系數(shù)r=0.9994。結(jié)果表明，蘭索拉唑濃度在0.09mg/ml～0.21mg/ml范圍內(nèi)，具有良好的線性關(guān)系。

3.3 重復(fù)性試驗(yàn)

取供試品，照含量測(cè)定項(xiàng)下方法試驗(yàn)，重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算其平均值。

結(jié)果表明：6次測(cè)定的平均含量為標(biāo)示量的101.98%，RSD為0.21%，平行性好，重復(fù)性試驗(yàn)符合測(cè)定要求。

3.4 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品，照含量測(cè)定項(xiàng)下方法試驗(yàn)，每隔1小時(shí)測(cè)定一次，共測(cè)定5次，計(jì)算其平均值。

結(jié)果表明：蘭索拉唑平均含量為標(biāo)示量的101.44%，RSD為0.36%，供試品溶液在室溫條件下5小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

3.5 進(jìn)樣精密度試驗(yàn)

取供試品溶液，精密量取20μl，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次。

結(jié)果表明：蘭索拉唑平均峰面積為11891.5，RSD為0.56%，該方法進(jìn)樣精密度良好。

3.6 中間精密度試驗(yàn)

取供試品，照含量測(cè)定項(xiàng)下方法試驗(yàn)，變動(dòng)因素為不同日期，不同人員。計(jì)算其平均值。

結(jié)果表明：蘭索拉唑平均含量為標(biāo)示量的101.48%，RSD為0.41%，該測(cè)定方法中間精密度良好。

4 樣品含量測(cè)定

取三批供試品，照含量測(cè)定方法分別進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明：三批供試品含量均為98.0%～102.0%之間。

5 討論

建立的高效液相色譜法通過(guò)準(zhǔn)確度試驗(yàn)、線性范圍試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)、進(jìn)樣精密度試驗(yàn)及中間精密度試驗(yàn)等方法學(xué)試驗(yàn)，表明該含量測(cè)定方法具有準(zhǔn)確、可靠、靈敏度高等特點(diǎn)，可有效控制注射用蘭索拉唑的含量。

參考文獻(xiàn)

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