氟化鈉抗凝管離心前、后放置時間對血糖測定值的影響

王　路，　劉　旻，　徐　承，　孫雪嬌，　劉　暢，　程　江

(石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗科，新疆 石河子 832000)

氟化鈉抗凝管離心前、后放置時間對血糖測定值的影響

王路1，劉旻，徐承，孫雪嬌，劉暢，程江

(石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗科，新疆 石河子 832000)

摘要：目的探討氟化鈉抗凝管離心前、后放置時間對血漿葡萄糖(簡稱血糖)測定值的影響。方法將同一份血液標本置于5支肝素鈉-氟化鈉管和5支酸化氟化鈉管中，血液標本隨機分為兩組，一組分別于即刻、0.5、1、2、4 h離心后再檢測血糖濃度；另一組立即離心，分別于即刻及放置0.5、1、2、4 h后檢測血糖濃度。結(jié)果肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管離心前放置0.5、1、2、4 h的血糖測定值與即刻測定值比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且2種抗凝管之間差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管及時離心后放置0.5、1、2、4 h的血糖測定值與即刻測定值比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，且2種抗凝管之間差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。離心前、后肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管血漿葡萄糖測定值的差值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論氟化鈉抗凝管如及時離心，血漿葡萄糖濃度可穩(wěn)定4 h。若不能及時離心，肝素鈉-氟化鈉管血糖濃度將在4 h內(nèi)降低，而酸化氟化鈉管能穩(wěn)定4 h。因此，為了立即抑制糖酵解，血液需要酸化。

關(guān)鍵詞：血糖；氟化鈉抗凝管；離心；放置時間；酸化

中圖分類號：

文章編號：1673-8640(2015)01-061-03R446.1

文獻標志碼：碼：A

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.01.015

作者簡介：王路，女，1989生，學(xué)士，主要從事分子生物學(xué)檢測工作。

通訊作者：程江，聯(lián)系電話：0993-2850957。

收稿日期：(2014-03-23)

血漿葡萄糖(簡稱血糖)檢測是目前臨床生化檢驗的常規(guī)項目。糖尿病的診斷和治療有賴于準確的血糖檢測結(jié)果。分析前階段質(zhì)量保證的重要性在于保證檢驗結(jié)果能真實、客觀的反映患者當前病情或健康狀態(tài)[1]。在實際工作中，由于血液離體后會發(fā)生糖酵解而消耗血糖，若不及時離心，則不能反映受檢者的真實狀況。為提高血糖檢測分析前質(zhì)量，我們探討了氟化鈉抗凝管離心前、后放置時間對血糖測定值的影響。

材料和方法

一、材料

1.采血管(1)肝素鈉-氟化鈉采血管：由浙江拱東醫(yī)療科技有限公司提供(批號：1206267)；(2)自制酸化氟化鈉抗凝管(pH值5.5)：準確稱取枸櫞酸0.26 g、枸櫞酸鈉·2H2O 0.7 g、肝素鈉0.3 mg、氟化鈉6 mg，加蒸餾水20 mL溶解，用經(jīng)高壓滅菌的玻璃試管分裝，每瓶0.1 mL，50 ℃烤箱烘干備用。

2.儀器與試劑采用葡萄糖氧化酶法檢測血糖。儀器為ROCHE Modular DPP全自動生化分析儀，試劑為原裝配套試劑(批號：681598-01)。校準品為Roche c.f.a.s校準品(批號：172156-01)。室內(nèi)質(zhì)控品由Bio-Rad 公司提供(批號：4737-04、4738-04)。

二、方法

1.標本采集10 min內(nèi)采集40份志愿者靜脈血液標本(5個人同時為志愿者抽血)，同一份血標本分別置于5支肝素鈉-氟化鈉管和5支自制酸化的氟化鈉管內(nèi)，每管內(nèi)約2 mL，充分混勻，隨機分為兩組，每組20份，一組立即離心，分別檢測即刻及放置室溫0.5、1、2、4 h的血糖。另一組分別于檢測即刻及放置室溫0.5、1、2、4 h后再離心的血糖。

2.質(zhì)控當天標本測定前進行質(zhì)控品的測定。結(jié)果在控時，再進行標本測定，并同時加測質(zhì)控品，2次質(zhì)控結(jié)果均在控視當天標本測定結(jié)果有效。

三、統(tǒng)計學(xué)方法

結(jié)果

肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管離心前放置0.5、1、2、4 h的血糖測定值與即刻測定值比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且兩種抗凝管之間差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管及時離心后放置0.5、1、2、4 h的血糖測定值與即刻測定值比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，且兩種抗凝管之間差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管分別在即刻、0.5、1、2、4 h離心檢測血糖濃度的差值(即肝素鈉-氟化鈉管測定值-酸化氟化鈉管測定值)和離心后在即刻、0.5、1、2、4 h檢測血糖濃度的差值結(jié)果見表2，其變化曲線見圖1。

重復(fù)測量數(shù)據(jù)的方差分析顯示離心前、后放置不同時間的肝素鈉-氟化鈉管和酸化氟化鈉管測定血糖濃度的差值有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

組別抗凝管即刻0.5h1h2h4h離心前肝素鈉-氟化鈉管6.05±1.095.60±1.00*#5.52±0.98*#5.38±0.97*#5.37±0.96*#酸化氟化鈉管6.04±1.096.03±1.096.02±1.086.05±1.106.03±1.09離心后肝素鈉-氟化鈉管5.29±0.985.25±1.005.32±1.015.35±1.005.24±1.02酸化氟化鈉管5.32±0.965.30±0.975.36±0.985.28±0.965.34±0.98

注：與即刻比較，*P<0.05；與酸化氟化鈉管比較，#P<0.05

組別即刻0.5h1h2h4h離心前-0.012±0.0240.425±0.052*0.507±0.045*0.667±0.043*0.668±0.034*離心后-0.032±0.017-0.052±0.037-0.040±0.0320.064±0.031-0.098±0.024

注：與即刻測定差值比較，*P<0.05

圖1　離心前、后放置不同時間的肝素鈉-氟化鈉管和

討論

血糖作為反映糖代謝紊亂的重要指標，其結(jié)果的準確性直接影響到患者的診斷與治療。有研究顯示，臨床上血糖分析的誤差主要來源于標本的采集與保存(5%～10%)，遠高于實驗室分析誤差(<3%)[2]。

在臨床工作中，血液標本一般在采集后2 h左右才能送往檢驗科。在室溫條件下，血液離體后標本中血糖酵解率為每小時5%～7%。在血細胞(白細胞、紅細胞、血小板)增多的情況下，降解的速度更快。為了防止血液離體后血糖發(fā)生酵解，氟化鈉是一種較理想的抗凝劑。當應(yīng)用葡萄糖氧化酶法測定血糖時，采用肝素鈉-氟化鈉作為抗凝劑效果最好[3]。

氟化鈉采血管通過阻斷糖酵解途徑中的烯醇化酶，抑制甘油3磷酸脫氫酶的活性，使葡萄糖分解抑制。但有報道顯示氟化鈉抑制糖酵解不是直接的，完全抑制延長達4 h[4]。氟化鈉采血管中血樣離心前放置時間增加會導(dǎo)致葡萄糖濃度測定值降低[5]。立即穩(wěn)定血糖，防止離心前糖酵解的發(fā)生，額外的酸化是非常有必要的[6]。因為枸櫞酸緩沖液(pH值5.5)的pH值遠離糖酵解過程中的3個關(guān)鍵酶(己糖磷酸激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶)的最適pH值，而且氟離子能夠競爭性的抑制酶的作用點，使酶失活，兩者的協(xié)同作用能夠迅速抑制糖酵解。本研究采用酸化氟化鈉管和肝素鈉-氟化鈉管采集血液標本，并放置不同時間后離心檢測血糖濃度。結(jié)果顯示未離心放置不同時間的測定值與即刻測定值比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，與文獻報道[4]一致。由此說明氟化鈉作為糖酵解的抑制劑不夠充分，酸化可取代氟化鈉作為推薦方法。本研究結(jié)果還顯示酸化氟化鈉管和肝素鈉-氟化鈉管立即離心，再放置不同時間后檢測血漿葡萄糖濃度，結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

綜上所述，在檢測血糖濃度，尤其是在進行75 g葡萄糖耐量試驗時，如使用氟化鈉抗凝管采集血液標本且不能及時離心、送檢，則氟化鈉抗凝管需要額外的酸化，這樣才可以獲得精準的血糖濃度。

參考文獻

[1]張衛(wèi)民，劉樹業(yè).正確的標本采集是準確檢測結(jié)果的開始[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，36(1):90-91.

[2]BRUNS DE，KNOWLER WC. Stabilization of glucose in blood samples: why it matters [J]. Clin Chem，2009，55(5):850-852.

[3]田亞平，邱彩琴.血糖測定的方法學(xué)進展與臨床應(yīng)用[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2008，31(3):355-360.

[4]GAMBINO R， PISCITELLI J, ACKATTUPATHIL TA, et al. Acidification of biood is superior to sodium fluoride alone as an inhibitor of glycolysis[J]. Clin Chem，2009，55(5):1019-1021.

[5]張吟眉，王京，李國權(quán).草酸鈉-氟化鈉采血管中血樣離心前放置時間對血漿葡萄糖測定的影響[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10(4):429-430.

[6]YAGMUR E, VAN HELDEN J, KOCH A, et al. Effective inhibition of glycolysis in venous whole blood and plasma samples[J].Laboratoriumsmedizin, 2012, 36(3):169-177.

(本文編輯：龔曉霖)