葉朝陽　　金志春　　彭文苗　　劉　敏　　吳艷婷

1湖北中醫(yī)藥大學(xué)研究生，武漢　4300652湖北省婦幼保健院，武漢　430070

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·文獻(xiàn)綜述·

卵泡液微環(huán)境與體外受精-胚胎移植妊娠結(jié)局相關(guān)性研究進(jìn)展

葉朝陽1，2金志春2彭文苗1劉敏1，2吳艷婷1，2

1湖北中醫(yī)藥大學(xué)研究生，武漢4300652湖北省婦幼保健院，武漢430070

卵泡液由血漿滲出物和卵巢分泌物組成，供給卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞適宜的生存環(huán)境，對卵泡的發(fā)育、卵母細(xì)胞的成熟起重要作用[1]，其作為生物學(xué)窗口反映了排卵前卵母細(xì)胞代謝變化的整個(gè)過程。卵泡液微環(huán)境是十分復(fù)雜的生物學(xué)微環(huán)境，其內(nèi)含有大量細(xì)胞因子、眾多激素、氧化/抗氧化系統(tǒng)及各種代謝產(chǎn)物，對卵泡的發(fā)育、卵母細(xì)胞的成熟、胚胎的質(zhì)量及體外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET)妊娠結(jié)局會(huì)產(chǎn)生影響。現(xiàn)對卵泡液微環(huán)境與IVF-ET妊娠結(jié)局相關(guān)性研究進(jìn)行綜述。

1卵泡液內(nèi)相關(guān)因子與IVF-ET妊娠結(jié)局相關(guān)性

卵泡液中含有大量細(xì)胞因子，它們之間相互作用，構(gòu)成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控體系，與卵泡的生長發(fā)育、卵母細(xì)胞的成熟息息相關(guān)，進(jìn)而影響卵子的受精、胚胎的發(fā)育。

1.1轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)超家族

TGF-β超家族成員眾多，包括轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、生長分化因子(GDF)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)、抗苗勒管激素(AMH)、抑制素(INH)等，在女性生殖中有重要作用。

TGF-β1有促進(jìn)細(xì)胞分化、組織修復(fù)、血管生成、調(diào)節(jié)免疫、促進(jìn)卵子和胚胎發(fā)育等功能。有研究[2]顯示，IVF妊娠患者卵泡液中TGF-β1的濃度明顯高于未妊娠者，提示卵泡液高水平TGF-β1有利于卵母細(xì)胞的成熟、胚泡的著床、胚胎的發(fā)育，是成功妊娠的重要因子。葛明曉等[3]也證實(shí)，益氣血補(bǔ)肝腎中藥通過增強(qiáng)卵泡液TGF-β1表達(dá)顯著改善胚胎質(zhì)量及其發(fā)育潛能，提高了胚胎種植率。

GDF-9與卵泡的生長發(fā)育有關(guān)，能促進(jìn)卵泡膜細(xì)胞合成雄激素，并與顆粒細(xì)胞上的受體結(jié)合，具有調(diào)節(jié)基因表達(dá)的作用[4]。Huang等[5]認(rèn)為，在行IVF周期中，顆粒細(xì)胞中GDF-9的表達(dá)水平與卵泡發(fā)育及排卵相關(guān)，可預(yù)測卵母細(xì)胞質(zhì)量及胚胎發(fā)育潛能。周莉等[6]也指出，疏肝化瘀中藥可協(xié)同促排卵藥調(diào)控顆粒細(xì)胞GDF-9表達(dá)來刺激卵泡發(fā)育，增加卵母細(xì)胞數(shù)量，改善卵細(xì)胞及胚胎質(zhì)量，提高IVF-ET臨床妊娠率。

BMP-15對卵泡內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定、卵母細(xì)胞的生長發(fā)育、胚胎的質(zhì)量具有重要的影響。洪艷麗等[7]指出，中藥益氣養(yǎng)陰方可增強(qiáng)卵巢顆粒細(xì)胞BMP-15表達(dá)，改善卵細(xì)胞質(zhì)量，提高獲卵數(shù)，增加IVF-ET臨床妊娠率。常秀峰等[8]也證實(shí)卵泡液中BMP-15較高水平與優(yōu)質(zhì)卵母細(xì)胞、良好的胚胎發(fā)育潛能相關(guān)。

AMH水平可以反映卵巢儲備功能，預(yù)測卵巢反應(yīng)性，評估IVF妊娠結(jié)局[9]。卵泡液中，AMH的水平已被證實(shí)與卵泡發(fā)育、卵母細(xì)胞質(zhì)量、受精率及著床率呈正相關(guān)，但能否預(yù)測妊娠結(jié)局目前未有統(tǒng)一定論。程萍等[10]發(fā)現(xiàn)，多囊卵巢綜合征(PCOS)患者卵泡液內(nèi)的AMH水平能夠預(yù)測IVF-ET妊娠結(jié)局。相反，Chen等[11]認(rèn)為，AMH水平能預(yù)測PCOS患者IVF周期控制性超促排卵(COH)結(jié)果，但是不能預(yù)測IVF-ET妊娠結(jié)局。

INH在女性生殖系統(tǒng)的亞基原形主要有α、βA、βB三種，由1個(gè)α亞單位和一種β亞單位通過二硫鍵連接而成，分別稱為抑制素A(αβA構(gòu)成，INHA)和抑制素B(由αβB構(gòu)成，INHB)。INHB主要由卵巢顆粒細(xì)胞分泌，在卵泡募集及優(yōu)勢卵泡的選擇中起作用。有研究[12]顯示，卵泡液INHB水平與卵母細(xì)胞質(zhì)量呈正相關(guān)。張文杰等[13]發(fā)現(xiàn)卵泡液INHB含量與年齡呈負(fù)相關(guān)，與獲卵數(shù)、胚胎質(zhì)量呈正相關(guān)，從而推測卵泡液INHB含量與卵巢儲備功能相關(guān)，可以作為IVF-ET妊娠結(jié)局的預(yù)測指標(biāo)。

1.2表皮生長因子(EGF)家族

EGF家族包括轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)、肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)等，在生殖過程中起重要的調(diào)節(jié)作用。

TGF-α由卵泡膜細(xì)胞合成分泌，在卵泡生長、胚胎著床等方面起重要作用。TGF-α參與卵泡發(fā)育，影響卵子質(zhì)量，改善卵泡微環(huán)境，進(jìn)而影響胚胎種植率[14]。進(jìn)一步研究[15]表明，TGF-α抑制卵泡合成分泌孕酮(P)，有效協(xié)調(diào)卵泡液雌二醇/孕酮(E2/P)，防止卵泡過早黃素化，抑制顆粒細(xì)胞和卵丘細(xì)胞凋亡、促進(jìn)顆粒細(xì)胞增殖，增加成熟卵母細(xì)胞數(shù)，提高卵子質(zhì)量，有利于胚胎發(fā)育和著床，改善治療結(jié)局。

HB-EGF為介導(dǎo)胚泡著床的重要因子。那晶等[16]發(fā)現(xiàn)卵泡液中HB-EGF與卵泡大小、卵泡中E2水平、E2/P均呈正相關(guān)，提示HB-EGF通過某種機(jī)制參與卵泡的生長發(fā)育過程，對卵泡的成熟起到正性作用，進(jìn)而促進(jìn)卵母細(xì)胞的成熟。因此，通過檢測卵泡液中HB-EGF可以初步評估卵母細(xì)胞質(zhì)量。王振榮等[17]研究顯示，成熟卵組、優(yōu)質(zhì)胚胎組、妊娠組卵泡液中HB-EGF水平均高于未成熟卵組、劣質(zhì)胚胎組和未妊娠組，表明卵泡液高水平HB-EGF預(yù)示著高質(zhì)量的卵母細(xì)胞、優(yōu)質(zhì)的胚胎，繼而預(yù)示良好的IVF-ET的妊娠率。所以HB-EGF的水平可以直接預(yù)測IVF-ET的結(jié)局。

中期因子(MK)屬于HB-EGF，能夠刺激顆粒細(xì)胞增殖分化、抑制顆粒細(xì)胞凋亡、促進(jìn)卵母細(xì)胞成熟。Hirota等[18]研究發(fā)現(xiàn)，MK在卵泡液中的含量豐富，主要分布于卵泡膜細(xì)胞和顆粒細(xì)胞膜表面，能促進(jìn)卵泡的生長、卵母細(xì)胞的成熟、胚胎的發(fā)育。所以關(guān)于MK的進(jìn)一步探討對IVF-ET成功率的提高有著重要意義。

1.3胰島素樣生長因子(IGF)家族

IGF家族包括IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ、IGF受體(IGFR)、IGF結(jié)合蛋白1～6(IGFBP1～6)、IGF結(jié)合蛋白水解酶，IGF家族在卵泡的生長、卵母細(xì)胞成熟、胚胎發(fā)育等方面發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。Mehta等[19]報(bào)道，行IVF患者卵泡液中IGF-Ⅰ水平與受精率、受精卵卵裂率、囊胚形成率、胚胎種植率及臨床妊娠率均呈正相關(guān)。Wang等[20]發(fā)現(xiàn)，采卵日卵泡液中IGF-Ⅱ、IGFBP-3、IGFBP-4的水平與卵母細(xì)胞成熟和早期胚胎發(fā)育潛能呈正相關(guān)。

1.4血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)家族

VEGF是一種肝素結(jié)合雙鏈糖蛋白，在血管生成、血管通透性改變、細(xì)胞增殖等方面發(fā)揮調(diào)控作用。卵泡液中VEGF能夠促進(jìn)卵泡周圍微血管形成，使卵泡從血液中獲得營養(yǎng)物質(zhì)，為卵泡的發(fā)育、卵母細(xì)胞的成熟、孕卵的著床提供良好的局部環(huán)境。

臨床研究[21]顯示，卵泡液VEGF水平過低或過高會(huì)影響卵母細(xì)胞質(zhì)量、受精率、卵裂率，導(dǎo)致胚胎利用率降低，使臨床妊娠率降低。金銳等[22]得出相同的結(jié)論，并指出卵泡液VEGF水平在1 500～2 000 ng/L時(shí)妊娠結(jié)局最好，推測其機(jī)制可能是VEGF水平過低時(shí)，血管生成不足，通透性差，卵細(xì)胞營養(yǎng)缺乏而凋亡；VEGF水平過高時(shí)，卵細(xì)胞內(nèi)缺氧和(或)低糖導(dǎo)致卵母細(xì)胞發(fā)育不佳。也有研究[23]報(bào)道，在IVF-ET過程中，卵泡液中VEGF水平相對較高的患者獲卵數(shù)多、胚胎質(zhì)量好、妊娠率高。從而推測卵泡液中相對較高水平VEGF提高了卵子和胚胎質(zhì)量，促進(jìn)了早期絨毛血管的形成，改善了妊娠結(jié)局。因此，卵泡液中VEGF水平可以作為預(yù)測IVF-ET結(jié)局的有效指標(biāo)。

1.5白血病抑制因子(LIF)

LIF是一種多功能的細(xì)胞因子，在卵泡液中作為“胚胎營養(yǎng)素”而存在，可以促進(jìn)胚胎發(fā)育、啟動(dòng)胚胎著床。潘一紅等[24]指出，卵泡液中LIF濃度與卵母細(xì)胞成熟率和質(zhì)量呈正相關(guān)，卵泡液中LIF濃度可以反映卵子、胚胎的質(zhì)量。郝天羽等[25]報(bào)道卵泡液LIF濃度與E2、獲卵數(shù)、卵裂率、卵子質(zhì)量、胚胎質(zhì)量呈正相關(guān)，但與IVF-ET結(jié)局無明顯相關(guān)性；而胚胎培養(yǎng)液中LIF可提高優(yōu)質(zhì)胚胎率及臨床妊娠率，預(yù)示較好的IVF-ET結(jié)局。

1.6腫瘤壞死因子(TNF)

TNF-α通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致卵泡的閉鎖。Fabian等[26]發(fā)現(xiàn)卵泡液中TNF-α水平與胚胎質(zhì)量、妊娠率呈負(fù)相關(guān)。進(jìn)一步研究[27]認(rèn)為，TNF-α濃度與顆粒細(xì)胞凋亡率呈正相關(guān)，推測其誘導(dǎo)顆粒細(xì)胞凋亡從而導(dǎo)致IVF-ET不良妊娠結(jié)局。

1.7干擾素-γ(INF-γ)

INF-γ由活化的NK細(xì)胞分泌，INF-γ水平的增高會(huì)導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局。易曉芳[28]發(fā)現(xiàn)，行IVF-ET助孕患者，非妊娠患者卵泡液中INF-γ的濃度值高于妊娠組。王秀霞等[29]研究結(jié)果與其一致，提示卵泡液中INF-γ濃度影響IVF-ET的治療結(jié)局，濃度高的患者不易獲得妊娠。推測機(jī)制可能為INF-γ濃度增高，誘導(dǎo)NK細(xì)胞活化，而活化的NK細(xì)胞具有分泌INF-γ的功能，通過自身的正反饋，使卵泡液中的濃度增加，導(dǎo)致顆粒細(xì)胞凋亡增加，進(jìn)而影響卵子質(zhì)量而使臨床妊娠率下降。

1.8白細(xì)胞介素(IL)

IL是一種多肽因子，現(xiàn)已公認(rèn)的有18種以上，影響生殖過程的各個(gè)環(huán)節(jié)，包括卵細(xì)胞發(fā)育和成熟、排卵及受精、著床、妊娠[30]。

卵泡液中IL-1主要以IL-β形式存在，卵泡液中IL-1β水平可以反映卵母細(xì)胞質(zhì)量。一項(xiàng)前瞻性研究[31]報(bào)道，在IVF中，卵泡液中IL-1β水平顯著較高的患者受精率良好，但與IVF妊娠結(jié)局無相關(guān)性。有研究[32]報(bào)道，卵泡液中IL-2濃度與胚胎早期卵裂相關(guān)，從而推測出IL-2可能促進(jìn)早期胚胎發(fā)育。王秀霞等[33]檢測行IVF-ET患者卵泡液中IL-12、IL-18的濃度，結(jié)果顯示未妊娠組明顯高于妊娠組。進(jìn)一步研究[34]證實(shí)，IL-12、IL-18的濃度與妊娠率、妊娠結(jié)局呈負(fù)相關(guān)，并指出IL-12、IL-18的濃度與CD56+NK細(xì)胞比例相關(guān)系數(shù)呈正相關(guān)；推測IL-12、IL-18通過激活NK細(xì)胞，導(dǎo)致卵泡內(nèi)INF-γ和TNF-α等細(xì)胞因子增加，使顆粒細(xì)胞發(fā)育不良，甚至啟動(dòng)凋亡過程，從而導(dǎo)致卵母細(xì)胞質(zhì)量下降，不良妊娠結(jié)局發(fā)生。

1.9干細(xì)胞因子(SCF)

SCF參與卵泡發(fā)育，是促進(jìn)卵泡募集的重要因子。卵泡液SCF表達(dá)水平有助于評估IVF周期卵泡發(fā)育潛能及預(yù)測IVF結(jié)局。研究[35]表明，IVF取卵日卵泡液SCF濃度與卵泡數(shù)量相關(guān)，卵巢低反應(yīng)、正常反應(yīng)與高反應(yīng)者SCF濃度依次下降而妊娠率隨之上升。趙海波等[36]研究顯示，受精卵子、優(yōu)質(zhì)胚胎中卵泡液SCF水平明顯高于未受精卵子、劣質(zhì)胚胎，提示卵泡液內(nèi)高水平SCF有利于卵母細(xì)胞發(fā)育，提高卵子受精率、卵裂率及優(yōu)質(zhì)胚胎形成率。孫麗君等[2]通過研究發(fā)現(xiàn)，妊娠組患者卵泡液中SCF水平明顯高于未妊娠組，表明SCF可能對卵泡的發(fā)育、卵母細(xì)胞生長及胚泡的著床有重要影響，從而有利于IVF的成功。

1.10粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)

G-CSF是功能很強(qiáng)的刺激骨髓造血細(xì)胞增殖分化的細(xì)胞因子。在女性生殖方面，G-CSF被證實(shí)參與卵泡生長發(fā)育、排卵、卵巢刺激和妊娠等多個(gè)環(huán)節(jié)[37]。越來越多文獻(xiàn)報(bào)道，在IVF過程中，卵泡液中G-CSF可作為卵母細(xì)胞活力和胚胎選擇非侵入性的生物標(biāo)記物。董毅飛等[38]研究顯示，卵泡液中G-CSF含量顯著高于血清，G-CSF含量與獲卵數(shù)呈正相關(guān)，妊娠組卵泡液中G-CSF含量顯著高于未妊娠組，表明卵泡液中G-CSF含量在一定程度上反映了卵巢功能及卵母細(xì)胞質(zhì)量，可能是預(yù)測IVF結(jié)局的有效指標(biāo)之一。然而，Kahyaoglu等[39]認(rèn)為卵泡液中G-CSF水平與良好的卵巢反應(yīng)性及臨床妊娠率之間的關(guān)系還不能證實(shí)。目前關(guān)于G-CSF與IVF-ET妊娠結(jié)局相關(guān)性的報(bào)道較少，有待進(jìn)一步的研究。

2卵泡液中激素與IVF-ET妊娠結(jié)局相關(guān)性

卵泡液中激素包括雌激素、孕激素、雄激素、促卵泡生成素(FSH)、促黃體生成素(LH)、人絨毛膜促性腺激素(HCG)等，在調(diào)節(jié)卵泡發(fā)育、誘發(fā)排卵、促進(jìn)卵母細(xì)胞成熟、維持妊娠等方面具有關(guān)鍵作用。

2.1甾體激素

Chiu等[40]研究顯示，卵泡液中的雌激素水平越高，卵母細(xì)胞的成熟程度及受精能力越高，表明其質(zhì)量也越好。研究[41]證實(shí)，卵泡液內(nèi)E2水平與卵母細(xì)胞成熟度呈正相關(guān)。

孕激素對卵母細(xì)胞的發(fā)育成熟及胚胎的發(fā)育有重要影響[42]。有研究[43]指出，卵母細(xì)胞的成熟及退化與卵泡液中甾體激素環(huán)境關(guān)系密切，卵泡液中10

雄激素在卵泡發(fā)育早期階段起重要作用，低劑量的睪酮(T)是卵泡募集的重要因素之一，但T是否影響IVF-ET妊娠結(jié)局，目前尚存在爭議。有研究[45]表明，卵泡液中T對IVF-ET妊娠結(jié)局無顯著影響。但Carcia-Velasco等[46]認(rèn)為，在低反應(yīng)患者中，應(yīng)用芳香化酶抑制劑可顯著增加卵泡液中T水平，改善IVF妊娠結(jié)局。

2.2其他激素

FSH調(diào)節(jié)卵泡發(fā)育，影響顆粒細(xì)胞增殖和卵泡募集。有研究[47]表明，卵泡液中高濃度FSH有利于卵母細(xì)胞發(fā)育成熟。杜婷等[48]在采卵日收集35例行IVF-ET患者卵泡液中促卵泡生成素受體(FSHR)的表達(dá)水平，結(jié)果提示在IVF-ET中，卵泡液中FSHR的表達(dá)水平影響卵子的質(zhì)量，進(jìn)而影響臨床妊娠率。

卵泡液中一定量的LH濃度對卵母細(xì)胞成熟、維持妊娠有促進(jìn)作用。有研究[49]提示，補(bǔ)腎調(diào)經(jīng)方有利于維持一定濃度的LH水平，進(jìn)而有利于妊娠。馬黔紅等[50]研究發(fā)現(xiàn)，在IVF/胞質(zhì)內(nèi)單精子注射(ICSI)治療周期中，妊娠組卵泡液中的LH水平明顯高于未妊娠組，且與妊娠結(jié)局有關(guān)。

HCG是由滋養(yǎng)細(xì)胞分泌的一種糖蛋白。近年來研究[51]發(fā)現(xiàn)，HCG用于IVF/ICSI周期前預(yù)處理可以提高胚胎質(zhì)量，改善臨床妊娠結(jié)局。張麗麗等[52]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)卵泡液HCG水平處于14～21 nmol/L時(shí)，能獲得較好的卵母細(xì)胞的成熟率、受精率和胚胎發(fā)育結(jié)局，并推測其機(jī)制可能為適合的HCG濃度促進(jìn)了卵母細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核的同步成熟，使卵母細(xì)胞具有較好的受精能力，有助于早期胚胎的發(fā)育。

3卵泡液內(nèi)氧化/抗氧化系統(tǒng)與IVF-ET妊娠結(jié)局相關(guān)性

卵泡液內(nèi)有完整的氧化/抗氧化系統(tǒng)，維持卵泡液微環(huán)境新陳代謝平衡，與IVF-ET的受精率、卵裂率、妊娠率密不可分?？寡趸到y(tǒng)及氧化應(yīng)激從正反兩方面影響著IVF-ET結(jié)局。

卵泡液微環(huán)境中存在活性氧(ROS)，是正常有氧代謝的產(chǎn)物，ROS產(chǎn)生過量，細(xì)胞就會(huì)受到氧化應(yīng)激的損傷。對抗ROS氧化應(yīng)激損傷的總能力稱為總抗氧化能力(TAC)，包括各種抗氧化分子和抗氧化酶系統(tǒng)，如超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)。若抗氧化劑減少，造成ROS濃度升高，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，導(dǎo)致細(xì)胞氧化損傷，氧化損傷標(biāo)記物有丙二醛(MAD)等，可作為預(yù)測卵細(xì)胞發(fā)育潛能和IVF-ET結(jié)局的重要指標(biāo)。

研究[53]表明，高水平ROS影響卵子的質(zhì)量及胚胎發(fā)育，不利于IVF-ET的結(jié)局。但卵泡液TAC水平與IVF-ET妊娠結(jié)局之間的關(guān)系目前尚存在爭議，有研究報(bào)道卵泡液TAC水平較高組妊娠率越高，也有文獻(xiàn)得出了相反的結(jié)論，還有研究認(rèn)為兩者無相關(guān)性。劉景等[54]研究卵泡液中MAD、SOD水平及凋亡對IVF-ET結(jié)局的影響，結(jié)果表明MAD水平與卵子受精率及妊娠結(jié)局呈負(fù)相關(guān)，而SOD與妊娠結(jié)局呈正相關(guān)。有研究[55]報(bào)道，卵泡液中MDA濃度可以預(yù)測受精結(jié)局，GSH水平與卵母細(xì)胞成熟率有顯著差異性，但與妊娠結(jié)局無相關(guān)性，TAC水平不能很好的預(yù)測獲卵數(shù)、受精率及妊娠率。

4卵泡液中代謝物與IVF-ET妊娠結(jié)局相關(guān)性

卵泡液代謝物可以間接反映卵泡液的內(nèi)環(huán)境水平，與卵母細(xì)胞代謝活動(dòng)有關(guān)，進(jìn)一步與卵母細(xì)胞質(zhì)量、胚胎發(fā)育及妊娠結(jié)局有相關(guān)性。夏蘭等[56]回顧性分析13例反復(fù)IVF失敗(RIF組)和15例同期第1次行IVF-ET成功妊娠患者(對照組)的卵泡液代謝組學(xué)，結(jié)果顯示RIF組11種氨基酸含量顯著升高，而某些成分含量顯著降低，由此可知，在一定程度上氨基酸代謝水平的變化能夠反映胚胎的發(fā)育潛能。LIAN等[57]研究發(fā)現(xiàn)，通過對卵泡液蛋白質(zhì)表達(dá)的上調(diào)和下調(diào)，補(bǔ)腎中藥可以緩解臨床癥狀，改善卵母細(xì)胞發(fā)育的微環(huán)境，提高優(yōu)質(zhì)卵母細(xì)胞率和胚胎率，從而促進(jìn)胚胎成功著床，提高IVF患者臨床妊娠率。卵泡液代謝物的具體成分與IVF-ET妊娠結(jié)局之間的確定關(guān)系，仍需進(jìn)一步深入探討。

5微小RNA(miRNA)、瘦素(LP)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)與IVF-ET妊娠結(jié)局相關(guān)性

miRNA是生殖系統(tǒng)的重要調(diào)控因子，通過結(jié)合靶基因特殊位置，調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄后水平，調(diào)控顆粒細(xì)胞的增殖和凋亡，控制類固醇激素的合成和分泌[58]。卵泡液中的miRNA可間接反映卵泡成熟度，根據(jù)卵泡液中miRNA的表達(dá)可對卵母細(xì)胞的質(zhì)量進(jìn)行初步評估[59]。miRNA有望作為評估IVF-ET妊娠結(jié)局的相關(guān)因子。

LP是由脂肪組織分泌的具有生物活性的多肽激素，是肥胖基因的表達(dá)產(chǎn)物，能夠促進(jìn)原始卵泡的啟動(dòng)生長。有報(bào)道[60]表明卵泡液中高濃度LP水平會(huì)影響卵母細(xì)胞質(zhì)量、受精率及優(yōu)質(zhì)胚胎形成率，從而降低了IVF-ET妊娠率。也有研究[61]卻認(rèn)為，卵泡液中LP水平與IVF妊娠結(jié)局無相關(guān)性。因此，卵泡液中LP水平與IVF-ET妊娠結(jié)局之間的關(guān)系尚存在分歧。

MMP-9是生殖過程中組織重塑的關(guān)鍵酶，參與胚胎的種植和發(fā)育。Lee等[62]研究顯示，與IVF未妊娠組相比，妊娠組患者卵泡液中MMP-9表達(dá)高，推測MMP-9可能是預(yù)測IVF成功妊娠結(jié)局的一個(gè)指標(biāo)。Bilen等[63]也報(bào)道卵泡液MMP-9水平和受精率呈正相關(guān)(P=0.02)，并指出卵泡液MMP-9活性可能會(huì)成為卵母細(xì)胞質(zhì)量和IVF成功妊娠的預(yù)測因子。

綜上所述，卵泡的發(fā)育、卵母細(xì)胞的成熟以及胚胎的質(zhì)量都會(huì)影響IVF-ET妊娠結(jié)局。卵泡液微環(huán)境作為卵母細(xì)胞生長發(fā)育的環(huán)境，其內(nèi)含有的細(xì)胞因子、激素、氧化/抗氧化系統(tǒng)及代謝產(chǎn)物相互作用，構(gòu)成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，影響著卵泡的發(fā)育、卵母細(xì)胞的成熟以及胚胎質(zhì)量。因此，研究卵泡液微環(huán)境將有助于預(yù)測卵母細(xì)胞的質(zhì)量和胚胎發(fā)育潛能，從而指導(dǎo)臨床提高IVF-ET的妊娠率，改善妊娠結(jié)局。

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doi：10.3969/j.issn.1674-4616.2016.03.017

(收稿日期：2016-01-17)