梁辰，初海平，王福文

(1山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所，濟(jì)南 250062；2濟(jì)南大學(xué) 山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院；3山東省罕少見(jiàn)病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)

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肢體缺血預(yù)處理對(duì)大鼠腦缺血后海馬的保護(hù)作用機(jī)制研究進(jìn)展

梁辰1,2，初海平1,3，王福文1,3

(1山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所，濟(jì)南 250062；2濟(jì)南大學(xué) 山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院；3山東省罕少見(jiàn)病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)

摘要：缺血性腦血管疾病時(shí)海馬損傷最為嚴(yán)重，肢體缺血預(yù)處理(LIP)可以積極地緩解腦缺血引起的海馬損傷，主要通過(guò)抑制自由基毒性、抑制炎癥反應(yīng)、介導(dǎo)信號(hào)傳導(dǎo)通路、誘導(dǎo)基因表達(dá)等機(jī)制發(fā)揮保護(hù)作用，亦能通過(guò)促進(jìn)熱休克蛋白Hsp70表達(dá)和干細(xì)胞的增殖，以及激活阿片受體和線(xiàn)粒體ATP敏感性鉀通道減輕海馬損傷。

關(guān)鍵詞：肢體缺血預(yù)處理；缺血性腦血管疾??；腦缺血；海馬損傷

目前，缺血性腦血管病的發(fā)病率不斷升高，其中海馬損傷最為嚴(yán)重，迅速恢復(fù)腦血流量是其首要的治療措施。然而大量研究表明，缺血后再灌注可加重缺血組織或器官損傷。因此，臨床上如何防止缺血再灌注損傷是目前亟待解決的問(wèn)題。Kitagawa等[1]發(fā)現(xiàn)，對(duì)沙鼠腦缺血模型進(jìn)行腦缺血預(yù)處理(CIP)可對(duì)缺血5 min的海馬CA1區(qū)椎體神經(jīng)元起到明顯的保護(hù)作用。與此類(lèi)似的許多其他同一器官的缺血預(yù)處理也證實(shí)具有良好的預(yù)防效果。然而這種方法也存在一些弊端，如預(yù)處理程度難掌控、操作復(fù)雜等。遠(yuǎn)隔器官的缺血預(yù)處理就是對(duì)缺血損傷的主要器官以外的器官進(jìn)行程度較小的缺血/再灌注處理，這種使用非重要生命器官預(yù)缺血處理對(duì)抗心、腦等重要器官缺血再灌注損傷的方法[2]為臨床治療疾病提供了新的方法和思路。有文獻(xiàn)報(bào)道，肢體、小腸以及腎臟等遠(yuǎn)隔器官的短暫缺血等均對(duì)缺血后腦海馬區(qū)椎體神經(jīng)元有保護(hù)作用。肢體缺血預(yù)處理(LIP)通過(guò)對(duì)肢體的周期性缺血/再灌注的方法間接治療或減輕腦損傷，尤其對(duì)海馬區(qū)神經(jīng)纖維具有良好的保護(hù)作用[3]，但其機(jī)制尚不清楚，研究較多的有抑制自由基毒性、抑制炎癥反應(yīng)、介導(dǎo)信號(hào)傳導(dǎo)通路等?，F(xiàn)就LIP對(duì)大鼠腦缺血后海馬的保護(hù)作用機(jī)制研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1抑制自由基毒性

2抑制炎癥反應(yīng)

腦缺血/再灌注時(shí)伴隨著局部過(guò)度炎癥反應(yīng)，是造成海馬區(qū)損傷的主要原因之一，許多炎癥細(xì)胞和炎癥介質(zhì)參與了炎癥反應(yīng)。炎癥細(xì)胞包括白細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞，其中白細(xì)胞是造成神經(jīng)損傷的主要炎癥細(xì)胞。以往的研究表明，腦缺血后，白細(xì)胞黏附在腦血管壁上會(huì)加劇腦水腫的形成[8]，白細(xì)胞的積累還會(huì)刺激氧自由基和蛋白水解酶的釋放[9,10]，同時(shí)腦缺血再灌注后，浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生大量的炎癥介質(zhì)細(xì)胞因子、趨化因子和黏附分子等，進(jìn)而促進(jìn)白細(xì)胞黏附并浸潤(rùn)內(nèi)皮細(xì)胞，進(jìn)一步加重海馬區(qū)神經(jīng)元損傷。Yannopoulos等[11]研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)豬雙前肢缺血預(yù)處理后，能夠提高線(xiàn)粒體還原型輔酶Ⅰ(NADH)含量，增強(qiáng)線(xiàn)粒體呼吸鏈功能，明顯減少白細(xì)胞數(shù)目。炎癥反應(yīng)可以激活血管內(nèi)皮細(xì)胞、血小板、免疫細(xì)胞釋放大量細(xì)胞因子IL、THF-α等。這些細(xì)胞因子又反過(guò)來(lái)促進(jìn)了炎癥反應(yīng)，增加興奮性氨基酸、NO、氧自由基的釋放等加重海馬損傷。IL-6參與機(jī)體免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)，其含量迅速增高可加劇神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞及內(nèi)皮因子損傷，是衡量海馬損傷程度的一個(gè)重要標(biāo)志。Wang等[12]研究表明，LIP后MCAO的SD大鼠較單純MCAO大鼠海馬CA1區(qū)IL-6和IL-17表達(dá)水平顯著減少，提示抗炎作用可以減少海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡。

3介導(dǎo)信號(hào)傳導(dǎo)通路

絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)是一組能被不同的細(xì)胞外刺激(細(xì)胞因子、神經(jīng)遞質(zhì)、激素、細(xì)胞應(yīng)激及細(xì)胞黏附等)激活的絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶，可調(diào)節(jié)包括新陳代謝、細(xì)胞活力、細(xì)胞炎癥、細(xì)胞的壞死和凋亡等一系列的細(xì)胞活動(dòng)。Zhao[13]研究發(fā)現(xiàn)，早期的缺血預(yù)處理可以保護(hù)心肌和腦急性缺血再灌注引起的損傷，其保護(hù)機(jī)制與MAPK有關(guān)。細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK1/2)是MAPK家族的重要成員，參與海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡過(guò)程，但其作用說(shuō)法不一，Ansar等[14]研究發(fā)現(xiàn)ERK1/2抑制劑能夠降低血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)和血栓素(TP)的含量，抵抗由腦缺血引起的血管收縮，進(jìn)而防止神經(jīng)損傷。姜紅升等[15]使用Western blotting法檢測(cè)不同時(shí)長(zhǎng)腦缺血再灌注大鼠海馬CA1區(qū)ERK1/2含量，結(jié)果表明，各時(shí)間點(diǎn)LIP組ERK1/2水平均高于腦缺血/再灌注組，同時(shí)焦油紫染色結(jié)果顯示，LIP組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元數(shù)量較腦缺血/再灌注組明顯增加，而給予ERK1/2上游激酶抑制劑PD98059后，神經(jīng)元數(shù)量較LIP組大幅下降，這表明LIP可通過(guò)激活ERK1/2通路減輕大鼠海馬CA1區(qū)缺血性神經(jīng)元損傷。但Maddahi等[16]研究表明，ERK1/2通過(guò)上調(diào)TNF-α、IL-1β、IL-6等炎癥因子擴(kuò)大炎癥反應(yīng)，加重缺血區(qū)神經(jīng)損傷。

磷脂酰肌醇激酶-3/絲蘇氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是膜受體信號(hào)向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要途徑，在心臟、腎臟、肝臟等多種器官缺血再灌注損傷中發(fā)揮抑制細(xì)胞凋亡作用。PI3K通過(guò)3-磷酸肌醇依賴(lài)性蛋白激酶1(PDK1)磷酸化AKT使其活性增強(qiáng)，影響下游凋亡相關(guān)蛋白如GSK-3β、BAD、FKHR、CaMKⅡ等，發(fā)揮抗凋亡的作用[17]。Peng等[18]研究表明，LIP通過(guò)PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑上調(diào)eNOS減輕海馬CA1區(qū)神經(jīng)損傷，eNOS抑制劑N(ω)-硝基-L-精氨酸甲酯能顯著廢除LIP的神經(jīng)保護(hù)作用，而PI3K的高度選擇性抑制劑LY294002不僅能顯著逆轉(zhuǎn)LIP的神經(jīng)保護(hù)作用，也能明顯抑制LIP誘導(dǎo)的eNOS上調(diào)。JAK/STAT是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一條細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。該信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育以及神經(jīng)細(xì)胞的增殖、生存、分化過(guò)程，并與腦腫瘤、腦缺血等中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理過(guò)程密切相關(guān)。腦缺血后，STAT3過(guò)度活化能促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞死亡，加重腦損傷。Cheng等[19]研究表明，LIP可以通過(guò)下調(diào)STAT3減少TNF-α和核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)的表達(dá)減輕海馬損傷。

4誘導(dǎo)基因表達(dá)

腦缺血可誘導(dǎo)某些基因的表達(dá)，這些基因的表達(dá)可能有助于缺血后神經(jīng)元損傷的恢復(fù)。LIP可增加這些基因的表達(dá), 減輕腦缺血再灌注損傷。原癌基因c-fos是一種即刻早期基因(IEGs)，其蛋白產(chǎn)物Fos蛋白常被用作神經(jīng)元功能活動(dòng)的標(biāo)記物。CIP可促進(jìn)c-fos的表達(dá)[20]。海馬CA1區(qū)c-fos表達(dá)弱且延遲，甚至出現(xiàn)只有c-fos的mRNA，但無(wú)Fos蛋白翻譯的情況，提示c-fos早期表達(dá)對(duì)促進(jìn)缺血后細(xì)胞的存活具有重要作用，LIP可增強(qiáng)損傷性腦缺血后c-fos在海馬CA1區(qū)的表達(dá)[21]。

有研究[22]表明，p63基因的表達(dá)對(duì)腦缺血后神經(jīng)損傷有保護(hù)作用，可能參與腦缺血后神經(jīng)細(xì)胞損傷的凋亡過(guò)程。Lee等[23]研究發(fā)現(xiàn)，腦缺血處理后，海馬CA1區(qū)椎體神經(jīng)元p63表達(dá)明顯高于假手術(shù)組，提示p63可能是調(diào)控腦缺血后神經(jīng)元死亡的關(guān)鍵基因。廖常莉等[24]使用免疫組化法分析表明，LIP處理后的大鼠海馬CA1區(qū)p63基因表達(dá)低于缺血/再灌注組，且HE染色結(jié)果顯示LIP處理后神經(jīng)凋亡減弱，表明LIP對(duì)海馬區(qū)神經(jīng)元的保護(hù)作用可能與下調(diào)p63基因的表達(dá)有關(guān)。

5促進(jìn)Hsp70蛋白表達(dá)

Hsp是在缺血、缺氧等應(yīng)激因素作用下，機(jī)體大量合成的一組蛋白，與缺血性腦損傷等多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病關(guān)系密切，按其相對(duì)分子質(zhì)量大小主要分為Hsp27、Hsp70、Hsp90等，其中Hsp70家族研究最為廣泛。Hsp70作為腦缺血誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種神經(jīng)元保護(hù)性物質(zhì)，可阻止蛋白質(zhì)在壓力下發(fā)生聚集或錯(cuò)誤的折疊，被認(rèn)為與缺血性腦損傷的修復(fù)密切相關(guān)，是預(yù)示受損神經(jīng)元能夠存活的一個(gè)敏感指標(biāo)。Sun等[25]研究表明，Hsp70參與腦缺血后海馬CA1區(qū)椎體神經(jīng)元的保護(hù)作用。Sun等[26]使用Western blotting和免疫組化檢測(cè)LIP處理后的大鼠，發(fā)現(xiàn)海馬CA1區(qū)Hsp70蓄積增多，腹腔注射Hsp抑制劑SB 203580后，LIP對(duì)海馬CA1區(qū)腦損傷的保護(hù)作用減弱。以上研究表明，Hsp70作為一種內(nèi)源性保護(hù)蛋白，參與LIP誘導(dǎo)腦缺血耐受的產(chǎn)生，腦缺血后海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的最終死亡可能與Hsp70合成障礙有關(guān)，Hsp70的表達(dá)上調(diào)是LIP誘導(dǎo)缺血耐受的重要分子機(jī)制之一。

6促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)增殖

NSC是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中可以增殖、遷移、分化成神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的一類(lèi)具有代償功能的細(xì)胞，人腦海馬的齒狀回是NSC的主要存在部位。巢蛋白(Nestin)的表達(dá)伴隨NSC分裂分化的始終，隨著神經(jīng)分化完成而終止，為NSC的特征性標(biāo)志物。這是因?yàn)镹estin是一種中間絲類(lèi)型的蛋白，能夠在NSC特異性表達(dá)，因此可以通過(guò)檢測(cè)Nestin的含量評(píng)價(jià)神經(jīng)損傷的治療效果[27]。張永輝等[28]采用免疫組化法檢測(cè)LIP后的大鼠海馬中心區(qū)冠狀腦切片，發(fā)現(xiàn)其N(xiāo)estin陽(yáng)性細(xì)胞明顯多于假手術(shù)組，表明較輕程度遠(yuǎn)隔肢體缺血能引起NSC增殖，從而提高腦梗死后的局部應(yīng)激能力，加速腦內(nèi)NSC的增殖，保護(hù)腦組織損傷。

7激活阿片受體和線(xiàn)粒體ATP敏感性鉀通道

阿片受體廣泛分布于腦、脊髓、外周感覺(jué)神經(jīng)元及外周自主神經(jīng)元，在海馬區(qū)分布也相當(dāng)廣泛，阿片受體同樣分布在上下肢等其他遠(yuǎn)隔器官，LIP對(duì)海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用可能與介導(dǎo)阿片受體有關(guān)。2011年，Zhou等[29]研究表明，阿片受體拮抗劑納洛酮削弱了LIP后腦梗死面積減少的保護(hù)作用，另外，Akt信號(hào)通路被渥曼青霉素阻斷后同樣抑制該保護(hù)作用，由此得出結(jié)論，LIP可以通過(guò)激活阿片受體和Akt信號(hào)通路來(lái)保護(hù)腦缺血造成的神經(jīng)損傷。許多研究[30]證實(shí)，線(xiàn)粒體ATP敏感性鉀通道(mito KATP)參與了κ-阿片受體介導(dǎo)的心肌保護(hù)作用。mito KATP在缺血預(yù)處理中的作用已得到肯定，在神經(jīng)元的缺血/再灌注損傷中具有非常重要的地位。研究[31]表明，mito KATP阻斷劑5-HD能消除LIP的神經(jīng)保護(hù)作用。Sun等[32]對(duì)大鼠雙側(cè)股動(dòng)脈閉塞/再灌注5個(gè)周期后發(fā)現(xiàn)，大鼠腦梗死面積明顯減少，海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞損傷減弱，而使用mito KATP拮抗劑后該保護(hù)作用明顯減弱。以上研究表明，LIP可以通過(guò)增強(qiáng)mito KATP活性保護(hù)海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞。

LIP能夠通過(guò)抑制自由基毒性、抑制炎癥反應(yīng)、介導(dǎo)信號(hào)傳導(dǎo)通路、誘導(dǎo)基因表達(dá)等機(jī)制發(fā)揮保護(hù)作用，亦能通過(guò)促進(jìn)熱休克蛋白Hsp70表達(dá)和干細(xì)胞的增殖，以及激活阿片受體和線(xiàn)粒體ATP敏感性鉀通道減輕海馬損傷。LIP通過(guò)腦缺血耐受而調(diào)動(dòng)內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制，延長(zhǎng)缺血性腦血管病的治療時(shí)間窗，進(jìn)而防治缺血性腦血管病，其具體病理生理機(jī)制尚在研究中，許多內(nèi)源性神經(jīng)保護(hù)因子或介質(zhì)參與缺血預(yù)處理的細(xì)胞保護(hù)作用，其中與早期保護(hù)有關(guān)的物質(zhì)包括乙酰膽堿、兒茶酚胺、AngⅡ、緩激肽、阿片肽等，與延遲保護(hù)有關(guān)的有腺苷、氧自由基和NO等，即刻早期基因在LIP也發(fā)揮重要的作用以及其他機(jī)制[33,34]等。LIP實(shí)施方便，方法簡(jiǎn)單，對(duì)人體的損傷微小，具有很高的臨床應(yīng)用價(jià)值。此外，LIP配合藥物治療效果會(huì)大大增加，Burda等[35]研究表明，注射紅藻氨酸后大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元存活數(shù)量由單純LIP的15.87%上升為42.8%。因此，藥物聯(lián)合治療缺血性腦血管疾病將成為未來(lái)發(fā)展的方向。

參考文獻(xiàn)：

[1] Kitagawa K, Matsumoto M, Tagaya M, et al. Ischemic tolerance phenomenon found in the brain[J]. Brain Res, 1990,528(1):21-24.

[2] Vainer BG, Markel AL. Systemic vascular response to brachial arteries crossclamping may prognosticate the outcome of remote ischemic preconditioning[J]. Med Hypotheses, 2015,84(4):298-300.

[3] Xu J, Sun S, Lu X, et al. Remote ischemic pre- and postconditioning improve postresuscitation myocardial and cerebral function in a rat model of cardiac arrest and resuscitation[J]. Crit Care Med, 2015,43(1):12-18.

[4] Yuan HJ, Zhu XH, Luo Q, et al. noninvasive delayed limb ischemic preconditioning in rats increases antioxidant activities in cerebral tissue during severe ischemia- reperfusion injury[J]. J Surg Res, 2012,174(1):176-183.

[5] Narasimhan P, Sugawara T, Liu J, et al. Overexpression of human copperzinc superoxide dismutase in transgenic animals attenuates the reduction of apurinicapyrimidinic endonuclease expression in neurons after in vitro ischemia and after transient global cerebral ischemia[J]. J Neurochem, 2005,93(2):351-358.

[6] Takhtfooladi HA, Takhtfooladi MA, Karimi P, et al. Influence of tramadol on ischemia-reperfusion injury of rats′ skeletal muscle[J]. Int J Surg, 2014,12(9):963-968.

[7] Chen G, Yang J, Lu G, et al. Limb remote ischemic post- conditioning reduces brain reperfusion injury by reversing eNOS uncoupling[J]. Indian J Exp Biol, 2014,52(6):597-605.

[8] Shiga Y, Onodera H, Kogure K, et al. Neutrophil as a mediator of ischemic edema formation in the brain[J]. Neurosci Lett, 1991,125(2):110-112.

[9] Justicia C, Panés J, Solé S, et al. Neutrophil infiltration increases matrix metalloproteinase-9 in the ischemic brain after occlusion/reperfusion of themiddle cerebral artery in rats[J]. J Cereb Blood Flow Metab, 2003,23(12):1430-1440.

[10] Chou WH, Choi DS, Zhang H, et al. Neutrophil protein kinase Cdelta as a mediator of stroke-reperfusion injury[J]. J Clin Invest, 2004,114(1):49-56.

[11] Yannopoulos FS, Arvola O, Haapanen H, et al. Leg ischaemia before circulatory arrest alters brain leucocyte count and respiratory chain redox state[J]. Interact Cardiovasc Thorac Surg, 2014,18(3):272-277.

[12] Wang W, Yu XD, Mo X, et al. Limb ischemic preconditioning attenuates cerebral ischemic injury in rat model[J]. Perfusion, 2014,29(3):210-218.

[13] Zhao H. Ischemic postconditioning as a novel avenue to protect against brain injury after stroke[J]. J Cereb Blood Flow Metab, 2009,29(5):873-885.

[14] Ansar S, Eftekhari S, Waldsee R, et al. MAPK signaling pathway regulates cerebrovascular receptor expression in human cerebral arteries[J]. BMC Neurosci, 2013,14:12.

[15] 姜紅升,涂悅,程世翔,等.肢體缺血后處理通過(guò)激活MAPK途徑保護(hù)大鼠海馬區(qū)缺血性神經(jīng)元[J].解剖科學(xué)進(jìn)展,2011,17(1):4-7.

[16] Maddahi A, Edvinsson L. Cerebral ischemia induces microvascular pro-inflammatory cytokine expression via the mek/erk pathway[J]. J Neuroinflammation, 2010,7:14.

[17] Bassili M, Birman E, Schor NF, et al. Differential roles of Trk and p75 neurotrophin receptors in tumorigenesis and chemoresistance exvivo and invivo[J]. Cancer Chemother Pharmacol, 2010,65(6):1047-1056.

[18] Peng B, Guo QL, He ZJ, et al. Remote ischemic postconditioning protects the brain from global cerebral ischemia/reperfusion injury by up-regulating endothelial nitric oxide synthase through the pi3k/akt pathway[J]. Brain Res, 2012,1445:92-102.

[19] Cheng Z, Li L, Mo X, et al. Non-invasive remote limb ischemic postconditioning protects rats against focal cerebral ischemia by upregulating STAT3 and reducing apoptosis[J]. Int J Mol Med, 2014,34(4):957-966.

[20] Jovanovic AA, Babovic SS, Damjanovic A, et al. The role of c-fos protein, somatostatin and neuropeptide Y in the pathogenesis of ischemic brain injuries based on animal model of cerebral ischemia[J]. Coll Antropol, 2013,37(3):847-852.

[21] 趙紅崗,李文斌,孫曉彩,等.c-fos在肢體缺血預(yù)處理抗腦缺血再灌注損傷中的作用[J].中華老年心腦血管病雜志,2006,8(11):772-775.

[22] Bui T, Sequeira J, Wen TC, et al. ZEB1 links p63 and p73 in a novel neuronal survival pathway rapidly induced in response to cortical ischemia[J]. PLoS One, 2009,4(2):1-18.

[23] Lee JC, Cho GS, Kim IH, et al. p63 Expression in the gerbil hippocampus following transient ischemia and effect of ischemic preconditioning on p63 expression in the ischemic hippocampus[J]. Neurochem Res, 2015,40(5):1013-1022.

[24] 廖常莉,周述芝,張英,等.p63與大鼠全腦缺血后神經(jīng)元凋亡的關(guān)系及肢體缺血后處理對(duì)p63表達(dá)的影響[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2012,28(12):1351-1355.

[25] Sun M, Yamashita T, Shang J, et al. Acceleration of TDP43 and FUS/TLS protein expressions in the preconditioned hippocampus following repeated transient ischemia[J]. J Neurosci Res, 2014,92(1):54-63.

[26] Sun XC, Xian XH, Li WB, et al. Activation of p38 mapk participates in brain ischemic tolerance induced by limb ischemic preconditioning by up-regulating hsp 70[J]. Exp Neurol, 2010,224(2):347-355.

[27] Choi KH, Park MS, Kim HS, et al. Alpha-lipoic acid treatment is neurorestorative and promotes functional recovery after stroke in rats[J]. Molecular Brain, 2015,8:9.

[28] 張永輝,汪永新,劉輝,等.肢體缺血預(yù)處理對(duì)腦梗死后大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞激活增殖的研究[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2009,32(5):592-597.

[29] Zhou Y, Fathali N, Lekic T, et al. Remote limb ischemic postconditioning protects against neonatal hypoxic-ischemic brain injury in rat pups by the opioid receptor/akt pathway[J]. Stroke, 2011,42(2):439-444.

[30] Cohen MV, Yang XM, Liu GS, et al. Acetylcholine, bradykinin, opioids, and phenylephrine, but not adenosine, trigger preconditioning by generating free radicals and opening mitochondrial K(ATP) channels[J]. Circ Res, 2001,89(3):273-278.

[31] 沈佳，孫麗娜，吳莉萍,等. mito KATP和κ-阿片受體介導(dǎo)肢體缺血后處理對(duì)抗大鼠腦缺血/復(fù)灌損傷[J].中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志,2009,25(3):368-372.

[32] Sun J, Tong L, Luan Q, et al. Protective effect of delayed remote limb ischemic postconditioning: role of mitochondrial k(atp) channels in a rat model of focal cerebral ischemic reperfusion injury[J]. Cereb Blood Flow Metab, 2012,32(5):851-859.

[33] Li S, Ma C, Shao G, et al. Safety and Feasibility of Remote Limb Ischemic Preconditioning in Patients With Unilateral Middle Cerebral ArteryStenosis and Healthy Volunteers[J]. Cell Transplant, 2015,24(9):1901-1911.

[34] Li SQ, Li WB, Zhang M, et al. The role of neuroglobin in the neuroprotection of limb ischemic preconditioning in rats[J]. Mol Neurobiol, 2013,47(1):197-208.

[35] Burda R, Danielisova V, Gottlieb M, et al. Delayed remote ischemic postconditioning protects against transient cerebral ischemia/ reperfusion as well as kainate-induced injury in rats[J]. Acta Histochem, 2014,116(6):1062-1067.

收稿日期：(2015-07-03)

通信作者：王福文

基金項(xiàng)目：國(guó)家科技重大專(zhuān)項(xiàng)子課題(2009ZX09301-013)。

中圖分類(lèi)號(hào)：R96;R971

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-266X(2015)47-0101-04

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.47.040