張萬林 (陜西省略陽縣樂素河鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300)
趙云平 (陜西省略陽縣白雀寺鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300)
淺談雞血清采集存在問題及對策
張萬林 (陜西省略陽縣樂素河鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300)
趙云平 (陜西省略陽縣白雀寺鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300)
通過近年來在禽類病原學監(jiān)測及免疫抗體檢測時采集雞血清出現(xiàn)的血清膠凍狀現(xiàn)象,分析存在的原因,通過工作實踐提出解決辦法,供畜牧獸醫(yī)人員參考。
雞血清;膠凍狀;采血方法;對策
隨著畜牧獸醫(yī)工作的不斷發(fā)展,動物疫病監(jiān)測和免疫抗體檢測在動物疫病防控工作中起到了重要作用。樂素河鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站在2010年~2016春季動物防疫結束時多次采集雞血清,不斷摸索,總結出了一種較經(jīng)濟、實用、科學的雞翅靜脈采血方法,為保證各鎮(zhèn)以后雞血清送檢質量和抗體檢測的準確性,現(xiàn)就雞血清采集存在問題、采集方法、保存方法及送檢過程介紹如下。
按照上級要求,鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)站防疫工作結束時,要在本鎮(zhèn)防疫區(qū)域分別采集豬、牛、羊、雞、犬血清各10頭(只)份報送縣市省畜牧獸醫(yī)行政管理部門進行免疫抗體檢測。別的動物血清都容易分離,雞血清每年都出現(xiàn)膠凍狀,特別在今年連續(xù)3次采血分離失敗給我們的工作帶來了很大困難,也為免疫抗體檢測工作造成障礙。
一般我們采血時間都是下午和晚上,雞剛進舍休息,農(nóng)村都是散養(yǎng)雞,早上給飼喂大量的糧食后就讓雞自行放養(yǎng),成天都在覓食。因此,下午進舍時正是飽食。但因我們的工作需要,白天去無法抓到雞,只能等到晚上。
農(nóng)戶零星散養(yǎng)雞,設備條件都差,基本上沒有飲水設施,雞的飲水靠自己尋覓,多數(shù)靠青綠草料中的水分供給,特別是春天,地草正在萌芽階段,氣候又干燥,雞一天食入大量精料,覓水遠遠滿足不了生理需要,造成體內嚴重缺水,血液濃稠會影響血清的分離,發(fā)生血彌。
采血時血液垂直推入試管是一種錯誤的方法,很容易造成溶血;采血消毒不嚴可能造成細菌感染也會影響血清分離,使用抗凝劑也有可能是出現(xiàn)血清膠凍狀的主要原因。
分離血清時在離心機上分離受溫度影響不太大,但自然分離時,溫度的高低很重要,關系到血清分離的成敗,溫度過低很可能使血液中的纖維蛋白和膠原蛋白凝固,造成血清膠凍狀。溫度過高時造成血液水分揮發(fā),血清可能因缺水而形成膠凍狀。
經(jīng)調查和親自實踐操作若干年發(fā)現(xiàn),長期飼喂精飼料,購買配合料及顆粒飼料飼養(yǎng)的雞肥胖,血液都比較濃稠,血清不好分離,甚至分離出來的血清多數(shù)是膠凍狀。散養(yǎng)在農(nóng)村的雞,長期自己覓食青草料和樹林里昆蟲,血清較好分離。另外和雞的品種也有關,本地雞水土氣溫適應性強,出現(xiàn)的可能性極小。
為了確實解決基層站采集禽類血清普遍存在的問題,使免疫抗體檢測和病原學監(jiān)測數(shù)據(jù)的準確性、實用性、科學性。
一次性真空采血管或清洗干凈并消毒過青霉素小瓶,一次性采血針頭或5ml一次性注射器,止血鉗,酒精,棉球,試管,試管架,離心機,記號筆,冰箱,采樣登記表。
采血雞不宜過小,以免血管小,血量少,要選擇3月齡以上,重量在1kg以上。必須是雞新城疫、禽流感免疫后21d以后的健康雞。
由飼養(yǎng)員或采血人員用一只手固定住雙腳,另一只手將雞的雙翅膀捏住固定,使雞翅內側展露出來,將雞面對術者臥在地上。
術者正對保定好雞,用左手拇指壓住雞翅內側的靜脈血管,使血管腫脹,充分暴露,然后用酒精棉球進行消毒,消毒液干后,用采血針頭從離血管約0.2cm的肌肉處平行進針,進針部位不要緊靠血管,以免止血困難,引起大失血,順血管插入0.5cm,刺入血管再進針0.5cm,輕輕拉動注射器活塞,有血液進入注射器,說明注射器進針正確,然后開始抽取血液。用真空管采集血液,只需將另一頭插入真空管內,血液便自動流出,每個真空管采集3ml血液,每只雞采血量不宜過多,一般不超過10ml,以免影響雞的生長發(fā)育。采血時間應在中午12點至下午5點,因此時氣溫較高,雞的血管充盈,暴露易找,采血針頭宜小不宜大,一般用7~9號針頭,以防針頭過大止血困難,接試管必須斜45°,讓血液緩緩沿試管壁流入試管,達到所需的血量后,用左手拿消毒棉球,壓住抽血部位的血管,右手迅速拔出針頭,待抽血部位血管完全止血后便可將雞放開。
剛采集的血液在自然環(huán)境溫度下傾斜放在試管架上,靜置30~60min,此時千萬不能震動血液,如果沒有試管架放置血液,傾斜40~60°放置,靜置1h左右,再移到室內12~20h,取出分離血清。
將已分離的血清用吸管或一次性注射器輕輕吸出,將血清注入干凈的小瓶子里,特別注意:千萬不要吸入血液,以免影響血清質量和檢測效果,每只離心管或小瓶子裝血清0.5~1ml。如靜置20h后,還沒分離出血清的就將裝有血液的試管放入離心機內,設置離心機以4000轉/min分離血清,離心機啟動要由慢到快,結束時要慢慢減速,每次離5~10min,直至達到所需血清的質量和數(shù)量,如真空管數(shù)量不能放滿離心機孔,需配一樣大小空管放滿孔,偶數(shù)對稱放置,以免聲響過大,激烈震動導致離心機損壞。
每采足一份血液或分離一份血清,要在真空管或離心管上編號,并做詳細登記,同一份血液,分離血清的離心管上的編號要與采集血液的真空管上的編號一致。編號的筆需用記號筆。
分離好的血清編號后,若來不及時送檢需及時放入冰箱內進行冷凍保存至送檢;血清送檢時,送檢血清應低溫運輸,血清運輸包裝內時應放置有冰袋,以免血清變質、腐臭,影響檢測效果。
以上雞血清采集方法淺見,希望工作在鄉(xiāng)鎮(zhèn)的廣大畜牧獸醫(yī)同事們共同參考研究,提出寶貴意見,以免在今后雞血清采集過程中再次出現(xiàn)血清膠凍狀現(xiàn)象,使我們的免疫抗體檢測、病原學監(jiān)測數(shù)據(jù)更加準確,才能更好的為動物防疫提供科學依據(jù),消滅或杜絕高致病性禽流感病的發(fā)生和流行。保障廣大人民群眾身體健康,促進農(nóng)村經(jīng)濟持續(xù)、快速、健康、穩(wěn)定發(fā)展。
張萬林 (1966-),男,漢族,助理畜牧師,長期從事畜牧獸醫(yī)技術推廣工作。