楊昌彪　張運(yùn)依+　李占彬等

摘要：建立SP-2560脂肪酸專用柱和ZB-WAXplus毛細(xì)管柱對(duì)菜籽油中主要脂肪酸成分分析的氣相色譜法。對(duì)來(lái)源及品牌商標(biāo)不同的60個(gè)菜籽油（其中低芥酸菜籽油41個(gè)，高芥酸菜籽油19個(gè)）樣品進(jìn)行主要脂肪酸含量的檢測(cè)分析，總合格率為58%，其中低芥酸和高芥酸菜籽油中合格率分別為66%和58%，并總結(jié)出在質(zhì)量不合格的菜籽油中大豆油是主要摻假種類之一，為食用油的健康管理提供一定的技術(shù)參考。

關(guān)鍵詞：脂肪酸；氣相色譜法；菜籽油；大豆油

中圖分類號(hào)： TS227文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2015）11-0392-04

收稿日期：2014-11-26

基金項(xiàng)目：貴州省科學(xué)技術(shù)基金（編號(hào)：黔科合J字[2012]2220號(hào)，黔科院J合字[2013]11號(hào)）。

作者簡(jiǎn)介：楊昌彪（1984—），男，貴州織金人，碩士，中級(jí)工程師，主要從事食品安全分析研究。E-mail：cb-yang@gzata.cn。

通信作者：李榮華（1978—

，男，貴州織金人，碩士，高級(jí)工程師，主要從事食品安全分析研究。 E-mail：lrh@gzata.cn。食用油與人們的生活息息相關(guān)，近年來(lái)食用油的質(zhì)量和安全問題日益受到關(guān)注，雖然相關(guān)部門一直在監(jiān)管，但長(zhǎng)期存在的地溝油風(fēng)波始終延續(xù)不斷。由于相關(guān)的法律體系不完善以及受利益驅(qū)使，不法經(jīng)營(yíng)者將生產(chǎn)、銷售地溝油以及摻假廉價(jià)油作為一種獲取高額利潤(rùn)的手段，不僅影響到食用油的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，同時(shí)還會(huì)嚴(yán)重影響到消費(fèi)者的健康安全。

目前劣質(zhì)食用油的衛(wèi)生指標(biāo)經(jīng)檢測(cè)基本都是合格的，因此須從成分組成、氣味光譜圖特征等方面對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，分析找出其與優(yōu)質(zhì)油的差別。吳惠勤等利用SPME/GC-MS技術(shù)對(duì)油脂中內(nèi)源及外源物質(zhì)的微量成分的存在進(jìn)行分析以確定樣品是否為地溝油，首次建立SPME/GC-MS鑒別地溝油的新方法[1-3]。周永生等建立了固相萃取-氣質(zhì)色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)地溝油中的膽固醇，檢出限達(dá)0.02 mg/L[4]。劉玲玲等用近紅外光譜技術(shù)找出地溝油與食用油光譜的波數(shù)差別，為后續(xù)的地溝油光譜分析提供了相應(yīng)的參考[5]。金靜等用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定油脂中十一烷酸與13-甲基十四烷酸的含量，以推定食用油中是否摻假，方法檢出限分別達(dá)到0.070、 0.006 mg/kg[6]。許秀麗等建立了分析油脂樣品中37種脂肪酸含量的氣相色譜—質(zhì)譜檢測(cè)方法，對(duì)衛(wèi)生部2次盲樣進(jìn)行判定，陽(yáng)性準(zhǔn)確率分別為100%、95%，陰性準(zhǔn)確率分別為100% 、90%[7]。黃韜睿等建立了采用氣相色譜對(duì)食用油中肉豆蔻酸含量的檢測(cè)以鑒別地溝油及食用油的方法[8]。

本研究通過采用不同毛細(xì)管柱對(duì)不同來(lái)源的菜籽油進(jìn)行脂肪酸含量檢測(cè)，分析不同方法對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，對(duì)不合格菜籽油從脂肪酸主要成分含量的變化分析其可能摻假的方式，為執(zhí)法部門對(duì)食用油監(jiān)管及保障消費(fèi)者健康安全提供參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1儀器設(shè)備

氣相色譜儀：Agilent 6890N，F(xiàn)ID檢測(cè)器；SP-2560毛細(xì)管柱100 m×0.25 mm×0.20 um，色譜科；ZB-WAXplus毛細(xì)管柱30 m×0.25 mm×0.25 um，菲羅門；旋渦混合器：XW-80A，江蘇省常州諾基儀器有限公司。

1.2試劑及材料

37種脂肪酸甲酯混標(biāo)；異辛烷（色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；硫酸氫鈉（優(yōu)級(jí)純，上海安譜科學(xué)儀器有限公司）；氫氧化鈉（分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；甲醇（色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；菜籽油，購(gòu)于超市、小作坊或送檢。

1.3儀器條件

1.3.1SP-2560毛細(xì)管柱檢測(cè)條件進(jìn)樣口溫度：230 ℃；檢測(cè)器溫度：250 ℃；柱流量：1.0 mL/min；分流比：80 ∶1；柱溫梯度：140 ℃（5 min），2.5 ℃/min升到240 ℃（25 min）。

1.3.2ZB-WAXplus毛細(xì)管柱檢測(cè)條件進(jìn)樣口溫度： 230 ℃ ；檢測(cè)器溫度：250 ℃；柱流量：3.0 mL/min；分流比： 50 ∶1 ；柱溫梯度：60 ℃（2 min），13 ℃/min 升到150 ℃， 2 ℃/min 升到240 ℃（3 min）。

1.4試驗(yàn)步驟

（1）37種脂肪酸甲酯直接上機(jī)檢測(cè)，作為不同種脂肪酸的定性標(biāo)準(zhǔn)。

（2）方法按照國(guó)標(biāo)GB/T 17376—2008《動(dòng)植物油脂肪酸的制備》中第5章“酯交換法”進(jìn)行處理。稱樣品60 mg，加4 mL 異辛烷溶解樣品并搖勻，渦旋振蕩1 min，加入200 μL氫氧化鈉甲醇溶液，猛烈振搖30 s后靜置至澄清，加入1 g硫酸氫鈉猛烈振搖中和強(qiáng)氧化鈉，待沉淀后取上清液過膜，待上機(jī)分析。

（3）按“1.3”節(jié)儀器條件進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)，用百分比法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析。

2結(jié)果與分析

2.1SP-2560毛細(xì)管柱檢測(cè)分析的37種脂肪酸圖譜

從圖1可以看出，樣品檢測(cè)所需時(shí)間較長(zhǎng)，接近60 min才能檢測(cè)完1個(gè)樣品，但分離效果好。在檢測(cè)過程中，發(fā)現(xiàn)同樣的條件下SP-2560柱子使用一段時(shí)間后保留時(shí)間會(huì)向后推移，最后指標(biāo)C22 ∶6ns出峰時(shí)間接近70 min，且C22 ∶1n9和C20 ∶3n3這2個(gè)指標(biāo)分不開并作1個(gè)峰，所以在檢測(cè)分析過程中如果這2個(gè)指標(biāo)分離不好且指標(biāo)C22 ∶1n9（芥酸）組分含量大于3%時(shí)，須同其他柱子比對(duì)或優(yōu)化方法分開這2個(gè)指標(biāo)，保證高芥酸和低芥酸菜籽油分界線劃分準(zhǔn)確以確保產(chǎn)品質(zhì)量判定的準(zhǔn)確。

2.2SP-2560毛細(xì)管柱檢測(cè)分析的主要脂肪酸色譜圖

從圖2可以看出，此脂肪酸專用柱能對(duì)目標(biāo)物有很好的分離效果，保證結(jié)果定性的準(zhǔn)確性，用于假陽(yáng)性樣品的復(fù)檢分離是必不可少的有力助手，但長(zhǎng)時(shí)間使用后分析樣品時(shí)間較長(zhǎng)，不易于批量樣品的檢測(cè)分析。

2.3ZB-WAXplus毛細(xì)管柱檢測(cè)分析的37種脂肪酸圖譜

從圖3可以看出，此方法檢測(cè)樣品的時(shí)間較SP-2560而言所需時(shí)間較短，在40 min內(nèi)就可以完成，分離效果較好，對(duì)大批量樣品的檢測(cè)能節(jié)約時(shí)間。但此條件只檢測(cè)出36個(gè)峰，主要是因?yàn)樵?9.655 min時(shí)C18 ∶1n9t和C18 ∶1n9c重合在一起。在對(duì)多種植物油中脂肪酸組分檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，C18 ∶1n9t含量很低或是未檢出，不影響C18 ∶1n9c的定性分析，所以在此時(shí)間的峰可作為C18 ∶1n9c目標(biāo)物的定性峰。但針對(duì)特殊樣品必須具體問題具體分析，用其他的柱子如SP-2560毛細(xì)管柱進(jìn)行二者分離以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.4ZB-WAXplus毛細(xì)管柱檢測(cè)分析的主要脂肪酸色譜圖

從圖4可以看出， 由于C18 ∶1n9c含量較高，同C18 ∶0

分離效果較差，但不影響二者的準(zhǔn)確定性，同時(shí)由于ZB-WAXplus柱子對(duì)芥酸C22 ∶1的分離效果較好，為確認(rèn)樣品是否為高芥酸或者低芥酸菜籽油提高了準(zhǔn)確性。

2.5菜籽油檢測(cè)過程中的質(zhì)量監(jiān)控

為了保證試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，在試驗(yàn)過程中用質(zhì)控樣進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控，檢測(cè)結(jié)果見表1。

從表1可以看出，2次試驗(yàn)結(jié)果值都在不確定度的偏差范圍之類，在檢測(cè)過程中帶上質(zhì)控樣一起處理，這樣保證了試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.6一般菜籽油脂肪酸主要成分含量

試驗(yàn)通過對(duì)來(lái)源及商標(biāo)品牌不同的60個(gè)菜籽油（低芥酸41個(gè)，高芥酸19個(gè)）樣品主要脂肪酸中棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸和芥酸指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，低芥酸和高芥酸菜籽油指標(biāo)成分含量分別見表2和表3。

對(duì)于一個(gè)菜籽油樣品中脂肪酸的主要組成判定取決于芥酸的含量，范圍在ND～3%間就按低芥酸來(lái)判定，芥酸含量在3%～60%間時(shí)按高芥酸進(jìn)行判定，所以芥酸含量的準(zhǔn)確測(cè)定對(duì)判斷該樣品質(zhì)量是否合格起主要決定作用。

按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 1536—2004《菜籽油》中對(duì)低芥酸菜籽油脂肪酸主要組成的判定：棕櫚酸2.5%～7%，硬脂酸0.8%～3%，油酸51%～70%，亞油酸15%～30%，亞麻酸 5%～14% ，芥酸0～3%。表2 中41個(gè)均為低芥酸菜籽油，其脂肪酸主要組成可按低芥酸菜籽油指標(biāo)含量進(jìn)行判定，其中合格的為1～27號(hào)，不合格的為28～41號(hào)，合格率為66%。用表2 數(shù)據(jù)對(duì)不合格的樣品指標(biāo)進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，28～32號(hào)樣品相對(duì)于質(zhì)量合格的樣品指標(biāo)而言，棕櫚酸、硬脂酸、亞油酸含量均有一定上升，油酸含量均呈下降趨勢(shì)。用正常大豆油指標(biāo)相比對(duì)分析，此5個(gè)樣品可能添加了一定量的大豆油。大豆油主要脂肪酸指標(biāo)含量范圍分別是：棕櫚酸8%～13.5%，硬脂酸 2.5%～5.4% ，亞油酸49.8%～59%。此含量均比菜籽油含量高，添加一定量就能提升菜籽油這3個(gè)指標(biāo)含量，同樣的大豆油油酸含量范圍為17.7%～28%，比菜籽油油酸 51%～70% 低，所以添加大豆油到菜籽油中其油酸含量必定下降。而33～41號(hào)組分含量雖不合格但變化無(wú)規(guī)律，可能是地溝油或調(diào)和油。

標(biāo)稍微偏高。同理，出于成本考慮，不法生產(chǎn)商可能向高芥酸菜籽油中添加部分大豆油，從而使不合格的8個(gè)高芥酸菜籽油的棕櫚酸和亞油酸指標(biāo)明顯提升，硬脂酸含量也有增大的趨勢(shì)。其他3個(gè)指標(biāo)油酸、亞麻酸、芥酸添加大豆油后結(jié)果無(wú)大變化，主要是高芥酸菜籽油中油酸的含量范圍較大，為8%～60%，大豆油此指標(biāo)含量包含在此范圍間，且這2種植物油亞麻酸的含量相近，再者大豆油的芥酸含量為0～03%，所以添加大豆油后這3個(gè)指標(biāo)無(wú)明顯的變化。

3結(jié)論

建立SP-2560和ZB-WAXplus毛細(xì)管柱對(duì)菜籽油中主要脂肪酸成分分析的方法，并分析2種柱子在檢測(cè)中存在的問題及互補(bǔ)應(yīng)用。同時(shí)對(duì)60個(gè)菜籽油進(jìn)行分析，了解現(xiàn)在食用油的一個(gè)產(chǎn)品質(zhì)量安全概況，并對(duì)不合格的菜籽油進(jìn)行分析，得出廉價(jià)便宜的大豆油主要是生產(chǎn)商摻假的主要種類。此方法為食用油產(chǎn)品質(zhì)量的安全監(jiān)管提供了一定的參考。

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