彭麗華，賴智填，成金樂*，王慧玲

(1.國家中醫(yī)藥管理局 中藥破壁飲片技術(shù)與應(yīng)用重點(diǎn)研究室，廣東 中山 528437；2.廣東省破壁粉粒工程技術(shù)研究開發(fā)中心，廣東 中山 528437；3.中山市中智藥業(yè)集團(tuán)有限公司，廣東 中山 528437)

基于HPLC指紋圖譜的中藥破壁飲片質(zhì)量評(píng)價(jià)

彭麗華1，2，3，賴智填1，2，3，成金樂1，2，3*，王慧玲1，2，3

(1.國家中醫(yī)藥管理局 中藥破壁飲片技術(shù)與應(yīng)用重點(diǎn)研究室，廣東 中山528437；2.廣東省破壁粉粒工程技術(shù)研究開發(fā)中心，廣東 中山528437；3.中山市中智藥業(yè)集團(tuán)有限公司，廣東 中山528437)

通過建立金釵石斛、紅參、黃芪等多味中藥破壁飲片-中間體-原料的HPLC指紋圖譜，對(duì)破壁飲片的制備過程進(jìn)行化學(xué)成分追蹤，分析破壁工藝對(duì)中藥物質(zhì)基礎(chǔ)的影響，為中藥破壁飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供重要參數(shù)。

中藥破壁飲片；指紋圖譜；質(zhì)量評(píng)價(jià)

中藥破壁飲片是通過現(xiàn)代超微粉碎技術(shù)將傳統(tǒng)中藥飲片粉碎成破細(xì)胞壁粉體(中間體)后，再通過專利制粒技術(shù)制備而成的可直接沖泡口服的中藥飲片。與傳統(tǒng)中藥飲片相比，中藥破壁飲片具有藥材利用率高、質(zhì)量均一和應(yīng)用便捷等特點(diǎn)[1]。作為一種新型中藥飲片，其質(zhì)量的有效控制是該類產(chǎn)品被市場認(rèn)可的亟待解決的關(guān)鍵問題。但由于破壁工藝技術(shù)的引入已破壞了傳統(tǒng)中藥飲片的外觀性狀及顯微特征，所以傳統(tǒng)飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法已不能有效地評(píng)價(jià)破壁飲片的質(zhì)量。而基于整體化學(xué)表征基礎(chǔ)上的中藥HPLC指紋圖譜技術(shù)被認(rèn)為是能解決該關(guān)鍵問題的有效手段之一。中藥HPLC指紋圖譜能基本反映中藥化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)的全貌，使中藥質(zhì)控指標(biāo)由原有的單一成分含量測定上升為對(duì)整個(gè)中藥內(nèi)在品質(zhì)的檢測，實(shí)現(xiàn)對(duì)中藥內(nèi)在質(zhì)量的綜合評(píng)價(jià)和整體物質(zhì)的全面控制。至目前為止，中智藥業(yè)集團(tuán)已對(duì)多個(gè)品種的中藥破壁飲片—破壁粉體(中間體)—傳統(tǒng)飲片開展了HPLC指紋圖譜研究及相關(guān)性研究，以期明確破壁技術(shù)對(duì)中藥飲片質(zhì)量(化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)層面)的影響，為中藥破壁飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供重要參數(shù)。本文對(duì)部分示范研究作一簡單綜述。

1 中藥破壁飲片—破壁粉體(中間體)—傳統(tǒng)飲片HPLC指紋圖譜研究

1.1金釵石斛破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片HPLC指紋圖譜研究 歐煥嬌[2]對(duì)14批不同產(chǎn)地金釵石斛破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片進(jìn)行HPLC指紋圖譜分析，采用中南大學(xué)與中智藥業(yè)集團(tuán)聯(lián)合開發(fā)的“中智藥業(yè)集團(tuán)中藥指紋圖譜數(shù)據(jù)庫”軟件(軟件著作權(quán)登記號(hào)：2012SR031430，版本號(hào)：V1.0)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和色譜相似度評(píng)價(jià)。14批金釵石斛破壁飲片的全譜相似度達(dá)0.90以上，14批金釵石斛破壁粉體的全譜相似度達(dá)0.98以上，14批金釵石斛傳統(tǒng)飲片的全譜相似度達(dá)0.90以上。同一批次內(nèi)的破壁飲片、破壁粉體及其傳統(tǒng)飲片的圖譜基本一致，破壁飲片共有模式、破壁粉體共有模式和傳統(tǒng)飲片共有模式之間的全譜相似度均大于0.99，均含有相同的10個(gè)共有特征峰(共有峰峰面積占總峰面積的90%以上)[2]。

1.2紅參破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片HPLC指紋圖譜研究 劉敏等[3]對(duì)10批不同產(chǎn)地紅參破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片進(jìn)行HPLC指紋圖譜分析，采用國家藥典委員會(huì)“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)A版”軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和色譜相似度評(píng)價(jià)。10批紅參破壁飲片的全譜相似度達(dá)0.96以上，10批紅參破壁粉體的全譜相似度達(dá)0.92以上，10批紅參傳統(tǒng)飲片的全譜相似度達(dá)0.98以上。同一批次內(nèi)的破壁飲片、破壁粉體及其傳統(tǒng)飲片的圖譜基本一致，均含有相同的11個(gè)共有特征峰(共有峰峰面積占總峰面積的90%以上)。

1.3黃芪破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片HPLC指紋圖譜研究 劉敏等[3]對(duì)10批不同產(chǎn)地黃芪破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片進(jìn)行HPLC指紋圖譜分析，采用國家藥典委員會(huì)“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)A版”軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和色譜相似度評(píng)價(jià)。10批黃芪破壁飲片的全譜相似度達(dá)0.94以上，10批黃芪破壁粉體的全譜相似度達(dá)0.91以上，除2批樣品偏差大外，其余8批黃芪傳統(tǒng)飲片的全譜相似度達(dá)0.97以上。同一批次內(nèi)的破壁飲片、破壁粉體及其傳統(tǒng)飲片的圖譜基本一致，破壁飲片共有模式、破壁粉體共有模式和傳統(tǒng)飲片共有模式之間的全譜相似度均大于0.88，均含有相同的8個(gè)共有特征峰(共有峰峰面積占總峰面積的90%以上)。

1.4三七破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片HPLC指紋圖譜研究 陳偉璇等[4]對(duì)11批不同產(chǎn)地三七破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片進(jìn)行HPLC指紋圖譜分析，采用國家藥典委員會(huì)“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)A版”軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和色譜相似度評(píng)價(jià)。11批三七破壁飲片的全譜相似度達(dá)0.92以上，11批三七破壁粉體的全譜相似度達(dá)0.95以上，11批三七傳統(tǒng)飲片的全譜相似度達(dá)0.97以上。同一批次內(nèi)的破壁飲片、破壁粉體及其傳統(tǒng)飲片的圖譜基本一致，破壁飲片共有模式、破壁粉體共有模式和傳統(tǒng)飲片共有模式之間的全譜相似度均大于0.99，均含有相同的8個(gè)共有特征峰(共有峰峰面積占總峰面積的90%以上)。

1.5丹參破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片HPLC指紋圖譜研究 何昱[5]對(duì)10批不同產(chǎn)地丹參破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片進(jìn)行HPLC指紋圖譜分析，采用“中智藥業(yè)集團(tuán)中藥指紋圖譜數(shù)據(jù)庫”軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和色譜相似度評(píng)價(jià)。10批丹參破壁飲片的全譜相似度達(dá)0.93以上，10批丹參破壁粉體的全譜相似度達(dá)0.84以上，10批丹參傳統(tǒng)飲片的全譜相似度達(dá)0.86以上。同一批次內(nèi)的破壁飲片、破壁粉體及傳統(tǒng)飲片的圖譜基本一致，30批樣品的全譜相似度均大于0.91。

1.6玄參破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片HPLC指紋圖譜研究 焦豪妍等[6]對(duì)10批不同產(chǎn)地玄參破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片進(jìn)行HPLC指紋圖譜分析，采用國家藥典委員會(huì)“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)A版”軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和色譜相似度評(píng)價(jià)。10批玄參破壁飲片的全譜相似度達(dá)0.93以上，10批玄參破壁粉體的全譜相似度達(dá)0.90以上，10批玄參傳統(tǒng)飲片的全譜相似度達(dá)0.94以上。同一批次內(nèi)的破壁飲片、破壁粉體及其傳統(tǒng)飲片的圖譜基本一致，各批樣品全譜相似度均大于0.90，均含有相同的14個(gè)共有特征峰(共有峰峰面積占總峰面積的90%以上)。

1.7黨參破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片HPLC指紋圖譜研究 朱蓉等[7]對(duì)10批不同產(chǎn)地黨參破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片進(jìn)行HPLC指紋圖譜分析，采用“中智藥業(yè)集團(tuán)中藥指紋圖譜數(shù)據(jù)庫”軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和色譜相似度評(píng)價(jià)。10批黨參破壁飲片的全譜相似度達(dá)0.90以上，10批黨參破壁粉體的全譜相似度達(dá)0.90以上，10批黨參傳統(tǒng)飲片的全譜相似度達(dá)0.85以上。同一批次內(nèi)的破壁飲片、破壁粉體及其傳統(tǒng)飲片的圖譜基本一致，破壁飲片共有模式、破壁粉體共有模式和傳統(tǒng)飲片共有模式之間的全譜相似度均大于0.98，均含有相同的15個(gè)共有特征峰(共有峰峰面積占總峰面積的90%以上)。

1.8決明子破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片HPLC指紋圖譜研究 唐玉蓮等[8]對(duì)12批不同產(chǎn)地決明子破壁飲片—破壁粉體—傳統(tǒng)飲片進(jìn)行HPLC指紋圖譜分析，采用“中智藥業(yè)集團(tuán)中藥指紋圖譜數(shù)據(jù)庫”軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和色譜相似度評(píng)價(jià)。除1個(gè)批次外的11批決明子破壁飲片的全譜相似度達(dá)0.95以上，12批決明子破壁粉體的全譜相似度達(dá)0.95以上，12批決明子傳統(tǒng)飲片的全譜相似度達(dá)0.90以上。同一批次內(nèi)的破壁飲片、破壁粉體及其傳統(tǒng)飲片的圖譜基本一致，破壁飲片共有模式、破壁粉體共有模式和傳統(tǒng)飲片共有模式之間的全譜相似度均大于0.98，均含有相同的27個(gè)共有特征峰(共有峰峰面積占總峰面積的90%以上)。

2 討論及展望

2.1中藥破壁飲片、破壁粉體及其傳統(tǒng)飲片物質(zhì)基礎(chǔ)種類一致 中藥破壁飲片可認(rèn)為是在傳統(tǒng)飲片基礎(chǔ)上以粉末形態(tài)應(yīng)用的新型中藥飲片，其物質(zhì)基礎(chǔ)應(yīng)與傳統(tǒng)飲片保持穩(wěn)定一致。筆者通過對(duì)金釵石斛、紅參和黃芪等品種的破壁飲片—破壁粉體(中間體)—傳統(tǒng)飲片指紋圖譜數(shù)據(jù)的闡述，發(fā)現(xiàn)3類樣品圖譜中主要峰群的整體圖貌基本一致，雖然各組分相對(duì)含量存在一定的差別，但同一批次中藥傳統(tǒng)飲片在制備成破壁飲片后的全譜譜圖相似度可達(dá)90%以上，表明上述產(chǎn)品的破壁工藝未引起該傳統(tǒng)飲片大量化學(xué)成分的損失和新化學(xué)成分的轉(zhuǎn)化或生成。同時(shí)表明HPLC指紋圖譜可以作為破壁飲片質(zhì)量評(píng)價(jià)的一個(gè)重要手段。

2.2中藥破壁飲片、破壁粉體及其傳統(tǒng)飲片中成分含量存在一定差異 從指紋圖譜的峰面積分析可了解到：雖然中藥破壁飲片制備前后，各破壁飲片—破壁粉體(中間體)—傳統(tǒng)飲片指紋圖譜的全譜相似度極高，化學(xué)成分種類無明顯變化，但各組分的相對(duì)含量存在一定的差異。為更科學(xué)、全面地評(píng)價(jià)中藥破壁飲片的質(zhì)量，后續(xù)還需在HPLC指紋圖譜研究的基礎(chǔ)上結(jié)合多項(xiàng)指標(biāo)成分(主成分)的含量測定進(jìn)行綜合分析，也為破壁飲片和傳統(tǒng)飲片之間的劑量換算提供參考。

2.3中藥破壁飲片有必要建立專屬于其自身的HPLC指紋圖譜 除中藥破壁飲片外，目前市場上還有配方顆粒、超微飲片等顆粒型中藥飲片或飲片提取物。據(jù)文獻(xiàn)分析，與中藥破壁飲片產(chǎn)品相似性較高的中藥超微飲片已開展了大量HPLC指紋圖譜研究。但由于兩者在破細(xì)胞壁(超微粉碎)和制粒工藝環(huán)節(jié)都存在技術(shù)的差異，可能對(duì)被加工藥材成分的影響也存在差異，所以中藥破壁飲片有必要建立專屬于其自身的HPLC指紋圖譜。通過不同產(chǎn)地中藥傳統(tǒng)飲片—破壁粉體—破壁飲片的HPLC指紋圖譜研究，可為破壁飲片質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的制定、品質(zhì)評(píng)價(jià)、合理選購原料藥材、指導(dǎo)GAP及制備工藝問題追蹤等提供依據(jù)和指導(dǎo)，從而實(shí)現(xiàn)破壁飲片產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定、可控。

[1] 成金樂，賴智填，彭麗華.中藥破壁飲片研究[J].世界科學(xué)技術(shù)—中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2014，16(2)：254-262.

[2] 歐煥嬌.金釵石斛破壁粉粒質(zhì)量控制方法與藥效學(xué)研究[D].廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2010.

[3] 劉敏.紅參、黃芪、三七三味中藥的飲片、破壁粉體、破壁粉粒的質(zhì)量評(píng)價(jià)研究[D].廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2011.

[4] 陳偉璇，劉敏，嚴(yán)萍，等.三七破壁飲片指紋圖譜研究[J].中藥材，2012，35(7)：1056-1061.

[5] 何昱.藥對(duì)干姜-高良姜揮發(fā)油化學(xué)成分及中藥丹參指紋圖譜研究[D].長沙：中南大學(xué)，2011.

[6] 焦豪妍，楊燕軍，徐吉銀，等.玄參飲片-破壁粉體-破壁飲片的HPLC指紋圖譜研究[J].中國藥房，2012，23(3)：243-245.

[7] 朱蓉，張?zhí)┿?，梁逸曾，?黨參炮制品的高效液相色譜指紋圖譜研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2011，22(4)：794-796.

[8] 唐玉蓮，梁逸曾，張華秀，等.決明子藥材、超微粉體和破壁粉粒指紋圖譜研究[J].中藥材，2011，34(12)：1861-1866.

QualityEvaluationofUltrafineGranularPowderofHerbalMedicinebyHPLCFingerprints

PENGLihua1，2，3，LAIZhitian1，2，3，CHENGJinle1，2，3*，WANGHuiling1，2，3

(1.KeyLaboratoryofUltrafineGranularPowderofHerbalMedicinetechnologyandApplicationofstateAdministration，Zhongshan528437，China；2.TheEngineeringTechnologyResearchandDevelopmentCenterofUltrafineGranularPowderofHerbalMedicineofGuangdongProvince，Zhongshan528437，China；3.ZEUSPharmaceuticalgroup，Zhongshan528437，China)

The study is aimed to establish HPLC fingerprint of Ultrafine Granular Powder—Ultrafine Powder—Decoction Pieces of Herbal Medicine to track the chemical composition during Ultrafine Granular Powder preparation，and the effect of the technology on chemical composition was analyzed.The results provide the important parameters for quality evaluation of Ultrafine Granular Powder.

Ultrafine Granular Powder；fingerprint；quality evaluation

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.9.032

2015-09-25)

*

成金樂，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：創(chuàng)新中藥；Tel：(0760)85312928,E-mail：gdcjl9@126.com