徐文嬌，?張?琦，?吳家強(qiáng)，?彭?軍*

（1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東??泰安?271000；2.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，山東??濟(jì)南?250100）

PRRSV、PCV2、PRV、CSFV疫苗間的相互干擾作用

徐文嬌1，?張?琦1，?吳家強(qiáng)2，?彭?軍1*

（1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東??泰安?271000；2.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，山東??濟(jì)南?250100）

近年來(lái)，我國(guó)豬病毒病疫情越來(lái)越復(fù)雜，其中豬繁殖和呼吸綜合征（PRRS）、豬圓環(huán)病毒病（PCVD）、豬偽狂犬病（PR）以及豬瘟（CSF）是公認(rèn)的影響全球養(yǎng)豬業(yè)的重大疾病。為了防控疫情，控制豬場(chǎng)傳染病迫在眉睫，其關(guān)鍵在于疫苗免疫接種。當(dāng)疫苗進(jìn)入動(dòng)物體后誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答，從而達(dá)到免疫預(yù)防作用。同時(shí)，一種疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生的免疫應(yīng)答反應(yīng)又可能對(duì)另一種疫苗免疫產(chǎn)生影響，能夠增強(qiáng)疫苗免疫效果或干擾疫苗免疫，因此研究疫苗間的相互作用是十分重要的。近年研究發(fā)現(xiàn)，CSFV與PRRSV疫苗同時(shí)免疫時(shí)的免疫效果不如單獨(dú)免疫；在PCV2陽(yáng)性豬場(chǎng)免疫PCV疫苗能夠顯著增強(qiáng)CSFV疫苗的免疫效果，降低疾病風(fēng)險(xiǎn)；同時(shí)對(duì)母豬免疫CSFV疫苗和PRV疫苗可以有較好的免疫反應(yīng)，2種疫苗在生產(chǎn)實(shí)踐中并無(wú)干擾作用；其他疫苗之間的相互作用還有待進(jìn)一步研究。

豬瘟；豬藍(lán)耳?。粋慰袢。回i圓環(huán)病毒??；疫苗；干擾作用

相關(guān)研究表明，豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）、豬偽狂犬病毒（PRV）、豬瘟病毒（CSFV）會(huì)引起豬的繁殖障礙性疾病或呼吸道疾病。這些疾病對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害極大，我國(guó)是養(yǎng)豬大國(guó)，疾病防控便顯得尤為重要，而研究疾病及其相關(guān)疫苗又是防控疾病必不可少的。免疫過(guò)程中免疫程序的安排是影響免疫效果的重要因素，因此我們需要了解疫苗間的相互作用，避免免疫失敗。

1　豬瘟及其疫苗

1.1豬瘟與豬瘟病毒

豬瘟（CSF）是由豬瘟病毒（CSFV）引起的豬的一種急性或慢性、熱性和高度接觸性傳染病，可引起各種年齡階段的豬發(fā)病。豬瘟病毒屬于黃病毒科瘟病毒屬，為單股正鏈RNA病毒。豬瘟主要發(fā)生于亞洲大部分國(guó)家和地區(qū)、中美及南美、非洲及歐洲部分國(guó)家。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將豬瘟列為A類(lèi)傳染病，中國(guó)農(nóng)業(yè)部將其列為一類(lèi)傳染病，是我國(guó)目前豬強(qiáng)制免疫的主要傳染病之一。CSF可以感染任何一個(gè)生長(zhǎng)階段的豬，但仔豬在斷奶后的一段時(shí)間比其他階段更容易感染CSFV。該病流行廣泛，一年四季均可發(fā)生，一般春秋季較為嚴(yán)重，死亡率高，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害極大。

1.2豬瘟疫苗

疫苗接種可有效防范該病，有些地區(qū)也采取疫苗接種再輔之以感染豬撲滅政策。1955年我國(guó)成功研制的豬瘟兔化弱毒疫苗是全世界使用最廣泛也是最優(yōu)秀的疫苗，對(duì)各種豬均具有優(yōu)良的免疫原性和免疫效果，安全性好，不少?lài)?guó)家已經(jīng)使用該疫苗消滅了豬瘟。疫苗接種不僅保護(hù)種豬不發(fā)生豬瘟，同樣也減少了CSFV向接觸豬的傳播。1956年起我國(guó)廣泛使用兔化弱毒疫苗，為我國(guó)控制豬瘟做出了巨大貢獻(xiàn)。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)主要使用細(xì)胞苗和兔組織苗這2種疫苗。

2　豬繁殖與呼吸綜合征及其疫苗

2.1豬繁殖與呼吸綜合征

豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是一種由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的一種高度接觸性傳染病。它主要以母豬嚴(yán)重的繁殖障礙，斷奶豬普遍發(fā)生肺炎、生長(zhǎng)遲緩以及死亡率增加為主要癥狀，因?yàn)椴糠植∝i的耳部因高熱會(huì)發(fā)紫，又稱(chēng)“藍(lán)耳病”。該病最早于1987年在美國(guó)中西部發(fā)現(xiàn)，開(kāi)始由于病原不能明確，歐洲一些國(guó)家稱(chēng)其為“豬神秘病”。1991年，荷蘭分離到該病的病原LV病毒株，由歐盟將其命名為豬繁殖與呼吸綜合征病毒。我國(guó)內(nèi)地于1996年由郭寶清［1］等首次在暴發(fā)流產(chǎn)的胎兒中分離到PRRSV，此后全國(guó)許多省、市和地區(qū)也有此病毒，并在這些地區(qū)分離到了PRRS美洲型毒株。該病的發(fā)病率高、死亡率也高，治愈率較低。

2.2PRRSV疫苗

PRRSV能水平傳播同時(shí)也能垂直傳播，致使該病在世界各地流行，因此許多國(guó)家開(kāi)展了對(duì)PRRSV的深入研究。PPRSV具有遺傳多樣性，按基因型分為歐洲型和美洲型，其中歐洲型又可分為多個(gè)亞型，不同基因型、亞型之間的差異非常大。目前國(guó)內(nèi)外主要使用的是滅活苗和弱毒疫苗，其中滅活苗中包含佐劑。一般認(rèn)為弱毒疫苗的效果更好，并得到了廣泛使用，它在減少疾病發(fā)生、疾病嚴(yán)重性、病毒血癥的持續(xù)時(shí)間和病毒逃逸中都表現(xiàn)出一定的效果，能保護(hù)豬不出現(xiàn)臨床癥狀，在同種形勢(shì)下保護(hù)效果會(huì)更加顯著［2］。但是其中也有許多問(wèn)題，包括存在散毒問(wèn)題和病毒返強(qiáng)性，并且返強(qiáng)的幾率非常高。1999年有人發(fā)現(xiàn)弱毒疫苗能夠成功幫助機(jī)體預(yù)防由于PRRSV入侵而產(chǎn)生的呼吸道各種病癥［3］。但讓人擔(dān)憂的是，弱毒疫苗在體內(nèi)不僅產(chǎn)生免疫效力，還對(duì)機(jī)體各個(gè)器官組織產(chǎn)生傷害［4］，所以弱毒疫苗殘余毒力造成的再流行使得其在國(guó)內(nèi)很難進(jìn)行推廣。

3　豬偽狂犬病及其疫苗

3.1豬偽狂犬病

偽狂犬?。≒R）是由偽狂犬病病毒（PRV）引起的一種高死亡率的急性傳染病。豬偽狂犬病毒可以侵害各種日齡階段的豬，主要以感染豬的體溫升高，公豬表現(xiàn)繁殖障礙，妊娠母豬引起流產(chǎn)、死胎，以及新生仔豬表現(xiàn)神經(jīng)癥狀為臨床診斷特征。偽狂犬病在1813年首次發(fā)生于美國(guó)的牛群中，1902年Aujeszky首次分離出該病毒，因而又名Aujeszkydisease。該病目前分布于全世界50多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，是最重要的豬傳染病之一。

3.2豬偽狂犬病疫苗

預(yù)防和控制甚至消滅偽狂犬病最主要的措施之一是進(jìn)行疫苗接種，國(guó)內(nèi)外已研制出豬偽狂犬病的常規(guī)弱毒疫苗、弱毒滅活苗、野毒滅活苗及基因缺失苗（缺失gE糖蛋白的基因工程苗目前已成為世界首選使用的疫苗），這些疫苗的應(yīng)用可以有效地治療豬感染后的臨床癥狀，也能夠減少疾病的發(fā)生。當(dāng)豬同時(shí)接種兩種不同的基因缺失疫苗后，病毒會(huì)發(fā)生基因重組現(xiàn)象。而弱毒苗具有較好的免疫原性，并且價(jià)格低廉，但必須經(jīng)過(guò)充分致弱，否則可能會(huì)病毒返強(qiáng)而導(dǎo)致疾病流行。弱毒疫苗還可建立潛伏感染，并有可能散毒。

4　豬圓環(huán)病毒病及其疫苗

4.1???PCV2與PCVD

豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）是引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）的主要病原，臨床上常與豬高致病性繁殖與呼吸綜合征、豬口蹄疫以及豬細(xì)小病毒病等混合感染。PCV2可引起豬呼吸道疾病綜合征（PRDC），豬皮炎與腎病綜合征（PDNS），仔豬傳染性先天性震顫（CT）等多種疾病，這些與PCV2相關(guān)的疾病統(tǒng)稱(chēng)為豬圓環(huán)病毒病（PCVD），主要侵害對(duì)象為仔豬和育肥豬。該病可以導(dǎo)致豬群產(chǎn)生嚴(yán)重的免疫抑制，從而繼發(fā)其他傳染病。我國(guó)于2001年首次發(fā)現(xiàn)，在我國(guó)豬群中廣泛流行，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的損失。豬圓環(huán)病毒已經(jīng)成為危害世界養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病。

4.2PCV疫苗

接種疫苗是防控PCVD的有效手段，目前研制成功的PCV2商品化疫苗有滅活疫苗，亞單位疫苗和嵌合疫苗，市場(chǎng)上廣泛銷(xiāo)售的共7種，大量實(shí)驗(yàn)證明這些疫苗使用后明顯降低了豬群的發(fā)病率和死亡率。在國(guó)內(nèi)有中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所劉長(zhǎng)明研究員研制出的中國(guó)首例PCV2滅活疫苗（LG株）和南京農(nóng)業(yè)大學(xué)姜平教授研制的PCV2滅活疫苗（SH株）。這兩種疫苗目前正在全國(guó)大部分地區(qū)推廣使用，對(duì)防控我國(guó)PCV2感染發(fā)揮了重要作用。

5　豬瘟疫苗與豬繁殖與呼吸綜合征疫苗間的相互干擾作用

我國(guó)半數(shù)以上的豬場(chǎng)存在PRRSV 和CSFV的共同感染，并且在豬瘟免疫效果較差的豬場(chǎng)，其PRRS流行情況也很?chē)?yán)重，難以控制。自從2007年P(guān)RRS納入國(guó)家重大動(dòng)物疫病管理后，生豬的強(qiáng)制免疫病種由原來(lái)的CSF等2種增加到3種，一頭豬需要進(jìn)行多種免疫，免疫的程序也各不相同，因此CSF疫苗與PRRS疫苗的相互干擾作用的研究對(duì)養(yǎng)豬業(yè)的免疫更具指導(dǎo)意義。王劍鋒等［5-6］在同時(shí)注射豬瘟和豬藍(lán)耳病疫苗對(duì)豬瘟抗體效價(jià)的影響試驗(yàn)中指出，同時(shí)免疫CSF疫苗和PRRS疫苗的試驗(yàn)豬，CSF的抗體水平上升推遲到免疫后35?d以上，也對(duì)PRRS抗體的產(chǎn)生起到干擾作用。該文表明共同免疫注射CSFV和PRRSV疫苗時(shí)，兩種疫苗相互影響，產(chǎn)生干擾作用，使免疫效果低于單獨(dú)免疫。這與竇鵬勛［7］等人的豬瘟、口蹄疫與豬藍(lán)耳病疫苗單獨(dú)和聯(lián)合免疫后豬體抗體水平變化的試驗(yàn)中的觀點(diǎn)是一致的，在此試驗(yàn)中，PRRS疫苗推遲了CSF抗體的上升時(shí)間，對(duì)CSF的免疫效果有輕微的影響，而同時(shí)免疫CSF活疫苗和PRRS滅活疫苗的抗體水平低于單獨(dú)注射PRRS滅活疫苗。得到相同結(jié)論的還有楊先富［8］等人，他們?cè)谝呙绮煌M合免疫接種的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，CSF的抗體平均效價(jià)在免疫后35?d才達(dá)到峰值，推遲一周后達(dá)到免疫合格，并由此推論，PRRS疫苗對(duì)CSF疫苗有輕度的抑制作用。但從CSFV與PRRSV疫苗單獨(dú)、兩兩組合免疫后的情況來(lái)看，同時(shí)免疫基本能達(dá)到與單苗同樣的免疫效果，因此他們認(rèn)為雖然PRRS疫苗對(duì)CSF疫苗有輕度的抑制作用，但總體上不影響CSF疫苗的免疫效果。以上結(jié)論也與華樹(shù)明［9］等人的研究結(jié)果相似。因此可以得出，PRRS疫苗與CSF疫苗有相互的干擾作用，使免疫效果低于單獨(dú)免疫，但在總體上來(lái)講影響不大。

6　豬瘟疫苗與豬圓環(huán)病毒疫苗的相互干擾作用

目前國(guó)內(nèi)豬的傳染病眾多，豬場(chǎng)經(jīng)常會(huì)發(fā)生多種病原混合感染。司興奎［10］等通過(guò)建立對(duì)單獨(dú)接種豬瘟疫苗組及接種豬瘟疫苗同時(shí)進(jìn)行PCV2感染組和PCV2病毒血癥出現(xiàn)后接種豬瘟疫苗組不同時(shí)相血清中的豬瘟特異性抗體水平進(jìn)行比較研究，證實(shí)了PCV2的感染會(huì)對(duì)豬瘟疫苗體液免疫應(yīng)答有一定程度的抑制作用。張敬峰［11］等通過(guò)對(duì)照試驗(yàn)表明PCV2陽(yáng)性豬場(chǎng)在不免疫豬圓環(huán)病毒疫苗的情況下，接種豬瘟疫苗時(shí)，無(wú)CSFV?抗體產(chǎn)生或只產(chǎn)生低水平抗體，增加豬瘟免疫失敗的風(fēng)險(xiǎn)，在PCV2陽(yáng)性豬場(chǎng)免疫豬圓環(huán)病毒疫苗能夠顯著增強(qiáng)豬瘟疫苗的免疫效果。潘艷［12］等經(jīng)PCR證實(shí)對(duì)PCV2為陽(yáng)性的試驗(yàn)豬接種豬瘟疫苗，經(jīng)多次豬瘟和PCV2的抗體檢測(cè)，表明PCV2陽(yáng)性豬免疫豬瘟疫苗后未能產(chǎn)生有效抗體，也說(shuō)明PCV2的感染會(huì)抑制豬瘟疫苗的免疫效果。這是由于PCV2感染會(huì)導(dǎo)致豬瘟疫苗誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答水平低下，同時(shí)引起外周血中淋巴細(xì)胞缺乏、細(xì)胞因子的嚴(yán)重匱乏或轉(zhuǎn)錄紊亂，造成豬瘟疫苗免疫失敗［13］。因此在PCV2陽(yáng)性豬場(chǎng)及時(shí)免疫豬圓環(huán)病毒疫苗是必要的，在其免疫基礎(chǔ)上再進(jìn)行豬瘟疫苗的接種，可明顯提高疫苗免疫效果。

7　豬瘟疫苗與偽狂犬病毒疫苗的相互干擾作用

林德銳［14］等用豬瘟活疫苗（傳代細(xì)胞源）和豬偽狂犬活疫苗（Bartha-?K61?株）給健康仔豬同時(shí)分點(diǎn)注射和混合注射，并不影響各自免疫抗體的產(chǎn)生，但試驗(yàn)仔豬為豬瘟和偽狂犬母源抗體為陰性的仔豬。劉明亞［15］等通過(guò)臨床檢測(cè)豬瘟抗體水平和偽狂犬抗體水平證明了當(dāng)機(jī)體水平較高時(shí)實(shí)施免疫接種，疫苗病毒會(huì)被體內(nèi)的抗體中和而起不到保護(hù)作用。說(shuō)明仔豬的母源抗體水平越高，其對(duì)疫苗的抑制作用就越強(qiáng)，因此要避開(kāi)在母源抗體高峰期接種疫苗。同時(shí)證明了應(yīng)用豬瘟疫苗和偽狂犬疫苗免疫能使母豬產(chǎn)生良好的免疫反應(yīng)，從而使仔豬獲得較高水平的母源抗體。曹松嶸［16］等通過(guò)調(diào)查部分未接種偽狂犬疫苗的偽狂犬陰性豬場(chǎng)仍在最后感染了偽狂犬野毒，可能是由于時(shí)間的推移使商品豬母源抗體消失而在豬群中形成了偽狂犬免疫空白群體。所以豬場(chǎng)要制定合理的免疫程序，對(duì)豬瘟和偽狂犬疫苗進(jìn)行適時(shí)的免疫，實(shí)現(xiàn)豬場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益最大化。封琳［17］等通過(guò)檢測(cè)從兔血清中提取的豬瘟病毒抗體與偽狂犬病毒間的反應(yīng)得到的交叉反應(yīng)結(jié)果表明豬瘟抗體不僅對(duì)豬瘟病毒呈陽(yáng)性，還可以與偽狂犬病毒結(jié)合，并且結(jié)合能力相當(dāng)于對(duì)豬瘟病毒結(jié)合能力的一半。由此可見(jiàn)同時(shí)進(jìn)行豬瘟、偽狂犬病毒免疫時(shí)，應(yīng)科學(xué)合理的安排疫苗用量和間隔時(shí)間，這對(duì)豬場(chǎng)防控豬瘟和豬偽狂犬病具有重要指導(dǎo)意義。

8　討論

呼顯生［18］等為評(píng)價(jià)豬瘟、偽狂犬病和豬繁殖與呼吸綜合征疫苗的免疫效果及相互干擾情況，對(duì)仔豬分組應(yīng)用CSF、PR和PRRS疫苗進(jìn)行免疫試驗(yàn)，監(jiān)測(cè)仔豬體內(nèi)抗體水平，得出結(jié)果為不同免疫程序下接種三種疫苗仔豬體內(nèi)抗體水平是不同的，免疫程序不當(dāng)可能會(huì)造成免疫失敗。段正贏［19］等于不同日齡對(duì)20日齡仔豬免疫CSF、PR和 PRRS疫苗，比較豬群免疫前后的抗體水平，得出與前者類(lèi)似結(jié)論。因此豬場(chǎng)應(yīng)制定合理免疫程序，選擇最優(yōu)化的免疫方案。

在生產(chǎn)實(shí)踐中，通常的免疫方法是不同的疫苗分別免疫注射，多次的抓豬會(huì)造成反復(fù)的應(yīng)激反應(yīng)，所以這種操作方法應(yīng)得到相應(yīng)的改進(jìn)。筆者認(rèn)為CSFV與PRRSV疫苗同時(shí)免疫時(shí)的免疫效果不如單獨(dú)免疫，但總體上對(duì)免疫效果無(wú)顯著影響，所以?xún)烧弑憧赏瑫r(shí)進(jìn)行免疫；而在PCV2陽(yáng)性豬場(chǎng)中，免疫PCV疫苗則能夠顯著增強(qiáng)CSFV疫苗的免疫效果，降低疾病風(fēng)險(xiǎn)，所以先免疫PCV疫苗后免疫CSFV疫苗可能會(huì)效果更好；同時(shí)，對(duì)母豬免疫CSFV疫苗和PRV疫苗可以有較好的免疫反應(yīng)，兩種疫苗在生產(chǎn)實(shí)踐中并無(wú)干擾作用。因此選擇兩種或多種合適的疫苗的同時(shí)分點(diǎn)免疫，不僅可以省工省力，還可減少不良應(yīng)激，且對(duì)免疫效果并無(wú)影響，甚至?xí)Ч?。根?jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，已有部分地區(qū)將此種免疫程序運(yùn)用到生產(chǎn)實(shí)踐，效果良好。與此同時(shí)，筆者建議在同時(shí)分點(diǎn)免疫后，再加強(qiáng)免疫1次。因?yàn)閯?dòng)物免疫后，機(jī)體產(chǎn)生免疫記憶，所以加強(qiáng)免疫后抗原刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)迅速產(chǎn)生更高水平的免疫保護(hù)，可以獲得更確切的免疫效果。在未來(lái)的養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展過(guò)程中，同時(shí)分點(diǎn)免疫便顯得尤為重要，因?yàn)檫@樣不僅可以減少應(yīng)激反應(yīng)降低成本，還對(duì)研發(fā)經(jīng)濟(jì)方便的二聯(lián)苗起到了促進(jìn)作用，更有利于養(yǎng)豬業(yè)的蓬勃發(fā)展。

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2016-05-06）

“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目課題（2015BAD12B03）

徐文嬌（1994-），女，山東濟(jì)南人，本科生，動(dòng)物醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)，1536933557@qq.com

張琦（1995-），男，山東棗莊人，本科生，動(dòng)物醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)，zhangqivet@163.com

彭軍，山東諸城人，博士，從事豬病病原學(xué)與免疫防控研究；E-mail：?jpeng@sdau.edu.cn