趙　衛(wèi)，蘇　劍

(沙溪隆都醫(yī)院檢驗科,廣東中山 528471)

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快速ELISA法檢測D-二聚體結合肌鈣蛋白I用于早期排除心肌梗死的評價

趙衛(wèi)，蘇劍

(沙溪隆都醫(yī)院檢驗科,廣東中山 528471)

摘要:目的評價快速酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測D-二聚體聯合心肌肌鈣蛋白I(cTnI)檢測用于早期排除心肌梗死的診斷價值。方法在入院時，對178例連續(xù)胸痛和疑似急性心肌梗死(AMI)患者的樣品進行心肌肌鈣蛋白I(cTnI)、D-二聚體的檢測；在入院6 h后重新檢測cTnI。結合超聲心動圖和血管造影術確診AMI患者。AMI患者的cTnI診斷臨界值取0.11 μg/L(占總CV10%的最低水平)。結果40例患者(22.4%)確診AMI。入院時，對于單獨的cTnI檢測，陰性預測值是87.9%；這值在入院6 h后增加到98.4%。入院時，對于單獨的D-二聚體(臨界值為200 ng/mL FEU)，陰性預測值是87.9%。在入院時，cTnI和D-二聚體都是陰性時，未觀察到任何假陰性。結論cTnI和D-二聚體的聯合檢測能用作到達急診室的胸痛患者中疑似AMI患者的早期排除診斷，因此，可縮短患者留院時間并節(jié)約費用。

關鍵詞:心肌肌鈣蛋白 I;D-二聚體;急性心肌梗死

急性心肌梗死(AMI)的早期診斷可增加治療成功機會和存活率。一些傳統(tǒng)方法，如超聲心動圖(ECG)不能用于診斷非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)患者，這就需要找到良好的臨床檢測指標[1]。以往研究證明，冠狀動脈血栓形成是急性缺血性綜合征的特點[1-2]。研究表明，血栓形成的一些生化標記物在AMI患者中可能水平增高[1-4]。D-二聚體反映了循環(huán)系統(tǒng)中纖維蛋白周轉的程度,會增加血液凝塊形成的趨勢。它有助于診斷和監(jiān)測與血凝過快相關的疾病和狀況[5]。凝塊還可能在載氧動脈中產生。如果凝塊阻礙血液流入重要器官(如腎臟、大腦或心臟)，可能導致不可逆梗死并導致器官衰竭[6-7]。對于不穩(wěn)定型心絞痛和靜脈血栓栓塞的排除，D-二聚體試驗是一項非?？煽康臒o創(chuàng)試驗[8-9]。在許多風險分層因素中，心肌肌鈣蛋白I(cTnI)是一個良好的生物標記和準確的試驗，可預測AMI[10-11]。cTnI是一種心臟組織特定的肌蛋白。AMI發(fā)生后，在胸痛發(fā)作后大約6 h，cTnI水平升高，而且在大約12 h時濃度達到峰值。cTnI的局限性是其遲發(fā)反應，患者入院時其水平通常是正常的，這就需要在6～9 h后重復檢測?？蓪е略黾踊颊吡粼簳r間，而且不足以早期排除非AMI患者。心肌壞死的生物化學標記包括cTnI、肌紅蛋白、肌酸激酶同工酶(CK-MB)等。AMI的患者符合以下至少一個標準：缺血性癥狀、病理學Q波、ST段壓迫性抬高、冠狀動脈血管成形術或AMI的病理學結果[12]。本研究旨在找到更敏感的標準，從而早期排除入院時非AMI的胸痛患者。

1資料與方法

1.1一般資料本研究共納入了于本院就診的178例連續(xù)胸痛和疑似AMI患者，其中40例確診為AMI(占22.4%)。納入研究者的平均年齡為(63.9±14)歲，男116例、女62例，4例有AMI家族史，是對連續(xù)胸痛患者進行的一項前瞻性觀察研究，于2014年11月至2015年4月招募患者。在24 h留院期間出現持續(xù)時間不少于10 min的缺血性癥狀并且出現缺血性心電圖(ECG)變化(ST段降低不少于0.5 mm或瞬態(tài)ST段抬高持續(xù)時間小于30 min)或心肌壞死的生化標記物(cTnI或CK-MB)水平升高，大于正常值上限的患者被納入AMI組，排除從其他醫(yī)院轉至本院的最近缺血性癥狀發(fā)作超過24 h的患者。

1.2方法以標準化數據采集形式收集患者報告，通過與患者面談、急診記錄回顧和實驗室結果的回顧從醫(yī)師處直接收集患者數據。在急診接收后，立即對患者的背景變量(年齡、性別、冠狀動脈風險因素、家族史)進行分析，并檢測患者D-二聚體、cTnI及其他生化標記物水平。在6 h時采集患者第2份血液樣品并重復檢測的cTnI。采用快速酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測D-二聚體，檢測試劑為Biomerieux公司的檢測試劑盒，并采用快速ELISA法檢測血清cTnI水平。CK-MB檢測正常值為小于10.4 ng/mL，cTnI的正常值為小于0.11 μg/L。按照試劑盒說明進行所有檢測。快速ELISA法檢測D-二聚體，檢測值以纖維蛋白原等量單位(FEU)進行報告，即ng/mL FEU。

2結果

2.1基線特征AMI患者中，同時患有糖尿病者所占比例較非AMI患者高(P<0.05)。本研究納入的患者中共有76例高血壓患者，AMI患者中同時有高血壓的比例高于非AMI患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；AMI患者中高血脂者所占比例高于非AMI患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。AMI患者的CK-MB水平比非AMI患者更高(P<0.05)，但由于CK-MB水平在AMI發(fā)病6～8 h時才開始升高，并在24～48 h達到峰值，并不能立即有效診斷AMI，這對早期診斷是不利的。見表1(見《國際檢驗醫(yī)學雜志》網站主頁“論文附件”)。

2.2ECG和二維心臟超聲檢查AMI患者中共有8例患者(占20%)出現ECG ST-T抬高。二維心臟超聲檢查是發(fā)現疑似AMI患者的另一種方法，24例患者(占60%)出現陽性結果，1例患者出現假陽性結果。很明顯，ECG和二維心臟超聲檢查對診斷所有類型的AMI患者來說是不夠敏感的，包括行導管插入術的29例患者。見表2。

表2　　AMI患者的ECG和導管插入

續(xù)表2　　AMI患者的ECG和導管插入

-：無數據。

2.3D-二聚體水平與其他變量之間的關系評價采用不同的D-二聚體臨界值排除AMI的潛在效能，見圖1(見《國際檢驗醫(yī)學雜志》網站主頁“論文附件”)。當臨界值為200 ng/mL FEU時，可提供最佳結果。cTnI檢測與采用200 ng/mL FEU作為臨界值的D-二聚體檢測相結合可以在入院時排除28例患者(15.7%)，而未出現任何假陰性結果。見表3。

表3　　入院時不同檢測指標用于非AMI患者排除的

3討論

ELISA D-二聚體檢測被認為是深靜脈血栓形成和肺栓塞患者的黃金標準[9,13]。這一前瞻性研究證明，D-二聚體與cTnI檢測的結合可提供臨床決策模型，從而有利于早期排除所有類型的AMI患者(靈敏度100.0%)。在體內平衡狀態(tài)下，凝血系統(tǒng)與纖維蛋白溶解過程之間存在平衡。Lee等[14]的研究表明，除用作早期診斷的標記外，D-二聚體還是AMI并發(fā)癥形成的風險因素。此外，Bayes-Genis等[15]發(fā)現，急性缺血性事件(AMI和不穩(wěn)定型心絞痛)患者的D-二聚體和纖維蛋白原水平明顯高于非缺血性患者。D-二聚體水平與心臟風險因素和疾病嚴重程度有關，D-二聚體的臨界值(200 ng/mL FEU)具有早期排除AMI的作用(靈敏度90.0%)。

快速ELISA法是提供用于評價疑似AMI患者的準確D-二聚體值的良好方法。一些冠狀動脈風險因素和患者病史為評價疑似AMI患者提供了信息[13]。從AMI患者的臨床數據可知，此類患者表現出伴有糖尿病、高血壓、高脂血癥的概率較高，以及CK-MB水平較高。本研究顯示，只有20%的AMI患者ECG出現陽性結果。該方法導致NSTEMI患者失訪[13]。以往研究證明，cTnI是需要及時有效治療的急診胸痛患者的良好檢測指標[9]，但其在胸痛發(fā)作后大約6 h才升高。cTnI的局限性是其遲發(fā)反應，而且其檢測結果在入院時通常是正常的(特異度94.9%)。這就需要在6～9 h后重復檢測。本研究中，cTnI和快速ELISA D-二聚體的結合可早期實現排除入院患者的AMI(靈敏度100.0%)，從而縮短患者的留院時間并節(jié)約住院費用。

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·論著·

Evaluation on rapid ELISA method in detecting D-dimer combined with

cardiac troponin I for early exclusion of myocardial infarction

ZhaoWei,SuJian

(DepartmentofClinicalLaboratory,ShaxiLongduHospital,Zhongshan,Guangdong528471,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the diagnostic value of rapid ELISA method in detecting D-dimer combined with cardiac troponin I (cTnI) for early exclusion of acute myocardial infarction (AMI).MethodsThe samples from 178 consecutive patients with chest pain and suspected AMI were tested for cTnI and D-dimer on admission;then cTnI was also tested at 6 h after admission.AMI was definitely diagnosed by echocardiography combined with angiography.The cTnI cut-off for diagnosing AMI was 0.11 μg/L (accounting for 10% of total CV lowest level).ResultsAMI was diagnosed in 40 cases(22.4%).The negative prediction value(NPV) on admission was 87.9% for single cTnI and increased to 98.4% at 6 h after admission.The cut-off for single D-dimer on admission was 200 ng/mL FEU and its NPV was 87.9%.No false negative was observed when both cTnI and D-dimer were negative on admission.ConclusionThe combination detection of cTnI and D-dimer has the potential to be used as an early exclusion diagnosis of suspected AMI in the patients with chest pain at arriving in the emergency department,thus shorten the patient′ s hospital duration and save costs.

Key words:cardiac troponin I;D-dimer;acute myocardial infarction

通訊作者

作者簡介：段業(yè)芬，女，主管檢驗師，主要從事臨床檢驗工作。 王興，男，檢驗醫(yī)師，主要從事臨床檢驗基礎研究?！?，E-mail：99866237@qq.com。

收稿日期：(2015-07-11)

文獻標識碼：

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2015.24.033A

文章編號：1673-4130(2015)24-3586-03