薛　露， 單鳴秋， 張　麗， 丁安偉

（南京中醫(yī)藥大學，江蘇省中藥資源產(chǎn)業(yè)化過程協(xié)同創(chuàng)新中心，中藥資源產(chǎn)業(yè)化與方劑創(chuàng)新藥物國家地方聯(lián)合工程研究中心，江蘇南京210023）

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側(cè)柏炭的研究進展

薛露， 單鳴秋， 張麗， 丁安偉*

（南京中醫(yī)藥大學，江蘇省中藥資源產(chǎn)業(yè)化過程協(xié)同創(chuàng)新中心，中藥資源產(chǎn)業(yè)化與方劑創(chuàng)新藥物國家地方聯(lián)合工程研究中心，江蘇南京210023）

摘要：側(cè)柏葉系柏科植物側(cè)柏p latycladus orientalis（L.）Franco的干燥枝梢及葉，經(jīng)炒炭炮制而成側(cè)柏炭，其寒涼之性趨于平和，更勝于收澀止血，效果明顯，被視為中醫(yī)臨床涼血止血之要藥。本文通過對側(cè)柏炭炮制工藝、化學成分、藥理作用、臨床應(yīng)用等方面的研究進展進行綜述，以期為其深入研究和應(yīng)用開發(fā)提供一定的依據(jù)。

關(guān)鍵詞：側(cè)柏炭；炮制工藝；化學成分；藥理作用；臨床應(yīng)用

側(cè)柏葉為柏科植物側(cè)柏p latycladus orientalis（L.）Franco的干燥枝梢和葉，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》［1］，其味苦、澀，性寒，歸肺、肝、脾經(jīng)，具有涼血止血、化痰止咳、生發(fā)烏發(fā)等功效，臨床上主要用于治療吐血、衄血、便血、咯血、崩漏下血、血熱脫發(fā)、肺熱咳嗽、須發(fā)早白。側(cè)柏葉炒炭后，其寒涼之性減弱，止血功效增強，主要用于血熱所致的各種出血證。為了更好地開發(fā)利用這一中藥資源，本文從側(cè)柏炭的炮制工藝、化學成分、藥理作用、臨床應(yīng)用等方面進行綜述，以期為闡釋炮制機理及臨床合理應(yīng)用提供參考。

1 炮制工藝

側(cè)柏葉的炮制方法始載于于南北朝的《雷公炮炙論》，主要有單制和輔制兩大類。其中，單制有炒（炙）、蒸、燒、煮、焙等，而輔制有泔制、豆制、礬制、鹽制、酒制等［2］。

唐代除了沿用側(cè)柏葉生品外，在凈制與切制方面也有較大發(fā)展；宋代《太平圣惠方》［3］記載了側(cè)柏葉“微炒”、“微炙”的方法；金元時期在沿用焙法與蒸法的基礎(chǔ)上，《儒門事親》［4］中新增了煮法，《丹溪心法》中增加了擂、酒制法［5］；明代《丹臺玉案》中記載了“炒黑”［6］；清代《本草綱目拾遺》［7］中新增炮制方法為“米泔水浸，日易水一次，曬干炒黑”，《外科大成》［8］記載了酒浸后九蒸九曬、醋制法及白礬水煎后曬干炒焦枯等方法，并在扁柏丸與柏葉散中運用炒焦枯和炒黃的方法。側(cè)柏炒炭法應(yīng)用廣泛，沿用至今，收載于歷版《中國藥典》及《全國中藥炮制規(guī)范》中，《中國藥典》2015版［9］側(cè)柏葉“炮制”項下僅收錄了側(cè)柏葉及側(cè)柏炭兩種炮制品，規(guī)定側(cè)柏葉凈制需“除去硬梗及雜質(zhì)”，而炭品需照炒炭法（附錄ⅡD）炒至表面黑褐色，內(nèi)部焦黃色。

在側(cè)柏炭的炮制工藝研究過程中，學者大多以制炭溫度、時間為考察因素。曹峰等［10］根據(jù)人工燒炭原理，將悶法與炒法結(jié)合制炭，省略了成炭以后需噴少許水熄滅火星，繼續(xù)翻炒至干的步驟，縮短了翻炒時間，成品率可提高3％左右。丁安偉等［11］認為，側(cè)柏炭的炮制溫度與時間對醇、水浸出物含有量的影響較大，側(cè)柏葉經(jīng)長時間高溫炮制后，所得側(cè)柏炭浸出物的含有量降低，而經(jīng)低溫炮制后略有升高，因此測定側(cè)柏炭浸出物的含有量可為制定相關(guān)飲片標準提供了一定依據(jù)。蔣紀洋［12］研究發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏葉以悶煅法制炭時，能降低揮發(fā)油損失，同時增加鈣含有量，增強止血功效。張華［13］以鞣質(zhì)為含有量指標，凝血時間作為藥理指標，確定側(cè)柏葉炒炭應(yīng)炒至表面焦褐色，內(nèi)部褐色，或者表面黑褐色，內(nèi)部焦褐色。高靜等［14］以槲皮苷為指標成分，經(jīng)正交試驗優(yōu)選出側(cè)柏炭炮制的最佳工藝為炒制溫度280℃，炒制時間5 min。單鳴秋［15-16］等基于UPLC指紋圖譜相似度結(jié)合外觀形狀考察側(cè)柏炭烘制工藝，提出最佳炮制工藝為230℃烘制20 min。由此可知，炮制方式不同，炮制的時間和溫度也會有所差異。

2 化學成分和質(zhì)量分析

2.1 揮發(fā)油 側(cè)柏葉中的揮發(fā)油成分主要有α-蒎烯、順-羅勒烯、β-蒎烯、1，8 -萜二烯、γ-萜品烯、萜品油烯、喇叭茶醇、芳樟醇、α-吡喃酮烯、4-萜品油、丙醇鹽里哪酯、乙酸冰片酯、乙酸里哪酯、香橙烯、β-攬香烯、異石竹烯、α-乙酸萜酯、α-葎草烯、大根香葉烯、新松香醇、α-杜松醇等。制炭后，則主要新增了N-二十二烷（2.46％）和γ-桉葉油醇（9.26％），并且1，8-萜二烯和香橙烯的含有量較生側(cè)柏葉顯著增加。然而，其他揮發(fā)油成分的含有量較生品均有不同程度的降低，其中異石竹烯和雪松醇尤為嚴重。

制炭后，側(cè)柏葉中48.99％的揮發(fā)油成分消失，主要有3，7-二甲基1，3，6-辛三烯（4.95％）、莰烯（5.24％）、β-葎草烯（7.67％）、δ-杜松烯（2.86％）等［17］。

2.2 黃酮類 側(cè)柏葉中的黃酮類成分主要包括蘆丁、槲皮素、槲皮苷、香橙素、芹菜素、楊梅素、山柰酚、扁柏雙黃酮、穗花杉雙黃酮等［18-20］。于生等［21］比較側(cè)柏葉和側(cè)柏炭總黃酮的含有量時發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏葉中為5.9％［22］，而炒炭后明顯降低［21］，其中槲皮苷降低較多，而槲皮素有所增加［23］。單鳴秋等［24-25］利用超高效液相色譜法同時測定側(cè)柏炭中槲皮苷、槲皮素、楊梅素、山柰酚及穗花杉雙黃酮的含有量，發(fā)現(xiàn)槲皮素、穗花杉雙黃酮較高，而槲皮苷較低。姚曉東等［26］發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏炭總黃酮含有量較側(cè)柏葉下降了26.57％，而槲皮素升高了37.27％。譚曉亮等［27］采用高效液相色譜法，比較炮制前后側(cè)柏葉中黃酮類成分的含有量，發(fā)現(xiàn)著成分轉(zhuǎn)化的過程，側(cè)柏葉經(jīng)炒炭后，槲皮苷、楊梅苷、扁柏雙黃酮和穗花杉雙黃酮含有量顯著降低，而楊梅素顯著升高，并且出現(xiàn)了槲皮素和山柰酚。

2.3 鞣質(zhì) 曾祥麗等［28］測得側(cè)柏葉和側(cè)柏炭中鞣質(zhì)含有量分別為0.27％和0.14％。姚曉東等［29］發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏葉炒炭后鞣質(zhì)含有量下降了48.15％。丁安偉等［30］報道，側(cè)柏炭中的鞣質(zhì)含有量與炮制溫度有關(guān)，180℃下炮制時其含有量明顯升高，而270℃時明顯降低。對符合最佳炮制工藝的側(cè)柏炭而言，鞣質(zhì)含有量較生側(cè)柏葉明顯下降，但可顯著縮短凝血時間，可見鞣質(zhì)可能并非其主要的止血活性成分。

2.4 微量元素 孫立靖等［31］分析發(fā)現(xiàn)，生側(cè)柏葉和側(cè)柏炭中均含7種人體所必需的微量元素，即Zn、Fe、Cu、Mn、Ni、Co，以及4種人體所必需的常量元素，即Ca、K、Na、Mg，其中Mg、Ca含有量豐富。與側(cè)柏葉比較，側(cè)柏炭中大部分元素含有量均有不同程度的增加，其中常量元素Ca、Mg更為明顯，而且與制炭程度成正比，推測無機元素的升高可能與炒炭后產(chǎn)生的化學變化以及元素富集有關(guān)。

3 藥理作用

3.1 止血作用 家兔體外血小板實驗發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏葉具有較強的血小板活化因子（PAF）抑制作用，其所含的雪松醇、pinusolide及pinusolide acid均呈現(xiàn)出PAF抑制活性，其中pinusolide的拮抗活性與銀杏苦內(nèi)酯B相當［32 -33］。趙欽祥等［34］采用小鼠剪尾法研究側(cè)柏葉及不同炮制品的止血作用，發(fā)現(xiàn)燜煅炭和炒炭的止血作用均強于生品，說明側(cè)柏炭口服給藥的止血作用強于側(cè)柏葉，而且側(cè)柏炭水煎劑的止血作用強于側(cè)柏葉。陳超等［35］認為，側(cè)柏炭止血功效更強的原因可能與其炒炭后吸附力增加有關(guān)。有報道稱，槲皮素和槲皮苷是側(cè)柏葉主要的止血活性成分，現(xiàn)代研究亦證實，槲皮苷具良好的止血和抗毛細血管脆性的作用［36］。柳佳等［37］對側(cè)柏炭涼血止血的功效進行了驗證，發(fā)現(xiàn)其可抑制大鼠甲狀腺功能，糾正血液流變學以及凝血功能異常，從而發(fā)揮這一功效。劉晨等［38 -39］考察了側(cè)柏炭炮制前后及各極性部位對干酵母致血熱復(fù)合出血模型的止血作用，發(fā)現(xiàn)均強于生側(cè)柏葉，其中乙酸乙酯部位主要通過降低全血和血漿低切黏度、促進血小板聚集功能及改善內(nèi)源性凝血功能來發(fā)揮其止血作用，是側(cè)柏炭止血的有效部位。周麗娜等［40］體外培養(yǎng)HUVECs，然后采用LPS誘導(dǎo)制備人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷模型，考察側(cè)柏炭不同提取部位對血管內(nèi)皮細胞的保護作用，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯部位可顯著拮抗LPS對HUVECs的損傷，有效保護血管內(nèi)皮細胞。

3.2 抗氧化作用 側(cè)柏葉精油對低密度脂蛋白氧化反應(yīng)、胰島素及亞油酸過氧化反應(yīng)、血紅蛋白糖基化反應(yīng)等均表現(xiàn)出抗氧化活性［41］。廖輝等［42］以氧自由基吸收能力（ORAC）法測定側(cè)柏葉炒炭前后的抗氧化活性，發(fā)現(xiàn)側(cè)柏炭抗氧化能力較生品大大減弱。側(cè)柏葉中所含的槲皮素和異槲皮素均具有抗氧化活性，其中前者可抑制人類重組醛糖還原酶以及晚期糖基化終產(chǎn)物AGEs的形成，為臨床用其治療糖尿病并發(fā)癥提供了一定的科學依據(jù)［43］；后者具有緩解NO誘導(dǎo)大鼠腦組織脂質(zhì)過氧化的作用［44］，其二萜衍生物15-MPA可抑制過氧化物酶體增生物激活受體的表達［45］。

4 臨床應(yīng)用及其他

側(cè)柏葉炒炭后，其寒涼之性減弱，止血功效增強。元代葛可久的“十灰散”將側(cè)柏葉、荷葉等均燒炭存性，用于治療嗽血、吐血、咯血、嘔血等，是最早將側(cè)柏葉制炭應(yīng)用于血證的記載。后世又出現(xiàn)許多名方，如《奇效良方》［46］中四季側(cè)柏散治療腸風藏毒、下血不止；《幼幼集成》［47］中記載側(cè)柏炭治大便瀉血；《吳鞠通醫(yī)案》［48］中記載側(cè)柏炭治咳血?，F(xiàn)代中醫(yī)臨床主要將其應(yīng)用于治療各種出血證，如血痢、咯血、崩漏、尿血等，被視為止血要藥。

4.1 血痢 潰瘍性結(jié)腸炎屬于中醫(yī)“久瀉”、“久痢”的范疇，臨床癥狀表現(xiàn)為腹痛、腹瀉及膿血便。宋代許叔微編撰的《普濟本事方》中記載了槐花散，其原方為將側(cè)柏葉（搗焙）、槐花（炒）、枳殼（麩炒）、荊芥穗（沙炭）等分?，F(xiàn)代臨床以生側(cè)柏葉和側(cè)柏炭同時入藥，用于治療潰瘍性結(jié)腸炎大出血，效果顯著［49］。

4.2 咳血 支氣管擴張癥屬于中醫(yī)“咯血”、“肺癰”的范疇，臨床癥狀主要表現(xiàn)為咽燥口干、慢性咳嗽，并伴有大量濃痰、反復(fù)咯血。李慧娟［50］選取側(cè)柏炭、茜草炭、大黃炭、白茅根等來止血，或涼血，或化瘀，或收斂，共奏止血之功。

經(jīng)行咳血，即正值經(jīng)期或經(jīng)期前后出現(xiàn)有規(guī)律的咳血，屬于“倒經(jīng)”、“逆經(jīng)”、“經(jīng)行吐衄”等范疇。金季玲等［51］以側(cè)柏炭、仙鶴草、白及、藕節(jié)炭收斂止血，以地榆、側(cè)柏葉涼血止血，療效良好。

4.3 崩漏 崩漏即崩中、漏下，指經(jīng)血非時暴下不止或淋漓不凈，屬于中醫(yī)疑難病，主要臨床表現(xiàn)是經(jīng)期經(jīng)量嚴重失常、月經(jīng)周期失調(diào)。崩漏既是多種婦科病的共有癥狀，也可單獨為病，其病因多端，病機復(fù)雜，臨床以氣血、臟腑為基礎(chǔ)，將其分成血熱、血瘀、腎虛、脾虛四型施治。黃可佳［52］認為，血得熱而流行，熱極則經(jīng)血妄行，治以清熱涼血，固沖止血，以側(cè)柏炭治療脾虛、血熱型崩漏，可起到收斂固攝、涼血止血的功效。

4.4 尿血 尿血是指血液隨小便排出，輕者尿中混有血液，重則伴有血塊、尿出純血，大多無痛感。其常見于IgA腎病、腎病綜合征、泌尿系感染以及全身性疾?。ㄏ到y(tǒng)性紅斑狼瘡、過敏性紫癜等）繼發(fā)的腎臟損害。沈慶法教授［53］治療紫癜性腎炎血尿患者時，以清熱涼血止血、化瘀通經(jīng)活絡(luò)為基本原則，用犀角地黃湯合小薊飲子加減，基本方為側(cè)柏炭、紫草、赤芍、生地、丹皮等，方中側(cè)柏炭起到清熱涼血止血的作用。

4.5 便血 十二指腸潰瘍便血屬于消化道出血證，其出血盛大者可危及生命。某一案例中，患者久病，精血已虧，相火妄動，灼傷陰絡(luò)而致便血，袁家現(xiàn)教授［54］以地芍阿膠補血養(yǎng)陰，側(cè)柏炭、地榆炭等涼血止血，黃連、山桅炭清熱除煩，療效顯著。止血之后，常服腎養(yǎng)陰丸以緩圖治本。

5 總結(jié)與展望

綜上所述，目前對側(cè)柏炭的研究主要集中于炮制工藝和質(zhì)量研究，以及制炭前后化學成分、藥理作用以及臨床應(yīng)用的異同。側(cè)柏炭作為中醫(yī)臨床涼血止血要藥，近年來雖有一些相關(guān)報道，但尚不夠全面系統(tǒng)，尤其是對該藥涼血止血功效及作用機制的研究較少，并且不夠深入。

側(cè)柏葉炒炭后，其寒涼之性減弱，止血功效增強。其中，48.99％的揮發(fā)油成分消失，鞣質(zhì)含有量有所降低，常量元素Ca、Mg含有量顯著增加，黃酮類成分總含有量有所減少，但其中楊梅素、槲皮素及山柰酚等增加。研究發(fā)現(xiàn)，黃酮類成分對凝血系統(tǒng)以及血管內(nèi)皮系統(tǒng)的多個環(huán)節(jié)都表現(xiàn)出不同程度的藥理活性。槲皮素、山柰酚可抵抗高糖誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細胞的損傷；穗花杉雙黃酮可促進血管內(nèi)皮細胞的增值，促進血管新生，推測側(cè)柏葉炒炭后止血功效的增強可能與這些黃酮類成分含有量的增加有關(guān)。

為了進一步揭示側(cè)柏炭涼血止血的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制，從而更好地指導(dǎo)臨床用藥，本研究對相關(guān)活性提取部位進行篩選，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯部位具有顯著的止血活性。在此基礎(chǔ)上，應(yīng)用現(xiàn)代色譜分離技術(shù)剔除該部位中的槲皮素、山柰酚及楊梅素等黃酮類成分，利用干酵母致血熱復(fù)合出血大鼠模型來評價該部位剔除上述成分前后的涼血止血作用。同時，通過代謝組學等方面的研究，有望揭示側(cè)柏炭涼血止血的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制，為其臨床安全有效應(yīng)用提供科學依據(jù)，也為深入研究其他涼血止血炭藥物的作用機制提供嶄新的思路和方法。

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［科研報道］

*通信作者：丁安偉（1950—），男，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向中藥炮制機制和質(zhì)量標準。Tel：（025）85811523，E-mail：awding105@163.com

作者簡介：薛 露（1991—），女，碩士生，研究方向為中藥炮制機制和質(zhì)量標準。Tel：15951939796，E-mail：937008377@qq.com

基金項目：國家自然科學基金資助項目（81173547）；江蘇省普通高校研究生創(chuàng)新計劃（CXZZ12 -0621）

收稿日期：2016-01-04

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.05.034

中圖分類號：R284.1；R285.5

文獻標志碼：A

文章編號：1001-1528（2016）05-1127-05