利用組織培養(yǎng)快繁非洲菊新品系*

邵小斌，趙統(tǒng)利，朱朋波，湯雪燕，孫明偉

（江蘇省連云港市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，連云港　　222006）

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利用組織培養(yǎng)快繁非洲菊新品系*

邵小斌，趙統(tǒng)利，朱朋波，湯雪燕，孫明偉

（江蘇省連云港市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，連云港222006）

以母本‘小雪桔’與父本‘水粉’雜交形成的F1代新品系‘GB3-1’的不同大小的花蕾為試驗材料，研究不同花蕾大小、不同培養(yǎng)基配方對幼芽誘導(dǎo)、幼芽增殖的影響，不同蔗糖濃度在生根階段對幼苗生長的影響以及在煉苗階段對幼苗生長的發(fā)育影響。結(jié)果表明：直徑為0.5～1.0 cm的花蕾效果較好；平均誘導(dǎo)率、所需天數(shù)、誘導(dǎo)出的幼芽數(shù)分別為：67.5%、81.69天和12.09個芽。最適宜的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+10 mg/L 6-BA+1 mg/L IAA，誘導(dǎo)率達81.04%，所需時間僅為59.14天，平均誘導(dǎo)的嫩芽數(shù)為23.42個。適宜的增殖培養(yǎng)基為1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA，幼芽增殖數(shù)為9.67個，平均苗高3.4 cm，苗健壯，無玻璃化現(xiàn)象。

非洲菊 新品系 花蕾 組織培養(yǎng)

非洲菊（Gerbera jamesonii）原產(chǎn)南非，屬多年生草本植物，又名扶郎花、燈盞花，用途廣泛，為世界5大切花品種之一。舌狀花條形，有單瓣、半重瓣和重瓣，顏色豐富，有紅、橙紅、黃、粉、淡紅、白色和復(fù)色，通常四季有花，以春、秋兩季最盛。傳統(tǒng)的繁殖方式為種子繁殖和分株繁殖，種子易喪失發(fā)芽力，并且后代多變，不能保持良種特性，而常規(guī)的分株繁殖速度又太慢，不能夠滿足生產(chǎn)需要。一般采用組織培養(yǎng)的方法來生產(chǎn)非洲菊種苗。

1 材料與方法

1.1 材料

上午9∶00剪取新品系‘GB3-1’的花蕾，用普通塑料袋進行保濕，立即送往組織培養(yǎng)室。選取直徑0.5～1 cm （E1）和直徑1～2 cm（E2）的花蕾作為外植體。

1.2 方法

1.2.1 不同激素和不同外植體對芽誘導(dǎo)的影響

洗去附著在表面的污物，用洗滌劑清洗兩遍，再用自來水沖淋2 h，然后置超凈工作臺上，用75%乙醇浸泡1 min，再用0.1%升汞浸泡8 min，然后用無菌水反復(fù)沖洗5次。用無菌濾紙吸干花蕾上水分，剝除外層苞片，再切分成6塊。以MS為基本培養(yǎng)基，添加激素組合分別為6-BA濃度為3.0、5.0、8.0、10 mg/L，IAA濃度為1.0和2.0 mg/L，蔗糖3%，瓊脂粉7.0 g/L，各處理添加相應(yīng)濃度的激素，不添加任何激素為對照，用NaOH將培養(yǎng)基pH值調(diào)到5.8，以121℃高壓滅菌20 min。每瓶接種3塊，每個處理5瓶。培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度（25±2）℃，光照強度1 500～2 000 lx（12 h/d）。觀察記錄各處理從接種到幼芽出現(xiàn)所需要的天數(shù)、誘導(dǎo)率及幼芽數(shù)。

1.2.2 不同激素對不同幼芽增殖的影響

對誘導(dǎo)獲得的幼芽進行增殖培養(yǎng)，以MS為基本培養(yǎng)基，添加激素組合分別為6-BA（0.6、0.8、1.0 mg/ L），IAA（0.1和0.2 mg/L），培養(yǎng)條件同上。每瓶接種3芽塊，每處理5瓶。30 d后統(tǒng)計每個外植體的幼芽數(shù)和芽高。

1.2.3 蔗糖濃度在誘導(dǎo)生根階段對生根、葉片數(shù)的影響

以上述增殖的大上相近的無根苗作為外植體，接種到添加0.5 mg/L NAA 的1/2MS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基中蔗糖濃度分別為0，2%，4%。培養(yǎng)條件同上。每瓶接種3棵，每處理5瓶。30 d后統(tǒng)計苗高、葉片數(shù)、生根率和生根數(shù)。

2 結(jié)果與分析

不同外植體和激素對芽的誘導(dǎo)：MS+10 mg/L6-BA+1 mg/LIAA為非洲菊幼芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基。激素對幼芽生長發(fā)育有重要的作用，在不添加任何激素的情況下，兩種大小花蕾都不能夠誘導(dǎo)出幼芽。E1和E2對誘導(dǎo)培養(yǎng)基的反應(yīng)不一樣，E1幼芽誘導(dǎo)率達到了67.5%，而E2的誘導(dǎo)率僅為11.69。E1處理，最初沒有明顯變化，培養(yǎng)14 d后，明顯膨大，并形成綠色的疏松的愈傷組織，60 d后，開始有幼芽長出，這與鄭秀芳等人研究一致。而E2處理，在接種初期，花朵正常發(fā)育，出現(xiàn)舌狀花和管狀花，大部分隨后變?yōu)楹稚?，慢慢干枯死亡?種大小的外植體幼芽出現(xiàn)的時間也不一樣，E1處理從接種到幼芽出現(xiàn)平均需要81.69 d，而E2則需要133.05 d。

非洲菊花蕾的不定芽主要出現(xiàn)50～80 d的時間內(nèi)，王春彥等人也發(fā)現(xiàn)，非洲菊花托再生不定芽主要集中在接種后50～90 d的時間段內(nèi)。90 d以后再生的不定芽，其芽體弱小，生長速度慢。在IAA濃度不變的情況下，隨著6-BA的濃度增加，所需要的天數(shù)逐漸減少，誘導(dǎo)出幼芽數(shù)變多，誘導(dǎo)率在增加，這與魯雪華等人的研究一致。6-BA濃度相同情況下，隨著IAA的增加，幼芽數(shù)出現(xiàn)的天數(shù)變多，幼芽的數(shù)量減少。李娜等人也發(fā)現(xiàn)在設(shè)定的濃度范圍內(nèi)，低濃度（0.1 mg/L）的生長素有利于芽的分化；隨著生長素濃度的增高，愈傷組織生長量也有所增加，但芽的分化受到抑制。

［1］ 孫可群，張應(yīng)麟，龍雅宜，等.花卉及觀賞樹木栽培手冊.北京：中國林業(yè)出版社，1998，559～560

［2］ 李娜，王平，吳志剛，等. 非洲菊組織培養(yǎng)研究進展. 北方園藝，2012，（21）：178～181

江蘇省連云港市農(nóng)業(yè)攻關(guān)類項目“切花非洲菊新品種選育，項目編號CN1302”