陳 朵陸 珞張 菁位 鴻
1長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué) 吉林省長(zhǎng)春市 130117 2吉林省食品藥品審評(píng)中心 吉林省長(zhǎng)春市 130062
3長(zhǎng)春中藥藥大學(xué)附屬醫(yī)院 吉林省長(zhǎng)春市 130117
抑顫顆粒制備工藝優(yōu)選
陳 朵1陸 珞2張 菁3位 鴻3
1長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué) 吉林省長(zhǎng)春市 130117 2吉林省食品藥品審評(píng)中心 吉林省長(zhǎng)春市 130062
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目的:優(yōu)選抑顫顆粒的制備工藝。方法:以干膏量和芍藥苷含量為評(píng)價(jià)指標(biāo),采用L9(34)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)法對(duì)抑顫顆粒制備過(guò)程中的水提取工藝條件進(jìn)行優(yōu)化;并進(jìn)行制粒工藝研究。結(jié)果:最佳水提取工藝為分別加7.5,6,6倍量的水,煎煮提取3次,每次2小時(shí);制顆粒的成型性好,流動(dòng)性符合要求。結(jié)論:優(yōu)選得到的工藝穩(wěn)定可行,可用于抑顫顆粒的生產(chǎn)。
抑顫顆粒;制備工藝;正交實(shí)驗(yàn)
帕金森病是一種常見(jiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行疾病,以運(yùn)動(dòng)減少,肌肉強(qiáng)直及震顫為主要癥狀,嚴(yán)重威脅患者生命,中醫(yī)藥在在治療該病方面有著獨(dú)特的療效[1]。抑顫顆粒的處方來(lái)源于經(jīng)驗(yàn)方,由熟地黃,天麻,白芍等七味藥材組成,用于治療肝腎虧虛、肝風(fēng)內(nèi)動(dòng)所致的震顫型原發(fā)性帕金森病.本研究采用正交實(shí)驗(yàn)對(duì)抑顫顆粒的制備工藝進(jìn)行了優(yōu)選,將其制成無(wú)糖型顆粒劑。
AUW220D型電子天平(島津國(guó)際貿(mào)易有限公司);KH-250DB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山禾劍超聲儀器有限公司);島津2010A型高效液相色譜儀(島津國(guó)際貿(mào)易有限公司)。芍藥苷對(duì)照品(批號(hào):110736-201438,購(gòu)于中國(guó)食品藥品制品檢定研究院)。乙腈為色譜純,其他試劑均為分析純,水為超純水。
2.1 提取工藝的優(yōu)化
2.1.1 吸水率的考察
按處方比例稱取藥材140g,加水400ml浸泡至透心(2h),濾過(guò),稱重,求得混合藥材吸水率為139%。故第1次提取時(shí)需多加1.5倍量的水以補(bǔ)足吸水量。
2.1.2 正交設(shè)計(jì)優(yōu)化工藝
以加水倍數(shù)、提取次數(shù)、提取時(shí)間為考察因素,使用正交表 L9(34)安排試驗(yàn),每個(gè)因素選擇3個(gè)水平,因素水平見(jiàn)表1。
表1:L9(34)正交試驗(yàn)因素水平表
2.1.3 干膏量的測(cè)定
依處方比例稱取藥材140g,共9份,按照正交試驗(yàn)因素水平表的條件加水煎煮,濾過(guò),合并提取液,減壓濃縮,減壓干燥,稱重,計(jì)算干膏量,結(jié)果見(jiàn)表2。
2.1.4 芍藥苷的含量測(cè)定
(1)色譜條件與適應(yīng)性試驗(yàn)。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-0.1%磷酸溶液(14:86)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm;流速:1ml/min;柱溫:25℃;進(jìn)樣量:10μl;理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
(2)對(duì)照品溶液的制備。精密稱取芍藥苷對(duì)照品6.02mg,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻;精密量取1ml,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得(每1ml中含60.2μg的芍藥苷)。
(3)供試品溶液的制備。取供試品干膏粉(過(guò)四號(hào)篩)約1.75g,精密稱定,置50ml量瓶中,加稀乙醇35ml,超聲處理(功率240W,頻率45kHz)30分鐘,放冷,加稀乙醇至刻度,搖勻,用0.45μm微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
(4)測(cè)定法。分別精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl,注入高效液相色譜儀,測(cè)定,計(jì)算芍藥苷含量,結(jié)果見(jiàn)表2。
2.1.5 提取工藝的優(yōu)選
水提取工藝實(shí)驗(yàn)結(jié)果干膏量權(quán)重系數(shù)為0.4,芍藥苷含量權(quán)重系數(shù)為0.6進(jìn)行綜合評(píng)分。結(jié)果見(jiàn)表2。
試驗(yàn)結(jié)果:B因素(提取次數(shù))有顯著性,A因素(加水量、)C因素(提取時(shí)間)無(wú)顯著性。直觀分析確定最佳工藝組合為A2B3C3。
2.1.6 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
因C因素與A因素均無(wú)顯著性,并且A1和A3相比較、C1和C3相比較,兩者之間均沒(méi)有顯著差異,結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際,從節(jié)約能源的角度出發(fā),對(duì)A1B3C1、A2B3C3進(jìn)行工藝驗(yàn)證。結(jié)果芍藥苷含量A2B3C3為332.36mg大于A1B3C1285.33mg,故選擇A2B3C3為最佳提取工藝條件。
2.2 制劑成型性研究
2.2.1 輔料的選擇
表2:正交試驗(yàn) [L9(34)] 及結(jié)果
制顆粒常用輔料有:蔗糖、糊精、可溶性淀粉、微粉硅膠等多種[2],經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn),最終選擇微粉硅膠和可溶性淀粉(1:4)作為輔料,制成無(wú)糖型顆粒。
2.2.2 顆粒的流動(dòng)性考察
取顆粒成品適量,用固定漏斗法測(cè)定休止角[3],三次測(cè)得顆粒平均休止角為32.3度,表明顆粒流動(dòng)性良好。
2.3 中試
三批中試試驗(yàn)按處方量的10倍量投料,顆粒成品率分別為94.50%、96.10%、97.30%,各項(xiàng)數(shù)據(jù)接近,穩(wěn)定性好,可操作性強(qiáng),可以作為大生產(chǎn)條件依據(jù)。
本制劑的處方來(lái)源于臨床的經(jīng)驗(yàn)方,作為湯劑在臨床應(yīng)用多年,療效確切。但湯劑應(yīng)用不便,制成顆粒劑(無(wú)糖型)后,方便患者應(yīng)用,且糖尿病患者可以服用。制劑研究采用正交實(shí)驗(yàn)對(duì)提取工藝進(jìn)行了優(yōu)選,顆粒選擇了微粉硅膠和可溶性淀粉為輔料,成型性好。制成的顆粒平均休止角為32.3°,說(shuō)明顆粒流動(dòng)性良好。此工藝可以作為大生產(chǎn)條件依據(jù)。
(通訊作者:楊戈)
[1]熊珮,陳忻,張楠.帕金森病病理機(jī)制及中藥防治帕金森病實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展.[J].中國(guó)中藥雜志.2012,37(05):686.
[2]孫維廣,何國(guó)熙,葉志明.中藥顆粒劑的發(fā)展與制備工藝的改進(jìn)[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥,2009,3(10):21-23.
[3]董玉秀.對(duì)休止角測(cè)定方法的討論[J].中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2008,39(04):317-320.
陳朵(1990-),女,現(xiàn)為長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)2014級(jí)中藥學(xué)研究生。研究方向?yàn)橹兴幩巹?/p>
吉林省科技廳重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目,項(xiàng)目編號(hào):20150204054YY;項(xiàng)目名稱: 院內(nèi)制劑抑顫顆粒的研究。
楊戈,現(xiàn)為長(zhǎng)春中藥藥大學(xué)附屬醫(yī)院副主任醫(yī)師。主要研究方向?yàn)橹嗅t(yī)內(nèi)科。