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      腦損傷動(dòng)物模型實(shí)施亞低溫的模式概述

      2016-02-10 15:30:52劉成龍陳翀孫洪濤
      天津醫(yī)藥 2016年3期
      關(guān)鍵詞:亞低溫動(dòng)物模型腦損傷

      劉成龍,陳翀,孫洪濤

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      腦損傷動(dòng)物模型實(shí)施亞低溫的模式概述

      劉成龍,陳翀,孫洪濤

      摘要:腦損傷是全球死亡和致殘的主要原因之一,給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重的負(fù)擔(dān)。腦損傷動(dòng)物模型的亞低溫實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驗(yàn)槟X損傷的治療提供新的干預(yù)及治療措施。在大量的腦損傷動(dòng)物模型的亞低溫治療實(shí)驗(yàn)中,其腦保護(hù)的作用已經(jīng)被證實(shí)。然而,目前的腦損傷動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的亞低溫治療模式尚不明確,其最佳的治療模式如低溫持續(xù)的時(shí)間、低溫誘導(dǎo)的方法以及最佳的溫度等仍然未知。本文對(duì)腦損傷動(dòng)物模型的亞低溫實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行概述。

      關(guān)鍵詞:亞低溫;腦損傷;動(dòng)物模型;治療模式

      作者單位:天津,腦創(chuàng)傷與神經(jīng)疾病研究所,武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院腦科醫(yī)院,天津市神經(jīng)創(chuàng)傷修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(郵編300162)

      腦損傷因其高死亡率、高致殘率,成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)面臨的難題,給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重的負(fù)擔(dān),因此尋找有效的治療措施是當(dāng)前腦損傷研究領(lǐng)域的迫切需求[1-2]。人們對(duì)于低溫治療具有神經(jīng)保護(hù)功能的認(rèn)識(shí)已經(jīng)有1個(gè)多世紀(jì)的歷史。由于對(duì)腦損傷所引起的繼發(fā)性神經(jīng)損傷級(jí)聯(lián)反應(yīng)這一病理生理學(xué)機(jī)制已經(jīng)得到證實(shí),使用低溫治療阻斷這種繼發(fā)性損傷并發(fā)揮其神經(jīng)保護(hù)作用的方法再度為學(xué)者所關(guān)注[3]。近期,有學(xué)者提出,盡管目前有大量亞低溫治療腦損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),但其最佳的治療模式如低溫持續(xù)時(shí)間和最合適的誘導(dǎo)方法[4],以及產(chǎn)生最佳神經(jīng)保護(hù)功能的溫度仍未確定[5]。由此,本文擬對(duì)腦損傷動(dòng)物模型的亞低溫實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行綜述。

      1 亞低溫的神經(jīng)系統(tǒng)保護(hù)作用

      早期觀點(diǎn)認(rèn)為亞低溫能夠降低大腦的新陳代謝是其腦保護(hù)作用的首要機(jī)制,大腦溫度每降低1℃,其代謝速率降低6%[6]。目前動(dòng)物研究顯示亞低溫神經(jīng)保護(hù)作用與減弱顱腦創(chuàng)傷(traumatic brain injury, TBI)后繼發(fā)性損傷有關(guān)。亞低溫的神經(jīng)系統(tǒng)保護(hù)作用包括:(1)降低顱內(nèi)壓。(2)保護(hù)血-腦屏障,減少血管源性水腫。(3)減弱免疫反應(yīng)、自由基產(chǎn)生,降低腦代謝及興奮性毒性發(fā)生,減少細(xì)胞凋亡。(4)抑制癲癇發(fā)作[7]。(5)改善TBI后受損腦組織缺氧、毒素累積所產(chǎn)生的微環(huán)境[8]。(6)通過(guò)降低組織的耗氧量,減緩組織缺血時(shí)對(duì)三磷酸腺苷(ATP)的消耗速度,從而提高組織對(duì)缺血缺氧的耐受力等[9]。

      2 腦損傷動(dòng)物模型

      2.1 TBI模型TBI動(dòng)物模型常用的造模方法有可控性皮質(zhì)損傷(controlled cortical injury, CCI)和液壓沖擊(fluid percus?sion, FP)腦損傷法。CCI打擊參數(shù)根據(jù)研究的目的、造模動(dòng)物及損傷程度的不同而不同,在小鼠TBI模型制作過(guò)程中,Lee等[10]應(yīng)用的速度為3 m/s,深度為1.0 mm,停留時(shí)間為150 ms,而有的學(xué)者則應(yīng)用深度為2.0 mm的打擊參數(shù)[11]。FP中度腦損傷打擊參數(shù)范圍為1.7~2.3個(gè)大氣壓[12-15]。其他TBI模型,通過(guò)視神經(jīng)的牽拉傷制作創(chuàng)傷性軸索損傷模型[16-17]。2.2缺血缺氧再灌注腦損傷模型該損傷模型的制作大致有心臟驟停再?gòu)?fù)蘇和動(dòng)脈阻塞等方法。有學(xué)者報(bào)道應(yīng)用靜脈注射氯化鉀或經(jīng)食管心臟起搏器的方法誘發(fā)心臟驟停,然后進(jìn)行胸部按壓、靜脈注射腎上腺素等使其恢復(fù)自主循環(huán),從而制作出缺血再灌注的動(dòng)物模型[18-19]。動(dòng)脈阻塞法:(1)應(yīng)用遠(yuǎn)程可控血管封堵器短暫封閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈后,將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于缺氧環(huán)境中[20]。(2)分離結(jié)扎左側(cè)或右側(cè)頸總動(dòng)脈并暴露于缺氧環(huán)境中[21-22]。(3)通過(guò)分離頸內(nèi)動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈及頸總動(dòng)脈,將尼龍線末端燒灼后插入頸內(nèi)動(dòng)脈管腔直到大腦中動(dòng)脈起始部來(lái)造成閉塞[23]。

      3 亞低溫治療腦損傷的模式

      Auriat等[4]在研究長(zhǎng)時(shí)程亞低溫對(duì)于缺血缺氧性腦損傷大鼠模型治療效果的研究中提出,盡管目前有大量亞低溫的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),但其最佳的治療模式如低溫持續(xù)時(shí)間和最合適的誘導(dǎo)方法仍然未知。

      3.1麻醉方式目前大多數(shù)動(dòng)物亞低溫實(shí)驗(yàn)是在麻醉狀態(tài)下進(jìn)行的。麻醉方式大致有氣體麻醉及藥物麻醉。(1)氣體麻醉:主要的麻醉藥物有氟烷或異氟烷混合7∶3的一氧化二氮和氧氣,其劑量與實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象及麻醉的深淺程度有關(guān)。3%氟烷混合7∶3的一氧化二氮和氧氣麻醉,機(jī)械通氣后以0.5%氟烷混合氣體維持[24]。2.5%異氟烷麻醉,通過(guò)鼻錐麻醉面罩維持[17]。2%氟烷混合7∶3的一氧化二氮和氧氣并機(jī)械通氣維持[13,25-26]。(2)藥物麻醉:戊巴比妥鈉腹腔注射,克他命(氯胺酮)、鹽酸賽拉嗪、阿托品肌內(nèi)注射[15,27]。也有學(xué)者于實(shí)施亞低溫實(shí)驗(yàn)前腹腔注射水合氯醛[12]和戊巴比妥鈉[19]進(jìn)行麻醉。(3)亞低溫全程無(wú)麻醉:有學(xué)者在用藥物誘導(dǎo)的亞低溫實(shí)驗(yàn)中未對(duì)小鼠進(jìn)行麻醉,發(fā)現(xiàn)其亞低溫全程清醒且無(wú)寒戰(zhàn)反應(yīng)[10-11]。3.2亞低溫治療的時(shí)間窗臨床研究中,一般認(rèn)為缺血性腦損傷宜盡早實(shí)施亞低溫,出血性腦損傷則宜在損傷晚期實(shí)施,而對(duì)于創(chuàng)傷性腦損傷,亞低溫治療的時(shí)間窗仍存在爭(zhēng)議。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中,實(shí)施亞低溫的時(shí)間同樣未確定。

      有學(xué)者于TBI損傷后立即實(shí)施亞低溫[17,27-28],有的則分別于損傷后10 min[24]、15 min[11]、30 min[15]實(shí)施亞低溫治療。Lee 等[10]在神經(jīng)降壓素受體阻滯劑HPI-363引導(dǎo)的亞低溫研究中,分別于TBI術(shù)后15、60、120、180 min予以亞低溫治療并得出結(jié)論:藥物HPI-363誘導(dǎo)亞低溫治療的時(shí)間窗至少是急性TBI后2 h。有研究在新生幼豬的缺血缺氧性腦損傷模型中于損傷后2 h開(kāi)始實(shí)施亞低溫治療[5]。也有研究于缺血缺氧腦損傷復(fù)蘇后進(jìn)行亞低溫治療[19-20,29]。Ichinose等[21]對(duì)出生第6天的SD大鼠進(jìn)行左側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎,恢復(fù)1 h后,置于低氧的溫度控制箱內(nèi)進(jìn)行亞低溫治療。

      3.3亞低溫的目標(biāo)溫度與時(shí)程在眾多的腦損傷動(dòng)物亞低溫實(shí)驗(yàn)中,其目標(biāo)溫度及時(shí)程不盡相同。在豚鼠創(chuàng)傷性軸索損傷模型中應(yīng)用的目標(biāo)溫度是32.0~32.5℃并維持4 h[16]。Bramlett等[24]應(yīng)用FP制作創(chuàng)傷性軸索損傷模型,其亞低溫組用中度低溫30℃和輕度低溫33℃維持3 h。SD大鼠視神經(jīng)牽拉傷模型中應(yīng)用的目標(biāo)溫度為32℃維持3 h[17]。Girisgin 等[28]在研究TBI后神經(jīng)保護(hù)功能與亞低溫深度的關(guān)系中,規(guī)定中度亞低溫組為32~33℃,深度亞低溫組為32~30℃并維持3 h。TBI后藥物誘導(dǎo)亞低溫治療研究中,Lee等[10]設(shè)定亞低溫實(shí)驗(yàn)的目標(biāo)溫度波動(dòng)于32~34℃維持6 h,Gu等[11]研究則規(guī)定其目標(biāo)溫度波動(dòng)于32~35℃維持6 h。在其他的TBI后亞低溫的實(shí)驗(yàn)研究中,有的學(xué)者規(guī)定其亞低溫治療的目標(biāo)溫度及持續(xù)時(shí)間為32℃維持4 h[12-13],有的規(guī)定為33℃維持3 h[26],還有的規(guī)定為33℃維持4 h[15,30]。

      新生幼豬的缺血缺氧腦損傷模型亞低溫治療中,Kerenyi 等[5]分別應(yīng)用30℃、33.5℃及35℃治療24 h,Ezzati等[20]應(yīng)用33.5℃維持18~24 h,Hoque等[29]應(yīng)用(37.0±0.2)℃維持48 h。鼠的缺血缺氧腦損傷模型亞低溫治療實(shí)驗(yàn)中,有學(xué)者應(yīng)用(28.8±1)℃維持8 min的亞低溫模式[18],有的應(yīng)用(32±1)℃維持1 h[21],有的(32±1)℃維持4 h[19],有的32℃維持3 d[4],有的則是(33.0±0.5)℃維持6 h[23]。

      3.4亞低溫誘導(dǎo)的方法及維持目前誘導(dǎo)亞低溫的方法按其原理分為物理降溫和藥物降溫。根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中物理降溫的方法不同分為:小風(fēng)扇吹風(fēng)降溫,冰水、冰塊及噴霧體表降溫,血管內(nèi)降溫和自動(dòng)制冷降溫。

      3.4.1物理降溫(1)小風(fēng)扇吹風(fēng)降溫法。應(yīng)用小風(fēng)扇直接向頭部吹冷風(fēng)使體溫下降[24]。Ma等[17]通過(guò)用風(fēng)扇吹頭部、冷水噴霧及冰袋包裹軀體的方法誘導(dǎo)低溫并維持。(2)冰水、冰塊及噴霧體表降溫法。將已麻醉的SD大鼠軀干浸入冰水中,浸冰水前用塑料袋將其包裹而頭部露出,當(dāng)頭部溫度降至距離目標(biāo)溫度差2℃時(shí),將大鼠從冰水中取出,15~30 min誘導(dǎo)至目標(biāo)溫度(32℃或33℃)后,間斷應(yīng)用冰袋或烤燈使大鼠維持于目標(biāo)溫度[12-13,26]。有學(xué)者于橡膠手套的手指部分填充碎冰塊,放置于SD大鼠頭部以誘導(dǎo)至目標(biāo)溫度,1個(gè)充滿碎冰塊的橡膠手指用于誘導(dǎo)中度低溫,2個(gè)這樣的橡膠手指用于維持深度低溫[28]。通過(guò)不同溫度(0~1℃或5~6℃)的冷水袋誘導(dǎo)不同程度的亞低溫[14]。用70%、75%乙醇或異丙醇向?qū)嶒?yàn)對(duì)象噴霧或涂擦體表來(lái)誘導(dǎo)低體溫[18-19,21]。(3)血管內(nèi)降溫法。Kuo等[27]向SD大鼠右側(cè)頸外靜脈注射4℃生理鹽水來(lái)誘導(dǎo)亞低溫。(4)自動(dòng)制冷降溫法。有學(xué)者聯(lián)合制冷/加熱系統(tǒng)和局部吹冷風(fēng)、烤燈來(lái)誘導(dǎo)并維持目標(biāo)溫度。用水墊包裹實(shí)驗(yàn)動(dòng)物并通過(guò)降低水溫誘導(dǎo)并維持低體溫[5,20]。用可循環(huán)冷水的冰帽誘導(dǎo)并維持低溫[29]。

      3.4.2藥物降溫近期有研究顯示應(yīng)用神經(jīng)降壓素受體阻滯劑HPI-363腹腔注射來(lái)誘導(dǎo)亞低溫,其藥物應(yīng)用的方法為:首次劑量0.3 mg/kg(C57BL/6小鼠,8~12周,22~28 g)在30~60 min內(nèi)使體溫下降3~5℃,之后間隔大于1.5 h半量注射以維持目標(biāo)體溫[10]。另一項(xiàng)研究應(yīng)用神經(jīng)降壓素受體阻滯劑HPI-201對(duì)新生14 d的Wistar鼠進(jìn)行腹腔注射,其首次劑量2 mg/kg,間隔1.5~2 h半量注射1~2次以維持低體溫[11]。3.5復(fù)溫在臨床研究中復(fù)溫作為亞低溫治療的最后一個(gè)階段,被認(rèn)為是最危險(xiǎn)的階段,然而在動(dòng)物的亞低溫實(shí)驗(yàn)中復(fù)溫的方法及速率卻較少被明確提及。Bramlett等[24]在SD大鼠TBI模型亞低溫治療的末期,于15 min內(nèi)使其恢復(fù)正常體溫。在幼豬缺血缺氧腦損傷模型亞低溫治療的末期,使用自動(dòng)加熱/制冷水墊裝置,加熱水墊并以0.5℃/h的速率復(fù)溫[5]。Maxwell等[16]對(duì)創(chuàng)傷性軸索損傷的豚鼠行亞低溫治療并以慢速?gòu)?fù)溫每40 min 1℃,中速?gòu)?fù)溫每20 min 1℃,快速?gòu)?fù)溫每10 min 1℃,研究不同復(fù)溫速率對(duì)亞低溫結(jié)果的影響,結(jié)果提示在亞低溫治療創(chuàng)傷性軸索損傷中,復(fù)溫速率超過(guò)每10 min1℃時(shí)可引起繼發(fā)性軸索病理性改變。

      4 亞低溫的實(shí)驗(yàn)監(jiān)測(cè)方法

      臨床研究中顯示,亞低溫治療過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)較多的并發(fā)癥或不良反應(yīng),如寒戰(zhàn)、電解質(zhì)紊亂、酸堿平衡失調(diào)、胰島素抵抗、腎功能障礙、心臟功能障礙等[6]。動(dòng)物的亞低溫實(shí)驗(yàn)中,監(jiān)測(cè)其生理指標(biāo)及生命體征有助于排除上述并發(fā)癥或不良反應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。

      4.1生命體征監(jiān)測(cè)體溫的監(jiān)測(cè)常用探針監(jiān)測(cè)顳肌溫度、直腸溫度及腦皮質(zhì)溫度。頸總動(dòng)脈插管、股動(dòng)脈插管監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓[10,14-15,30-31]。應(yīng)用皮下非侵襲的經(jīng)皮裝置監(jiān)測(cè)心率[28]。

      4.2生理指標(biāo)監(jiān)測(cè)主要通過(guò)頸總動(dòng)脈插管、股動(dòng)脈插管或鼠尾動(dòng)脈插管進(jìn)行血?dú)夥治鰜?lái)監(jiān)測(cè)血pH、二氧化碳分壓、氧分壓等指標(biāo)。

      5 亞低溫的實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)

      亞低溫動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果檢測(cè)的指標(biāo)主要依據(jù)亞低溫的腦保護(hù)機(jī)制,如減少炎癥反應(yīng)、抑制凋亡、保護(hù)血腦屏障等,這些指標(biāo)主要通過(guò)蛋白免疫印跡(Western blot)、免疫組織化學(xué)及組織病理學(xué)等方法進(jìn)行檢測(cè)。

      5.1 Western blot檢測(cè)其目的主要是:(1)檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)量,如caspase-3[15,25]、凋亡誘導(dǎo)因子[19](apoptosis in?ducing factor, AIF)以及金屬蛋白酶組織抑制劑(tissue inhibi?tors of metalloproteinases, TIMPs)[13]在神經(jīng)元或腦組織的表達(dá)水平。(2)檢測(cè)炎癥相關(guān)因子如腫瘤壞死因子α(tumor necro?sis factor-α, TNF-α)、白細(xì)胞介素(interleukin, IL)-1β、cas?pase-1、caspase-11、中樞神經(jīng)系統(tǒng)中與炎癥因子相關(guān)并參與調(diào)節(jié)炎癥的因子嘌呤能受體P2X7以及抗炎因子IL-10的表達(dá)量來(lái)揭示亞低溫的治療效果[10-11,15]。(3)分析腦皮質(zhì)大分子蛋白質(zhì)如免疫球蛋白G、緊密連接相關(guān)蛋白、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-2、MMP-9的表達(dá)量用于揭示血腦屏障的破壞程度[10-11]。(4)自噬通路相關(guān)蛋白檢測(cè),有研究顯示TBI后微管相關(guān)蛋白輕鏈3(Light Chain3, LC3)、酵母自噬基因Atg6/Vps30同源基因Beclin-1的表達(dá)升高,經(jīng)亞低溫治療后其表達(dá)量進(jìn)一步增加,在損傷同側(cè)海馬區(qū)域,細(xì)胞死亡下降而細(xì)胞自噬增加,并認(rèn)為細(xì)胞自噬可能參與TBI后亞低溫治療的神經(jīng)保護(hù)作用[12]。

      5.2基因水平的檢測(cè)基因水平的檢測(cè)有RT-PCR技術(shù),其主要用于檢測(cè)相關(guān)因子在RNA水平的表達(dá)。有研究應(yīng)用cDNA技術(shù)發(fā)現(xiàn)133個(gè)轉(zhuǎn)錄體在低溫組的表達(dá)水平與正常溫度組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,經(jīng)分析這些基因中有9個(gè)基因本體的類(lèi)別受到亞低溫的顯著影響,這9個(gè)基因主要參與突觸組織形成和炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié),其中Ank3、Cmbp、Nrxn3、Tgm2、Fc?gr3的mRNA表達(dá)量顯著受到亞低溫的影響[26]。

      5.3免疫組織化學(xué)利用特殊標(biāo)記的抗體在組織細(xì)胞原位通過(guò)抗原抗體反應(yīng)標(biāo)記目標(biāo)細(xì)胞或特定的組織蛋白分子,并對(duì)陽(yáng)性細(xì)胞或組織蛋白分子進(jìn)行定量分析。(1)標(biāo)記正常神經(jīng)元,利用NeuN染色,并對(duì)特定區(qū)域的正常神經(jīng)元計(jì)數(shù),用以評(píng)價(jià)亞低溫的治療效果[12,15,30]。(2)標(biāo)記變性壞死的神經(jīng)元,利用銀染法[24]對(duì)變性壞死的神經(jīng)元進(jìn)行染色;運(yùn)用Fluoro-JadeB染色法標(biāo)記TBI后變性神經(jīng)元[31];使用末端標(biāo)記法(Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling, TUNEL)檢測(cè)變性壞死神經(jīng)元[10-11,14];通過(guò)對(duì)變性壞死神經(jīng)元的標(biāo)記并進(jìn)行定量分析,評(píng)估亞低溫治療效果。(3)對(duì)特定組織因子進(jìn)行標(biāo)記,運(yùn)用相應(yīng)抗體對(duì)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶、3-硝基酪氨酸進(jìn)行標(biāo)記以檢測(cè)氧化性損傷的程度[27],用相應(yīng)的抗體標(biāo)記LC3、Beclin-1,并對(duì)特定區(qū)域的陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)以評(píng)估自噬反應(yīng)的程度[12]。

      5.4組織病理學(xué)運(yùn)用不同的染色方法對(duì)組織或細(xì)胞進(jìn)行染色,利用顯微鏡等技術(shù)進(jìn)行觀察,并予以定性或定量分析。(1)創(chuàng)傷性軸索損傷后,運(yùn)用透射電鏡對(duì)損傷的視神經(jīng)片段進(jìn)行觀察,利用體視學(xué)技術(shù)分析軸索中微管、神經(jīng)蛋白纖維的數(shù)量及間距[16]。電子顯微鏡觀察并計(jì)數(shù)軸索的密度[17]。(2)TBI及腦梗死后的損傷容積運(yùn)用尼氏染色法[10-11]、蘇木精-伊紅染色法[30]、氯化三苯基四氮唑[14,27,31]對(duì)切片進(jìn)行染色,然后將切片數(shù)字化處理,應(yīng)用圖形處理軟件計(jì)算損傷的容積。(3)血腦屏障損傷后,采用伊文思藍(lán)染色后對(duì)腦組織行冠狀切片,通過(guò)熒光顯微鏡觀察其熒光滲漏,運(yùn)用圖像處理軟件行定量分析[10-11]。

      5.5行為學(xué)檢測(cè)行為學(xué)檢測(cè)用于亞低溫治療腦損傷動(dòng)物后對(duì)其感覺(jué)運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況的評(píng)價(jià)。(1)脫粘實(shí)驗(yàn)是在小鼠前肢粘上圓形小物體后,記錄其接觸和脫去圓形物體的時(shí)間。(2)圓柱實(shí)驗(yàn)用于檢測(cè)運(yùn)動(dòng)皮質(zhì)單側(cè)損傷致使前肢運(yùn)動(dòng)不對(duì)稱(chēng)的恢復(fù)情況,采用鼠籠監(jiān)視系統(tǒng)對(duì)小鼠的行為進(jìn)行持續(xù)觀察,并記錄時(shí)間分析其感覺(jué)運(yùn)動(dòng)恢復(fù)情況[10]。(3)斜坡實(shí)驗(yàn)是將大鼠放置斜坡上,通過(guò)改變傾斜角度來(lái)測(cè)量肢體強(qiáng)度[14]。(4)拴住大鼠尾巴吊離地面1 m,緩慢下降,觀察其姿勢(shì)并予以評(píng)分,將大鼠放置狹窄的梁上行走,觀察其行為反應(yīng)并予以評(píng)分[23]。

      6 展望

      盡管目前已經(jīng)得出亞低溫具有神經(jīng)保護(hù)功能的結(jié)論,但是動(dòng)物亞低溫實(shí)驗(yàn)的模式不盡相同,仍然無(wú)理想統(tǒng)一的治療參數(shù),這或許將成為今后研究的一個(gè)方向。從腦損傷動(dòng)物的亞低溫治療的實(shí)驗(yàn)指標(biāo)中不難看出,目前國(guó)內(nèi)外仍集中研究探索亞低溫的腦保護(hù)機(jī)制,由于對(duì)亞低溫影響凋亡通路及調(diào)節(jié)因子的機(jī)制尚未完全明確,因而對(duì)于亞低溫阻斷凋亡機(jī)制的研究仍將繼續(xù)成為研究的熱點(diǎn)。細(xì)胞自噬與亞低溫腦保護(hù)作用的關(guān)系或?qū)⒊蔀樵撗芯康男聼狳c(diǎn)。

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      (2015-09-01收稿2015-10-16修回)

      (本文編輯陳麗潔)

      The overview on animal models of brain injury with mild hypothermia

      LIU Chenglong, CHEN Chong, SUN Hongtao
      Institute of Traumatic Brain Injury and Neurology, Brain Hospital of Affiliated Hospital of Logistics College of Chinese People′s Armed Police Forces, Tianjin Key Laboratory of Neurotrauma Repair, Tianjin 300162, China Corresponding Author E-mail: chenmo333@163.com

      Abstract:Brain injury is a major cause of worldwide mortality and disability, and it has brought a heavy burden to so?ciety and family. The hypothermia of brain injury in animal models can provide new intervention and therapeutic measures for patients with brain injury. The protective role of mild hypothermia has been demonstrated in a large number of animal models of brain injury in experiments. However, the pattern of mild hypothermiain brain injury animals, at present, is not ful?ly delineated, and the optimal patterns, such as the duration, induced method and the topgallant temperature are still un?clear. Therefore, this paper summarized the experimental methods of mild hypothermiain brain injury of animal model.

      Key words:mildhypothermia; brain injury; animal model; treatment pattern

      中圖分類(lèi)號(hào):R-332

      文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

      DOI:10.11958/20150140

      基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81471275,81271392,81401067,81301050)

      作者簡(jiǎn)介:劉成龍(1988),男,碩士在讀,主要從事中樞神經(jīng)創(chuàng)傷修復(fù)研究

      通訊作者E-mail:chenmo333@163.com

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