楊素蓮,尹頌超,張?jiān)魄?謝淑霞,易金玲,葉聰秀,賴(lài) 維

(中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院皮膚性病科,廣州 510630)

硫酸鎳斑貼試驗(yàn)前后經(jīng)皮水分丟失的測(cè)定與分析

楊素蓮,尹頌超,張?jiān)魄?謝淑霞△,易金玲,葉聰秀,賴(lài) 維

(中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院皮膚性病科,廣州 510630)

目的 通過(guò)檢測(cè)硫酸鎳斑貼試驗(yàn)受試部位經(jīng)皮水分丟失(TEWL)變化情況，探討TEWL測(cè)定在接觸性皮炎診斷中應(yīng)用的可能性。方法 對(duì)38例健康志愿者進(jìn)行人體皮膚封閉型硫酸鎳斑貼試驗(yàn)。將2.5%硫酸鎳斑試器用膠帶貼敷在受試者上背部，同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組(空白斑試器貼于受試者上背部的不同區(qū)域)38例，封包24 h后揭去斑試物。分別于試驗(yàn)前(D0)，揭去斑試物后0.5 h(D1)、24 h(D2)對(duì)皮膚反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行臨床評(píng)估及TEWL測(cè)定。結(jié)果 38例受試者中8例臨床評(píng)估為陽(yáng)性。D1時(shí)試驗(yàn)組中鎳斑貼試驗(yàn)陰性組、陽(yáng)性組及空白對(duì)照組TEWL值分別為20.04±5.14、18.40±4.46及17.76±4.23，均明顯高于D0時(shí)的12.35±3.84、13.30±5.12及12.26±4.28(P<0.05)。D2時(shí)斑貼試驗(yàn)陽(yáng)性組TEWL值為17.01±5.19，較陰性組TEWL值12.75±3.58明顯升高(P=0.013)，陰性組D2、D0比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 硫酸鎳斑貼誘發(fā)的接觸性皮炎模型中，斑貼封包及皮膚的陽(yáng)性結(jié)果對(duì)TEWL值有一定程度的影響。

硫酸鎳;斑貼試驗(yàn);經(jīng)皮水分丟失;接觸性皮炎

人體皮膚封閉型斑貼試驗(yàn)是診斷接觸性皮炎的金標(biāo)準(zhǔn)[1]，其結(jié)果的判斷是以臨床肉眼觀察為主，但易受觀察者的光感差異和主觀感覺(jué)影響。非創(chuàng)傷性皮膚檢測(cè)技術(shù)經(jīng)皮水分丟失(transepidermal water loss,TEWL)具有無(wú)創(chuàng)、客觀性等特點(diǎn)，有利于評(píng)價(jià)各種化學(xué)物質(zhì)對(duì)皮膚屏障的影響，國(guó)外已廣泛用于接觸性皮炎、口周皮炎等疾病的臨床研究與病情評(píng)價(jià)[2-4]。目前國(guó)內(nèi)對(duì)此方面研究較少，本文對(duì)38例健康志愿者進(jìn)行人體皮膚封閉型硫酸鎳斑貼試驗(yàn)，并在斑貼試驗(yàn)前后檢測(cè)局部皮膚的TEWL值，研究TEWL值在皮膚受到化學(xué)刺激后的情況變化，探討TEWL測(cè)定在接觸性皮炎診斷中應(yīng)用的可能。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選擇自愿受試者38例，其中男7例，女31例；年齡20～59歲，平均(41.21±8.87)歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)近1周使用抗組胺藥或近1個(gè)月內(nèi)使用免疫抑制劑者；(2)近兩個(gè)月內(nèi)受試部位應(yīng)用任何抗炎藥物者或患有炎癥性皮膚病臨床未愈者；(3)胰島素依賴(lài)性糖尿病患者；(4)正在接受治療的哮喘或其他慢性呼吸系統(tǒng)疾病患者；(5)在近6個(gè)月內(nèi)接受抗癌化學(xué)治療者及免疫缺陷或自身免疫性疾病患者；(6)哺乳期或妊娠婦女；(7)雙側(cè)乳房切除及雙側(cè)腋下淋巴結(jié)切除者；(8)在皮膚受試部位由于瘢痕、色素、萎縮、鮮紅斑痣或其他瑕疵而影響試驗(yàn)結(jié)果的判斷者；(9)參加其他臨床試驗(yàn)或體質(zhì)高度敏感者；(10)非自愿參加者或不能按試驗(yàn)要求完成規(guī)定內(nèi)容者。所有自愿受試者認(rèn)真閱讀知情同意書(shū)并簽字。

1.2 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)物為2.5%硫酸鎳，由上海市皮膚病醫(yī)院研制。斑試器：為貼附于封閉式膠帶上內(nèi)徑為8 mm的塑料制小碟，上海衛(wèi)生材料廠研制。TEWL檢測(cè)儀：德國(guó)CK公司生產(chǎn)，型號(hào)為T(mén)M300，檢測(cè)經(jīng)表皮水分丟失。

1.3 方法

1.3.1 編號(hào)分組 對(duì)符合入組標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)入研究的受試者，按入組先后順序給受試者編號(hào)(01、02、03…)，以此作為受試者身份識(shí)別號(hào)碼，整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格按照藥品臨床試驗(yàn)管理規(guī)范(GCP)標(biāo)準(zhǔn)操作。

1.3.2 斑貼試驗(yàn) 將加有2.5%硫酸鎳(用量0.020～0.025 g)的斑試器(試驗(yàn)組)及空白斑試器(空白對(duì)照組)貼敷于受試者背部的不同區(qū)域，24 h后揭去斑試物。分別于試驗(yàn)前(D0)，揭去斑試物后0.5 h(D1)、24 h(D2)進(jìn)行臨床觀察并記錄皮膚反應(yīng)，同時(shí)測(cè)定皮膚TEWL值(單位：g·m2·h)。

1.4 皮膚反應(yīng)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)[5]0分為無(wú)反應(yīng)；1分為可疑陽(yáng)性反應(yīng)，僅有輕度紅斑；2分為弱陽(yáng)性反應(yīng)，紅斑、浸潤(rùn)、可有少量丘疹；3分為強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，紅斑、浸潤(rùn)、丘疹、水皰；4分為極強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，紅斑、浸潤(rùn)明顯、出現(xiàn)水皰大皰。

2 結(jié) 果

2.1 臨床評(píng)分 38例受試者全部按照試驗(yàn)要求完成試驗(yàn)。臨床評(píng)分結(jié)果共8例陽(yáng)性(其中，單獨(dú)D1陽(yáng)性1例，D1、D2陽(yáng)性4例，單獨(dú)D2陽(yáng)性3例)，見(jiàn)表1。

表1 硫酸鎳斑貼試驗(yàn)不同評(píng)分等級(jí)受試者分布情況(n=38，分)

2.2 斑貼試驗(yàn)對(duì)TEWL的影響 試驗(yàn)組中貼試驗(yàn)陰性組(30例)、陽(yáng)性組(8例)及空白對(duì)照組(38例)在D1時(shí)TEWL值均較D0明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。至D2時(shí)陰性組及空白對(duì)照組TEWL均逐漸下降至D0水平(P=0.717、0.120、0.607)；而陽(yáng)性組TEWL值較陰性組TEWL值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.013)，見(jiàn)表2。

表2 硫酸鎳斑貼試驗(yàn)前后TEWL值的比較(±s)

a:P<0.05,與D0時(shí)比較;b:P<0.0,與陰性組比較。

2.3 斑貼試驗(yàn)臨床評(píng)估結(jié)果與TEWL值的關(guān)系 D1時(shí)斑貼試驗(yàn)陰性組(33例)和陽(yáng)性組(5例)的TEWL值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.50)，TEWL值與皮膚反應(yīng)程度(1、2分)無(wú)相關(guān)關(guān)系(r=-0.560，P=0.737)。D2時(shí)斑貼試驗(yàn)陽(yáng)性組(7例)TEWL值明顯高于陰性者(31例)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.013)，且TEWL值與斑貼試驗(yàn)陽(yáng)性皮膚反應(yīng)程度呈正相關(guān)(r=0.380，P=0.019)。

3 討 論

TEWL、角質(zhì)層含水量、皮脂水平、皮膚表面pH值、角質(zhì)層和表皮厚度等是評(píng)價(jià)皮膚屏障功能客觀、量化、便捷的指標(biāo)；其中TEWL是最主要的指標(biāo)。TEWL是通過(guò)測(cè)定皮膚表面的水蒸氣壓梯度表明水分散失的情況，能夠靈敏地反映出角質(zhì)層的完整性及皮膚的水屏障功能。當(dāng)皮膚受到外界物理化學(xué)因素的刺激和損害時(shí)，TEWL值升高、當(dāng)皮膚屏障功能改善時(shí)，TEWL值降低。研究表明，由化學(xué)刺激引發(fā)的皮膚損傷及炎性反應(yīng)過(guò)程中，皮膚水分屏障功能的異常往往是最早的改變之一[6-7]。硫酸鎳是常見(jiàn)的變應(yīng)原，其作用于皮膚可導(dǎo)致皮膚損傷，誘發(fā)炎性反應(yīng)，致使皮膚水分的屏障功能發(fā)生改變，滲出皮膚的水分增加。

本研究發(fā)現(xiàn)硫酸鎳斑貼試驗(yàn)反應(yīng)陰性組與空白對(duì)照組受試者去斑試物后0.5 h TEWL值均較試驗(yàn)前明顯升高，說(shuō)明進(jìn)行人體皮膚封閉型斑貼試驗(yàn)即使在未出現(xiàn)皮膚炎癥的情況下TEWL值也可增加，可能與封閉型斑貼試驗(yàn)引起局部血流增加，局部溫度升高，汗腺分泌增加，代謝加快有關(guān)。這種TEWL值的升高是非特異性的，而該兩組去除斑試物后24 h的TEWL值與試驗(yàn)前無(wú)明顯差異，說(shuō)明封閉型斑貼試驗(yàn)對(duì)皮膚TEWL值的影響是暫時(shí)的，隨著斑貼的去除，TEWL值可在24 h內(nèi)逐漸恢復(fù)。另外，陽(yáng)性反應(yīng)的受試者TEWL值較陰性反應(yīng)者在0.5 h無(wú)明顯差異，24 h后明顯高于陰性反應(yīng)者，且與皮膚反應(yīng)程度呈正相關(guān)。這說(shuō)明去除斑貼24 h后出現(xiàn)的TEWL值差異與不同受試者皮膚出現(xiàn)炎性反應(yīng)有關(guān)，而且皮膚炎性反應(yīng)程度越高，TEWL值越高。總之，硫酸鎳斑貼誘發(fā)的接觸性皮炎模型中，斑試器會(huì)影響皮膚TEWL值，去除斑貼24 h后皮膚的陽(yáng)性結(jié)果與皮膚TEWL值有一定關(guān)系。

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楊素蓮(1963-)，副主任護(hù)師，本科，主要從事皮膚病檢測(cè)與治療工作?！?/p>

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