侯建成
(黑龍江省寧安市動物疫病預防控制中心,黑龍江 寧安 157400)
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雞新城疫的實驗室診斷及鑒別
侯建成
(黑龍江省寧安市動物疫病預防控制中心,黑龍江 寧安 157400)
摘要:雞新城疫也稱亞洲雞瘟或偽雞瘟,是由一種病毒引起的高度接觸性傳染病,常呈急性敗血癥經(jīng)過。在病初或癥狀不典型時,可能與雞霍亂、傳染性支氣管炎和傳染性喉氣管炎等病混淆,應注意鑒別診斷,本文從實驗室診斷和病毒分離與鑒定對該病的診斷進行詳細介紹。
關(guān)鍵詞:雞;新城疫;實驗室診斷;鑒別診斷
雞新城疫的診斷是根據(jù)流行病學的記載,如本病只感染雞,發(fā)病率和死亡率都很高,常呈現(xiàn)毀滅性流行,結(jié)合臨床上呈嚴重下痢,呼吸困難,死亡較慢者常出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,病理解剖見有消化道的彌漫性點狀出血和潰瘍,以及脂肪組織的針尖狀出血點等方面的綜合癥狀,一般可以作出初步診斷。但確實可靠的診斷常須借助實驗室的檢查。
1實驗室診斷
診斷雞新城疫和雞霍亂,可采取病雞的脾、腦等乳劑,肌肉或皮下注射健康雞和兔或小兔各2~3只,如果雞和兔或小鼠在短期內(nèi)發(fā)病死亡,并在血液涂片中看到有兩極染色的短桿菌時,即可判定為雞霍亂。如果僅見接種雞發(fā)病死亡,并在癥狀和病理解剖上也有雞新城疫的特征時,則可判定為雞新城疫。如果條件許可,在接種健康雞的同時也注射2~3只新城疫免疫雞。若免疫雞不死而未免疫的健康雞死亡時,就進一步確診為新城疫。若免疫雞和未免疫雞都死亡,又未檢出細菌,癥狀及剖檢又近似雞新城疫時,則可能是真性雞瘟。
2病毒分離和鑒定
2.1病毒分離
雞出現(xiàn)臨床癥狀后,在大多數(shù)器官和分泌物中即有多量病毒。呼吸道分泌物、肺、腦、脾都是很好的分離病毒的材料。如果死雞已腐敗,最好是從骨髓分離。分離病毒最好是接種孵化9~10天的雞胚。以無菌手術(shù)取病料,加生理鹽水作成10倍或20倍稀釋的懸浮液,靜置或離心后取上清液加適量抗生素抑菌(一般加青霉素300~500IU/mL和鏈霉素100~300μg/mL,在37℃放置1h,或在0~4℃冰箱放置4h),以上清液0.1mL接種于雞胚的尿囊腔內(nèi)。若為強毒株,2~3天內(nèi)即可殺死雞胚,若為弱毒株則需4~6天。應每天檢查雞胚1次,如有死亡即收集尿囊液,作細菌檢查,并進行血凝試驗及血凝抑制試驗。為盡快作出診斷,也可在雞胚死亡前用注射器吸出尿液做檢查,再將雞胚送到溫箱孵化,一般在接種后36h就可測出血凝素。
2.2血凝試驗
新城疫病毒具有凝集禽類及某些哺乳動物紅細胞的特性,并且對各種動物紅細胞的凝集性與真性雞瘟不同,因此可以用作初步判定的依據(jù)。此外,傳染性支氣管炎病毒和傳染性喉氣管炎病毒都不凝集雞紅細胞,因此也可作為鑒別診斷的方法。
2.3血凝抑制試驗
如果抗雞新城疫血清能抑制可疑病毒對紅細胞的凝集,則可判定此病毒為雞新城疫病毒。除此之外,還可利用雞新城疫病毒來鑒定病愈雞的血清中是否含有抑制紅細胞凝集的抗體,以決定該雞感染的是否為雞新城疫。如果可疑病雞的血清能抑制新城疫病毒對血紅細胞的凝集,即可判定該雞曾患雞新城疫。一般急性病雞在死亡前血液中還不出現(xiàn)抗體,病程延續(xù)到5~6天以上的,血液中即出現(xiàn)血凝抑制抗體,病程在10天以上,抗體的效價往往可達1:1280,甚至更高。因此用已知病毒測定可疑血清的方法,在流行病學調(diào)查方面更有實用意義。
2.4血清中和試驗
既可用已知抗血清鑒定可疑病毒,又可用病毒測定血清中是否含有特性抗體,以確定是否曾感染過雞新城疫。在雞新城疫免疫血清或待檢血清中,加入一定量的待檢病毒或已知病毒,混合后注射于發(fā)育雞胚或有易感性的雞,另以不加血清的病毒作對照。倘若注射血清及病毒混合材料的雞胚或雞不死亡,而對照雞只死亡,則可判定待檢病毒為新城疫病毒。也可用不同稀釋倍數(shù)的血清,各加一定量的病毒以測定血清的中和抗體量。
3鑒別診斷
3.1與雞霍亂的鑒別
在流行病學方面,雞霍亂的流行往往僅限于個別雞群或小范圍的地區(qū),雞新城疫往往波及全村全區(qū)。鴨一般不感染雞新城疫,但對雞霍亂極為易感。如果在同一牧場或同一地區(qū),同時有雞鴨大批死亡,則很可能是雞霍亂而不是雞新城疫。在癥狀方面,慢性雞新城疫常呈神經(jīng)癥狀,雞霍亂則沒有神經(jīng)癥狀,僅偶有表現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥狀的。雞霍亂的病程很短,常在3~5天內(nèi)死亡。在病理解剖方面,患雞霍亂死亡的雞,肝臟上常有灰黃色壞死點,心包膜內(nèi)常有大量纖維蛋白性滲出液,腸道沒有潰瘍。雞新城疫的肝臟沒有壞死點,心包膜內(nèi)的滲出液較少,腸黏膜上多有潰瘍。
3.2與傳染性喉氣管炎的鑒別
傳染性喉氣管炎的病原是一種濾過性病毒,傳染很快,發(fā)病率很高。主要癥狀是呼吸困難,咳嗽。與新城疫的主要區(qū)別是無下痢和神經(jīng)癥狀,病變僅限于喉部及氣管,呈出血性或白喉性的喉炎及氣管炎。死亡率一般為15%。
3.3與傳染性支氣管炎的鑒別
病原也是濾過性病毒,在許多方面和傳染性喉氣管炎相似。主要危害雛雞,成雞不死亡。沒有消化道病變和神經(jīng)癥狀以及死亡率低等特點,可與雞新城疫區(qū)別。
文章編號:2095-9737(2016)02-0095-01
中圖分類號:S858.31
文獻標識碼:A
作者簡介:侯建成(1965-),男,大專,獸醫(yī)師。
收稿日期:2015-11-12