唐振 禹正楊

Endostar對(duì)大鼠Walker-256移植瘤腘窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響

唐振 禹正楊

目的探討重組人血管內(nèi)皮抑制素(Endostar)在大鼠移植瘤腘窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的作用。方法取20只SD大鼠足底接種腫瘤,隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,各10只。取兩組大鼠腘窩淋巴結(jié)HE染色計(jì)算轉(zhuǎn)移率及微淋巴管密度(MLD)和微血管密度(MVD)。結(jié)果兩組大鼠腘窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率及MVD、MLD比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論Endostar對(duì)大鼠Walker-256移植瘤腘窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有抑制作用。

重組人血管內(nèi)皮抑制素；移植瘤；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；抑制

Endostar被廣泛應(yīng)用于抑制微血管生成［1］,但是在臨床上,還沒有真正找到用于抑制淋巴管生成的藥物。現(xiàn)將本院研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 取20只SD大鼠雙側(cè)足底接種Walker-256乳腺癌細(xì)胞株［2］(濃度為2×107個(gè)/ml),隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每組10只。

1.2 方法 實(shí)驗(yàn)組予持續(xù)腹腔注射Endostar (0.75mg/kg、0.03mg/ml,1次/d)4周［3］。用藥完1周取出兩組大鼠腘窩淋巴結(jié)。HE染色比較兩組大鼠腘窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率。取兩組大鼠雙側(cè)腘窩淋巴結(jié)分別進(jìn)行CD34、D2-40單標(biāo)免疫組織化學(xué)染色 (CD34單抗,濃度1∶150,D2-40單抗,濃度1∶100),按照Weidner［4］報(bào)導(dǎo)的方法進(jìn)行MLD和MVD計(jì)數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組大鼠腘窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率分別是60%、100%,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2 兩組大鼠MVD比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

2.3 兩組大鼠MLD比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表1 Endostar對(duì)大鼠Walker-256移植瘤腘窩淋巴結(jié)中MVD的影響比較(±s)

表1 Endostar對(duì)大鼠Walker-256移植瘤腘窩淋巴結(jié)中MVD的影響比較(±s)

注：與對(duì)照組比較,aP＜0.05

組別 只數(shù) 腘窩淋巴結(jié)組織中MVD實(shí)驗(yàn)組 10 19.65±2.10a對(duì)照組 10 12.33±2.10

表2 Endostar對(duì)大鼠Walker-256移植瘤腘窩淋巴結(jié)中MLD的影響比較(±s)

表2 Endostar對(duì)大鼠Walker-256移植瘤腘窩淋巴結(jié)中MLD的影響比較(±s)

注：與對(duì)照組比較,aP＜0.05

組別 只數(shù) 腘窩淋巴結(jié)組織中MLD實(shí)驗(yàn)組 10 10.45±2.76a對(duì)照組 10 12.39±2.20

3 討論

目前乳腺癌等惡性腫瘤是危害人類健康的重要疾病,臨床資料顯示,對(duì)于早期惡性腫瘤即便徹底根治或進(jìn)行淋巴結(jié)清掃,也有一部分會(huì)很快復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。此外,臨床上部分乳腺癌等惡性腫瘤的淋巴道跳躍轉(zhuǎn)移很早就有發(fā)生。惡性腫瘤細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移都需要微血管和微淋巴管大量生成,微血管與微淋巴管的生成是腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)。Endostar是目前具有最廣譜的內(nèi)源性血管生成抑制因子。Brideau等［5］發(fā)現(xiàn)高濃度內(nèi)皮抑素對(duì)淋巴管的生成起到抑制作用,主要是通過降低血管內(nèi)皮生長因子-C(VEGF-C)的水平來實(shí)現(xiàn)的。本實(shí)驗(yàn)采用的方法是對(duì)Walker-256細(xì)胞行足底皮下注射接種,并且對(duì)移植瘤進(jìn)行復(fù)制,構(gòu)建腘窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移模型。Endostar可以通過抑制微血管及微淋巴管生成抑制腘窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,它能有效的阻止癌細(xì)胞入侵淋巴結(jié)［6］。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)大鼠Walker-256足底移植瘤腘窩轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的微血管和微淋巴管進(jìn)行免疫組化染色,實(shí)驗(yàn)組MVD、MLD密度都明顯優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05),提示使用Endostar能顯著抑制淋巴結(jié)內(nèi)微血管與微淋巴管形成。

［1］姜秋紅,高惠君,姚樹人.腫瘤新生血管生成抑制劑的研究進(jìn)展.中國臨床藥學(xué)雜志,2009,18(3):66-68.

［2］陳浩,黃廣建,倪泉興,等.納米活性碳作為藥物載體在淋巴靶向治療中的作用.復(fù)旦學(xué)報(bào),2007,34(4):518-521.

［3］呂霞,肖莉,周啟明,等.重組人血管內(nèi)皮抑制素聯(lián)合化療治療晚期惡性腫瘤的臨床研究.實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2011,15(19):43-45.

［4］Weidner N.Tumor angiogenesis review of current applications in tumor prognostication.Semin Diagn Pathol,2011,10(2):302-313.

［6］歐娟娟,潘 鳳,吳 峰,等.重組人血管內(nèi)皮抑制素對(duì)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞骨架及淋巴管生成的影響.臨床腫瘤學(xué)雜志,2013,14(6): 491-495.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.10.217

2016-02-29］

421001 南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院(唐振)；南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院(禹正楊)