馬小蓉，李志源

(廣西自治區(qū)柳州市動物疫病預防控制中心，廣西 柳州 545006)

牛血液樣品采集方法

馬小蓉，李志源

(廣西自治區(qū)柳州市動物疫病預防控制中心，廣西 柳州 545006)

在牛的檢疫檢驗工作中，常常要對牛采血檢測，以便了解牛的健康狀況，但牛的采血較困難，筆者總結了多年來對牛的采血檢測工作經驗，現(xiàn)介紹如下，供參考。

1 采樣工具

一次性塑料注射器(5～10 mL、8～9﹟針頭)、酒精棉球、碘酊、鑷子或鉗子、刮毛刀、膠布、塑料袋、冷藏箱、工作服或防護服、水鞋、結實的繩索、記錄本等。

2 牛的保定

2.1 奶牛的保定奶牛性情溫順，一般在牛舍隔位欄上保定即可。

2.2 農村散養(yǎng)牛的保定在固定柱或者2顆距離適中的較大樹之間，由主人和隨同人員協(xié)助保定。

3 采血

3.1 奶牛助手固定奶牛頭部，采血者在奶牛頸部側面中部靜脈血管處刮毛，消毒后，采頸靜脈血液5 mL左右。

3.2農村散養(yǎng)牛助手提起牛尾，與水平線呈45°角左右。采血者左手觸摸牛采血部位，找到尾靜脈，右手對采血部位消毒后，用一次性10 mL注射器由下斜上平行牛腹側中心線位置刺入約0.5 cm深，見有回血即可抽血，采集需要血量后，用酒精棉球壓住針孔即可拔出采血針，止血時間要足夠，以拿下藥棉不出血為準。

4 編號和記錄

采集的血液樣品在注射器上做好編號，每份血樣在記錄本上作好記錄，寫明血樣來源、畜主、采樣人等。

5 血液分離與分裝

5.1 血清量的要求保證每份分裝血清量為2.5 mL左右。

5.2 樣品分裝說明對于常規(guī)疫病檢測或免疫抗體檢測，每份血清分成2份，1份檢測樣，1份備檢樣，同一個體的血清樣品貼上同一編號，若是多份樣品送檢，則把檢測樣品封裝在一起，備份樣品封裝在一起，附上相關文字說明，送疫病診斷檢測機構。對動物產品質量安全方面的相關項目進行檢測，每份血清分成3份，1份檢測樣，1份備份樣，1份自留樣，同一個體的血清樣品貼上同一編號，若是多份樣品送檢，則把檢測樣品封裝在一起，備份樣品封裝在一起，自留樣品封裝在一起，并貼上封條，附上相關文字說明送檢驗檢測機構。

6 樣品送檢要求

6.1 血清易受污染變質，送前務必冷藏(放置時間短的)或冷凍(放置時間長的)。

6.2 每份樣品務必密封，不得有液體溢漏。

6.3 送檢單要有必要的文字說明，檢測疫病的要說明動物的發(fā)病過程、臨床癥狀、免疫程序、治療過程、送檢目的等;動物產品安全檢測的要說明需要檢測的項目，如檢測重金屬或獸藥殘留等。

7 小結

7.1 采血目的要明確，對采血動物的年齡大小、體重要有比較準確的了解，如果是實驗室檢測人員去采血則需要明確監(jiān)測的項目有哪些，以確定采血的容量。

7.2 做好保定，確保采血順利。牛的保定需要助手協(xié)助，保定時要把牛放在平穩(wěn)的平面上，動作要輕緩，盡量減輕應激，待牛安靜時采樣。奶牛性情溫和，保定好后需要助手固定好頭部，不讓奶牛甩頭，便于頸靜脈采血。農村散養(yǎng)牛容易受到驚嚇，難保定，危險性大，一般采取牛尾部采血，因牛尾神經相對遲鈍，疼痛輕，保定省力，將牛拴在固定牢固的樁子上即可采血。牛尾靜脈與尾中動脈的解剖部位在尾腹側中線處并行，淺部位的為尾靜脈，深部的為尾中動脈。進行牛尾采血的具體部位為離尾根15 cm左右，第4、5尾椎骨交界中點凹陷處。靜脈血顏色暗、量少，靜脈血管感覺不到搏動;動脈血顏色鮮紅、量多，動脈血管感覺到搏動，采血時注意分辨。進針時要掌握好方向、角度、深度，當出血不流暢時要調節(jié)進針深度。牛尾部采血操作簡便易學，采血人員容易掌握，值得在基層防疫工作中推廣。

7.3 牛尾根采血法比頸靜脈采血容易止血，采血后，若不能及時止血，可用膠布把消毒棉壓在抽血針孔位置包扎止血。

7.4 采血后，若有足夠的時間就把針筒預留一定的空間斜放，以利于血清充分析出(適當的陽光照射可以加速血清析出，但炙熱的陽光暴曬會使紅細胞破裂。注意陽光強度和時間把握，要時時觀察血清析出情況);若無時間，則針筒不留空隙(以避免運輸過程中過度震蕩使紅細胞破裂)，送到檢測室冷藏后，第2天分離血清。若血清中混有紅細胞，則以2 000 r/min，離心10 min，再分離血清。

7.5 做好消毒衛(wèi)生。采血前要清理牛舍糞便、尿液，保持圈舍、牛體干凈衛(wèi)生，以免污染采血部位和血樣;采血部位要用碘酊、酒精消毒，防止感染。

7.6 注意人身安全衛(wèi)生。在進行尾部采血時，采血者要上身前傾，腿后移，以防被牛踢傷;要穿工作服、高筒水鞋，防止牛糞飛濺身上。

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