沈心怡，刁苗璐，方妤露，張夢婷，陳　濤，朱長俊

(嘉興學院生物與化學工程學院，浙江　嘉興　314001)

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樺褐孔菌(Inonotusobliquus)生物活性研究進展*

沈心怡，刁苗璐，方妤露，張夢婷，陳濤，朱長俊

(嘉興學院生物與化學工程學院，浙江嘉興314001)

樺褐孔菌是一種名貴的食用藥用型真菌，近年來國內(nèi)外的研究人員對樺褐孔菌的分離提取技術(shù)及其藥用功效等生物活性研究越來越重視。本文綜述了多年來對樺褐孔菌在抗腫瘤、抗氧化、降血糖、抗病毒、抗菌等生物活性方面的功能特性的研究進展，同時由于樺褐孔菌來源的稀缺及其在食品和保健方面的開發(fā)利用尚未完全，因此對其以后的研究和產(chǎn)品開發(fā)作了展望。

樺褐孔菌；生物活性；抗腫瘤；抗氧化；降血糖；抗病毒；抗菌

16世紀至今，東歐、波蘭等一些國家的民間一直用樺褐孔菌(Inonotus obliquus)的菌核來防治癌癥、心臟病、肝病等。現(xiàn)階段，對該菌的系統(tǒng)研究引起了許多國家一些學者的重視。本文綜述了近年來樺褐孔菌的生物活性研究領(lǐng)域，顯示該菌巨大的藥用價值。

1　生物活性研究

1.1抗腫瘤

研究者通過實驗探究樺褐孔菌對腫瘤的作用機制，表明其對不同類型的腫瘤都有明顯的抑制效果。李根培等[1]通過體內(nèi)抗腫瘤實驗對乙醇提取物的抗腫瘤作用及機制進行了研究：對小鼠S180肉瘤具有較強的抑制作用，大、中、小劑量組的腫瘤抑制率分別為66.36%、74.84%、41.66%。王文娟等[2]用樺褐孔菌水提醇沉物，石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物及萃取后的水層物的不同濃度處理HePG2及SMMC7721細胞后，采用MTT法檢測細胞生長的抑制率。結(jié)果顯示水提醇沉物對人肝癌上述細胞的增殖抑制作用優(yōu)于石油醚萃取物，并顯著優(yōu)于其他3種萃取物。趙麗薇等[3]研究樺褐孔菌單體(Inotodiol)對宮頸癌HeLa細胞增殖的影響，采用MTT法檢測Inotodiol對HeLa細胞的增殖抑制率，結(jié)果表明Inotodiol對該細胞有明顯的抑制增殖和誘導凋亡作用。

此外，白楊等[4]選用人卵巢癌SKOV3細胞株進行體外培養(yǎng)，得到不同濃度的樺褐孔菌醇組對SKOV3細胞株有抗增殖作用和誘導凋亡作用，并表現(xiàn)出濃度依耐性。同一時期，鐘秀宏等[5]探討樺褐孔菌醇對SKOV3細胞周期的影響及其可能機制：樺褐孔菌醇通過下調(diào)CyclinE和上調(diào)細胞周期負調(diào)控因子P27的表達，導致G1期發(fā)生阻滯，從而抑制細胞增殖及誘導細胞凋亡。崔濤等[6]用不同濃度Inotodiol與胃癌BGC-823細胞共同培養(yǎng)48 h，經(jīng)過相應(yīng)的檢測，得到Inotodiol可能通過減少生成細胞周期蛋白以及上調(diào)細胞周期負調(diào)控因子表達，導致發(fā)生S期阻滯，抑制細胞增殖及誘導細胞凋亡的結(jié)論。陳義勇等[7]采用MTT法檢測樺褐孔菌多糖對Jurkat和Daudi細胞增殖的影響，結(jié)果為在體外樺褐孔菌多糖可以直接殺死Jurkat和Daudi腫瘤細胞。通過建立Jurkat荷瘤裸鼠模型，研究給藥后對荷瘤裸鼠的抗腫瘤作用發(fā)現(xiàn)樺褐孔菌多糖具有體內(nèi)抗腫瘤活性，而且可以提高裸鼠的脾臟指數(shù)，因此表明樺褐孔菌多糖具有顯著的抗腫瘤活性和增強免疫功能。

1.2抗氧化

抗氧化活性主要表現(xiàn)為對自由基的清除作用及其效果強弱。梁麗雅等[8]探究樺褐孔菌醇提物的萃取分離及其抗氧化活性：在4個不同的模型中，樺褐孔菌抗氧化粗提物和不同極性萃取物都呈現(xiàn)出了較好的抗氧化活性，尤其為乙酸乙酯相的抗氧化活性最強。樺褐孔菌中的抗氧化活性物質(zhì)主要集中于乙酸乙酯相中，并且其抗氧化活性與已知的抗氧化物質(zhì)多酚類和黃酮類物質(zhì)含量具有較好的相關(guān)性。研究結(jié)果可為樺褐孔菌抗氧化活性成分的進一步分離和結(jié)構(gòu)鑒定及粗提物在保健藥品和功能性食品中的應(yīng)用奠定一定的基礎(chǔ)。

樺褐孔菌多酚具有較強的抗氧化能力，其對羥自由基和超氧自由基有很強的清除作用。濃度為0.2%時，清除率分別為69.58%、82.01%[9]。樺褐孔菌多酚對花生油、大豆油和豬油均具有一定的抗氧化作用，不但在油脂氧化初期有較好的抗氧化效果，對氧自由基有很好的清除作用，而且在油脂氧化的加速時期對氧自由基仍有較強的清除作用，油脂的氧化速度顯著降低，其貨架期明顯延長，其中以花生油和豬油的貨架期延長最多[10]。因此，樺褐孔菌多酚可作為一種理想的天然抗氧化劑。樺褐孔菌多酚的抗氧化活性受不同因素的影響，高愿軍等[11]通過實驗得到樺褐孔菌多酚對羥自由基的清除較對超氧自由基的清除穩(wěn)定性更強。樺褐孔菌多糖也有抗氧化活性，吳艷玲等[12]研究樺褐孔菌多糖對小鼠抗氧化清除自由基作用，顯示多糖具有良好的清除自由基能力，且隨著濃度增加自由基清除率逐漸增高，一定濃度后清除率基本不變。結(jié)果表明多糖能顯著降低小鼠運動后MDA、CK、BUN和LDH含量，升高SOD，提高運動耐力，具有良好的抗疲勞作用。

通過灌胃(小鼠)方式注入樺褐孔菌抗氧化提取物，處理6周后顯示顯著降低了血清及肝、腦組織MDA含量，提高了血清、肝、腦組織SOD和GSH-Px酶活性以及總抗氧化能力(TAOC)[13]。這為樺褐孔菌資源及保健品的開發(fā)提供了重要的理論基礎(chǔ)。盧雪明等[14]通過檢測各提取物對α-葡萄糖苷酶的抑制能力，發(fā)現(xiàn)黃酮和多酚類化合物含量較多的正丁醇和乙酸乙酯提取物的總還原力、清除DPPH自由基、抑制肝脂質(zhì)過氧化以及抑制α-葡萄糖苷酶的活性均比其他提取物好。因此，樺褐孔菌抗氧化和降血糖作用的大小與其所含黃酮和多酚類化合物的量密切相關(guān)。

1.3抗菌

樺褐孔菌提取物抗菌方面的研究也是目前國內(nèi)外探究熱點方向之一。胡洋等[16]采用醇提法獲得樺褐孔菌乙醇提取物，當提取物濃度高于3.125 mg/mL時，對稻瘟病菌孢子萌發(fā)的抑制率在90%以上，稻瘟病菌菌絲的形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生了較大的變化；小麥根腐平臍孺孢和番茄灰霉灰葡萄球菌實驗出現(xiàn)明顯抑制圈。路源等[17]采用不同濃度的樺褐孔菌多糖保鮮液對蘋果進行涂膜處理，5 ℃低溫下貯藏，結(jié)果表明：2%～6%樺褐孔菌多糖保鮮液對蘋果有良好的保鮮效果，能夠降低蘋果的失重率、腐爛率和呼吸強度，保持其硬度，抑制PPO活性和微生物生長繁殖。樺褐孔菌菌核提取物對某些G-菌和G+菌的感染均有較好的抑制作用[15]。因此，抑菌藥物的開發(fā)是非常有意義的。

1.4降血糖

樺褐孔菌提取物對STZ誘導的糖尿病大鼠的胰島、肝和腎組織損傷病變有一定的保護和修復作用[18]。對STZ誘導的糖尿病大鼠具有降血糖、調(diào)脂、抗氧化應(yīng)激、清除自由基以及改善受損肝功能的作用，其作用機制可能與其所含多糖的降血糖作用和單寧酸的抗氧化清除自由基作用有關(guān)[19]。樺褐孔菌和松口蘑發(fā)酵菌粉對糖尿病小鼠具有一定降血糖作用,且與松口蘑相比,樺褐孔菌低劑量組(500 mg/kg)和樺褐孔菌高劑量組(1000 mg/kg)的降糖效果較為明顯(P<0.01)，降血糖率為30.23%、31.7%[20]。

李天洙等[21]通過實驗得到糖尿病豚鼠TC、TG、LDL水平明顯降低，認為這種結(jié)果可能是由于樺褐孔菌通過影響PKB的表達，介導胰島素傳導通路，體內(nèi)激素水平發(fā)生改變，進而通過影響HMG CoA還原酶等一些相關(guān)酶的表達，使得糖尿病豚鼠脂類代謝紊亂得到治療。呂金玲等[23]采用四氧嘧啶誘發(fā)糖尿病小鼠模型進行藥效試驗考察，發(fā)現(xiàn)了可用于考察藥物的降血糖作用，對樺褐孔菌的不同部位進行了實驗，結(jié)果表明樺褐孔菌降血糖的有效部位為其多糖。高愿軍等[22]以STZ誘導糖尿病小鼠為實驗對象，研究了空腹血糖、空腹胰島素、肝糖原、糖化血清蛋白、血乳酸等各個能反映糖尿病的指標，表明一定量的樺褐孔菌多糖口服液能修復胰島素β細胞，促進胰島素分泌，促進肝糖原的合成，降低血乳酸含量，能有效降低糖尿病小鼠血糖。

1.5抗病毒

樺褐孔菌可抑制HIV-1的繁殖，Ichimura等研究發(fā)現(xiàn)，樺褐孔菌水提取物可抑制HIV-1蛋白酶，其中一種活性成分為水溶性的高分子量木質(zhì)素衍生物[24]。樺褐孔菌多糖具備預(yù)防治療作用且安全性很高[25]。實驗設(shè)立2組，分別為預(yù)防組和治療組。預(yù)防組的目的是觀察藥物能否進入到細胞中，起到抗病毒的作用，因此實驗過程中先加多糖再加病毒，結(jié)果證明其多糖具有良好的預(yù)防治療作用。治療組的目的是觀察藥物能否對已進入胞內(nèi)的病毒起作用，從而抑制其生物合成，所以實驗中先加入病毒后加入多糖，結(jié)果證明樺褐孔菌多糖對NDV的治療作用偏低，其最小有效濃度為125 μg/mL，TI=2。這可能由于多糖直接抗病毒的能力和對細胞的吸附能力都較病毒弱，以及無組織細胞修復作用有關(guān)。

有學者通過實驗從樺褐孔菌子實體乙酸乙酯相中分離出了 10個已知化合物單體，對其進行了細胞毒性和抗HSV-1病毒活性研究，其中3-羥基羊毛甾-8,24-二烯-21-醛的抗HSV-1病毒活性最強。對樺褐孔菌抗病毒活性成分進行分離提取、結(jié)構(gòu)分析和活性鑒定，為全面了解樺褐孔菌抑制皰疹病毒的機理提供更加完善、更加科學的依據(jù)[26]。

2　展　望

現(xiàn)階段，由于樺褐孔菌人工馴化栽培尚未完全實現(xiàn)，野生的品種更加珍貴，具有良好藥用價值的樺褐孔菌稀缺，所以價格十分昂貴。為此需要加強對樺褐孔菌現(xiàn)有資源分布情況、生長特性、種子、種苗人工繁育和野生撫育的方法研究。因此，對樺褐孔菌還需要進行更全面深入的系統(tǒng)研究、開發(fā)和利用。國內(nèi)雖然對其有效成分的藥理作用、臨床應(yīng)用等方面進行了一些研究，但依舊存在很多不足。隨著人們的社會保健意識逐漸增強，在食品方面的要求也愈來愈高，樺褐孔菌作為一種天然的食用藥用真菌將會備受青睞，而其本身具有的特點決定了其在市場的價值。但是我國食品工業(yè)中樺褐孔菌的研究和應(yīng)用幾乎沒有涉及，而且分離其有效成分的技術(shù)還有待加強。在國外，研究人員已經(jīng)申請了關(guān)于樺褐孔菌的多項專利，尤其在食品方面。因此，樺褐孔菌不僅可以作為一些食品的主要成分，而且可以起到防腐作用，在保健及藥用功能方面也將會有更多的涉及。所以，樺褐孔菌的研究及其產(chǎn)品開發(fā)具有良好的發(fā)展前景。

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Research Progress on Biological Activity of Inonotusobliquus*

SHENXin-yi,DIAOMiao-lu,FANGYu-lu,ZHANGMeng-ting,CHENTao,ZHUChang-jun

(College of Biological and Chemical Engineering, Jiaxing University, Zhejiang Jiaxing 314001, China)

Inonotus is a rare medicinal fungus edible. In recent years, the biological activity of domestic and foreign researchers on inonotus of separation and extraction technology and its medicinal properties get more and more attention. The research progress of inonotus biological activity of anti-tumor, antioxidant, hypoglycemic, antiviral, antibacterial and other functional properties over the years was reviewed, and because inonotus source scarcity and exploitation in the food and health had not been fully developed, therefore its future research and product development were also discussed.

inonotus; biological activity; anti-tumor; anti-oxidation; hypoglycemic; antiviral; antibacterial

2016年度浙江省大學生科技創(chuàng)新活動計劃暨新苗人才計劃項目《樺褐孔菌降血糖活性成分研究》；2015年嘉興學院大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目(編號:851715060)。

沈心怡(1995-)，女，生物工程專業(yè)學生。

Q935

A

1001-9677(2016)010-0018-03