劉迪依，何煜楠，俞超英，胡雅楠，洪越月，金純純，白亞萍（.紹興文理學(xué)院，浙江紹興3000；.浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠，浙江新昌3500）

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苦參生物堿的提取、分離和鑒定教學(xué)實(shí)驗(yàn)的改進(jìn)

劉迪依1，何煜楠1，俞超英2，胡雅楠1，洪越月1，金純純1，白亞萍1
（1.紹興文理學(xué)院，浙江紹興312000；2.浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠，浙江新昌312500）

摘要：通過對(duì)原有教學(xué)實(shí)驗(yàn)中對(duì)苦參堿進(jìn)行索式提取的溶劑以及蒸餾方式的改進(jìn)提高苦參堿的提取產(chǎn)量。

關(guān)鍵詞：苦參；生物堿；提取工藝；純化技術(shù)；改進(jìn)

苦參生物堿是苦參的主要生理活性物質(zhì)[1]，它能溶于水、苯、氯仿、醇類[2]，具有利尿、抗病原微生物、抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等藥理作用[3-5]。目前常見的苦參堿制備方法有[6-10]：①溶劑提取法，即利用水、酸及乙醇等作為提取溶媒，用浸漬、滲漉、煎煮、回流等方法對(duì)苦參堿進(jìn)行提取；②離子交換法，即利用離子交換樹脂柱，使生物堿離子交換在樹脂上，使非生物堿化合物流出柱外，最后再用氨水等將生物堿由樹脂上置換下來的方法；③其它如樹脂吸附法和超臨界流體萃取技術(shù)等。

由于苦參堿的提取技術(shù)涉及到幾種重要的天然藥物的提取、分離方法，本校多年來即采用其作為主要的教學(xué)實(shí)驗(yàn)。但原有方法存在很多不足之處，需要改進(jìn)。

1　原教學(xué)實(shí)驗(yàn)方法

1.1提取

取1.3mL鹽酸加入約400mL水，配制成0.1％左右濃度的稀鹽酸，取50g苦參片泡入其中，并在20℃～25℃室溫浸泡半天以上，測(cè)pH值接近中性。

1.2樹脂交換

已經(jīng)預(yù)處理（酸泡過）的陽離子交換樹脂60g，裝入柱子中，去離子水洗到接近中性，慢慢加入提取液，控制流速為每秒2～4滴，滴完后，去離子水洗到接近中性。

1.3索式提取

取出樹脂，傾倒去水，抽干，加2～3mL氨水拌勻后放置10～20min以強(qiáng)化中和反應(yīng)，晾干，裝入索式提取器紙袋中，開始用氯仿提取，虹吸三次后結(jié)束。

1.4濃縮、薄層分析

上述提取液冷卻后，快速改為蒸餾裝置，蒸出溶劑至只剩余少量溶劑。使用展開劑：氯仿∶甲醇∶氨水=15∶4∶0.5進(jìn)行薄層分析，顯色劑為改良碘化鉍鉀水溶液。

2　對(duì)原實(shí)驗(yàn)方案的分析

總體說來，原教學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容豐富，安排比較合理，。但存在的主要缺點(diǎn)是：制備得到的產(chǎn)物過少，一般蒸干后只有不到0.1g粗品；另外，使用了有毒溶劑氯仿。針對(duì)以上缺點(diǎn)，我們仔細(xì)考查了實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)，進(jìn)行了改進(jìn)。

3　改進(jìn)后的實(shí)驗(yàn)方法

苦參堿提取、樹脂交換等都與原實(shí)驗(yàn)相同，待交換結(jié)束，去離子水洗到中性后，將樹脂過濾抽干，包好放入索式提取器中，用3mL三乙胺和100mL左右的無水乙醇提取。提取結(jié)束后，冷卻，用減壓蒸餾裝置蒸干，薄層分析。

4　結(jié)果與討論

4.1改進(jìn)前后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比（表1）

4.2討論

（1）在提取時(shí)要嚴(yán)格控制鹽酸濃度、酸量等。酸過少，則提取不充分；酸過多，則多余的鹽酸對(duì)下一步交換不利，最好提取后水相接近中性，提取時(shí)間至少3～4h。原有實(shí)驗(yàn)方案在提取、交換時(shí)的操作基本正確，沒有明顯問題。

（2）原有方案在中和時(shí)使用氨水，可能是造成最終粗品收率低的主要原因，由于是靜態(tài)中和，氨水對(duì)樹脂的浸透、擴(kuò)散等都非常緩慢，而且氨水的濃度只有25％，更加限制了其擴(kuò)散及交換；而三乙胺濃度高，與水相及有機(jī)相皆可混溶，易于擴(kuò)散、中和，特別是其不需要單獨(dú)的堿中和過程，而是在乙醇提取時(shí)與乙醇一起汽化，更加有利于樹脂內(nèi)部的擴(kuò)散和中和，因此效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)好于氨水。

（3）原有方案提取劑采用氯仿有一定道理，氯仿對(duì)產(chǎn)物的溶解度很好，但缺點(diǎn)是氯仿毒性大，在工業(yè)生產(chǎn)中已很少使用，也不適合作為教學(xué)實(shí)驗(yàn)使用，因此，用無毒的乙醇替代氯仿是較大進(jìn)步，而且效果很好，實(shí)現(xiàn)了較高的收率。

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The Improvement on Teaching Experiment of the Extraction，Isolation and Identification of Matrine

LIU Di-yi1，HE Yu-nan1，YU Chao-ying2，HU Ya-nan1，HONG Yue-yue1，JIN Chun-chun1，BAI Ya-ping1
（1.Shaoxing University，Shaoxing 312000，China；2. Xinchang Pharmaceutical Factory，Zhejiang Medicine Co.，Ltd.，Xinchang312500，China）

Abstract:In this experiment，the extraction yield of Matrine was improved bythe method ofsolvent extraction and distillation in the original teachingexperiment.

Key words:Kuh- seng；Alkaloid；extraction process；purification technology；improvement

作者簡(jiǎn)介：劉迪依（1996-），女，本科在讀，藥學(xué)專業(yè)，17858503629，17858503629@163.com。

收稿日期：2015- 12- 14

中圖分類號(hào)：O622.4

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1008- 553X（2016）02- 0040- 02

doi：10.3969/j.issn.1008- 553X.2016.02.012