羥基紅花黃色素A對實驗性腦缺血的保護作用

●桂彩云

羥基紅花黃色素A對實驗性腦缺血的保護作用

●桂彩云

據(jù)科植物紅花的干燥花即為中藥紅花，具有活血化瘀的功效，屬于該功效的代表性藥物。紅花包含的化學成分較多，具有復雜性特點，其中黃酮類、色素、脂肪酸、揮發(fā)油以及多炔等化合物已得到實驗證實。有研究顯示，水溶性的黃色素集中了其還不嘔血化瘀的主要成分。本文通過動物實驗，對羥基紅花黃色素A對實驗性腦缺血的保護作用進行了探索。

羥基紅花黃色素A；實驗性腦缺血；保護作用

羥基紅花黃色素A（以下簡稱HSYA）、紅花明苷A、紅花明苷B和其他低含量成分是紅花黃色素的主要化學成分，其中HSYA的含量最高，而且活性較高。為了探討HSYA對實驗性腦缺血的保護作用，本文建立了大鼠腦動脈阻塞性腦缺血模型，對HSTA對大鼠的行為評分和缺血面積產(chǎn)生的影響進行了觀察研究，具體研究如下。

1 實驗材料

1.1 實驗藥品和試劑

注射用和HSYA凍干粉針（山東省天然藥物工程技術研究中心，20000525，10mg/支），使用生理鹽水配置特定濃度的溶液，血塞通注射液（徐州萊恩藥業(yè)有限公司，國藥準字Z32020421），主要藥理成分為三七總皂苷。

1.2 實驗動物

雄性Aistar大鼠，體重控制在（320±33）克左右。

2 實驗方法

2.1 模型建立和分組[1]

按照《藥理實驗方法學》中的規(guī)定和操作流程，對大鼠建立實驗性腦缺血模型。然后將實驗大鼠隨機分為A組（假手術組）、B組（生理鹽水組）、C組（1.5mg/kgHSYA組）、D組（3mg/kgHSYA組）、E組（6mg/kgHSYA組）、F組（0.2mg/kg尼莫地平組）和G組（36mg/kg血塞通組）等7個組別，每組10只大鼠。除A組外，其他6組在缺血0.5小時后，均采用對應藥物和劑量行靜脈給藥，給藥體積為1ml/kg。

2.2 行為評分和腦缺血面積檢測

在大鼠缺血1天后，參照《藥理實驗方法學》對其神經(jīng)功能行為進行評分，將其殺死后，取腦，然后采用TTC（紅四氮唑）染色法，檢測其腦缺血面積。具體操作為：將小腦、低位腦干和嗅球去掉后，用生理鹽水沖洗干凈，將其冠狀切成5片。將大腦前極和視覺交叉連線的中點、視交叉、漏斗柄和后極之間作為切片位置。

使用3.4毫升蒸餾水、0.1毫升1mmol/L磷酸氫二鉀和1.5毫升4%紅四氮唑配置成5毫升染液，在37℃的環(huán)境中，將腦片放置其中，染色0.5小時，每隔5分鐘翻動1次。染色后，正常組織呈紅色，梗死組織呈白色，照相備用，然后用病理圖像軟件對5個腦片的梗死面積/腦片總面積進行計算。

2.3 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS17.0軟件對本組研究數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料用%表示，進行x2檢驗，計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，進行t檢驗。當P＜0.05時，表示差異具有統(tǒng)計學意義。

3 實驗結果分析

3.1 HSYA對行為評分的影響

A～G7組大鼠的行為評分分別為0、10.15±0.95、9.26±1.24、7.19±0.61、5.78±1.12、4.83±1.47 和 7.54±0.86分。

和A組比較，B組大鼠經(jīng)生理鹽水給藥后，開始出現(xiàn)明顯的行為障礙。C組、D組和E組分別給與了不同劑量的HSYA，結果大鼠的行為評分明顯低于B組，差異均有意義（P＜0.05），提示劑量存在依賴性。D組大鼠的行為評分和G組相比，組間差異不具有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。同時，E組和F組的大鼠行為評分也無明顯差異（P＞0.05）。由此可知，不同劑量的HSYA靜脈給藥，對于改善腦缺血動物的行為障礙具有顯著作用。[2]

3.2 HSYA對腦缺血面積的影響

A～G 組的腦缺血面積分別為 1.6±0.2、31±10、29±14、12±7、4.7±3.0、4.87±2.7 和 18±9。

由病理圖像分析結果可知，在缺血1天后，大鼠的腦組織開始出現(xiàn)明顯的缺血區(qū)域，而且該部分面積超過了全腦面積的30%。在缺血0.5小時后，采用HSYA進行治療，結果發(fā)現(xiàn)，C組、D組和E組的缺血面積明顯小于B組，而且和給藥劑量具有密切聯(lián)系。D組和G組比較，大鼠腦缺血的面積差異較小，不存在統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。而且E組大鼠的腦缺血面積明顯小于G組（P＜0.05），但和F組無明顯差異（P＞0.05）。由此可知，HSYA對于抗腦缺血具有顯著作用。

4 小結

由本次實驗結果可知，在缺血1天后，大鼠的腦組織開始出現(xiàn)明顯的缺血區(qū)域，而且該部分面積超過了全腦面積的30%。使用尼莫地平可以顯著減輕腦缺血損傷，表示線法阻斷大鼠大腦中動脈所致局灶性腦缺血模型是成功的。于腦缺血0.5小時后，HSYA靜脈給藥對大鼠局灶性腦缺血性損傷有明顯的保護作用，而且6mg/kgHSYA給藥的作用和尼莫地平作用相當。由此可知，紅花有效單體成分HSYA在體內(nèi)和體外均顯示出具有抗腦缺血活性。[3]

（作者單位：解放軍第184醫(yī)院藥械科）

[1]姜華. 羥基紅花黃色素A對大鼠腦缺血-再灌注損傷的保護作用及機制[J]. 中藥材,2013,03（14）:462-464.

[2]劉永剛,李芳君,湯芳. 羥基紅花黃色素A對大鼠心肌細胞缺血再灌注損傷的保護作用[J]. 中藥藥理與臨床,2015,01（18）:71-74.

[3]徐露,董志. 注射用羥基紅花黃色素A對大鼠腦神經(jīng)元線粒體的保護作用研究[J]. 中國藥房,2012,23（10）:2127-2129.