趙蘭平， 薛淑芳， 陳彥靜， 王雪芳， 陳立鋒， 范玉宏， 張祥宇

(1. 河北北方學(xué)院生理教研室， 張家口 075000； 2. 中國中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所， 北京 100700； 3. 河北北方學(xué)院第一臨床醫(yī)學(xué)院， 張家口 075000)

缺血/再灌注時(shí)豚鼠左心室流出道自律組織電活動(dòng)的改變及藥物干預(yù)效應(yīng)*

趙蘭平1△， 薛淑芳1， 陳彥靜2， 王雪芳1， 陳立鋒1， 范玉宏3， 張祥宇1

(1. 河北北方學(xué)院生理教研室， 張家口 075000； 2. 中國中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所， 北京 100700； 3. 河北北方學(xué)院第一臨床醫(yī)學(xué)院， 張家口 075000)

目的：研究缺血/再灌注(I/R)時(shí)豚鼠離體左心室流出道自律組織電活動(dòng)的改變及其藥物干預(yù)效應(yīng)。方法：采用標(biāo)準(zhǔn)玻璃微電極細(xì)胞內(nèi)電位記錄技術(shù)，記錄豚鼠離體左心室流出道標(biāo)本的自發(fā)慢反應(yīng)電位，觀測(cè)模擬I/R時(shí)該電位的改變，以及臨床上常用的抗心律失常藥物灌流標(biāo)本時(shí)對(duì)I/R電生理效應(yīng)的干預(yù)作用。觀測(cè)指標(biāo)：4相自動(dòng)除極速度(VDD)、自發(fā)放電頻率(RPF)、最大舒張電位(MDP)、0相最大除極速度(Vmax)、動(dòng)作電位幅度(APA)、復(fù)極50%和90%時(shí)間(APD50和APD90)。結(jié)果：①與對(duì)照組相比，I 10 min組VDD和RPF明顯減慢(P<0.05)，Vmax加快(P<0.01)，APA增大(P<0.01)。與I 10 min組和對(duì)照組相比，R 2 min組VDD和RPF明顯加快(P<0.01)，且在R至5 min過程中可出現(xiàn)明顯節(jié)律不齊，MDP絕對(duì)值明顯增大(P<0.05)，Vmax與對(duì)照組相比明顯加快(P<0.05)，APA與I 10 min組相比明顯下降(P<0.05)，但仍顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，APD50和APD90顯著縮短(P<0.01)。R 15 min組自發(fā)慢反應(yīng)電位各項(xiàng)指標(biāo)逐漸恢復(fù)至對(duì)照組水平。②與I 10 min/R 2 min組相比，1 μmol/L利多卡因、10 μmol/L普羅帕酮、1 μmol/L胺碘酮、1 μmol/L維拉帕米、50 μmol/L腺苷和10 μmol/L硝普鈉均可明顯改善R過程中VDD和RPF的改變以及由此引起的節(jié)律不齊。結(jié)論：I/R可觸發(fā)左心室流出道自律組織電活動(dòng)異常，這種效應(yīng)在應(yīng)用不同的抗心律失常藥物灌流時(shí)可顯著恢復(fù)。

缺血/再灌注；左心室流出道；自律組織；藥物干預(yù)；豚鼠

缺血/再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)損傷是急性冠脈綜合征尤其是急性心肌梗死導(dǎo)致室性心動(dòng)過速和室性纖維顫動(dòng)，甚至再灌注后猝死的最主要原因。國外報(bào)道80%的特發(fā)性室性心動(dòng)過速(idopathic ventricular tachyarrhythmias，IVT)起源于右心室流出道，起源于左室流出道的IVT約占所有流出道室速的10%[1]。課題組前期的研究表明，心室流出道的特定部位存在慢反應(yīng)自律細(xì)胞，其電活動(dòng)可能同樣接受自主神經(jīng)的調(diào)控[2]，在心臟自律性電活動(dòng)異常時(shí)可作為另一潛在起搏點(diǎn)參與IVT的發(fā)生，從而提示急性心肌梗死時(shí)I/R損傷導(dǎo)致的心室流出道自律性電活動(dòng)異常可能參與再灌注心律失常的發(fā)生和發(fā)展。為進(jìn)一步探討心室流出道自律性電活動(dòng)在I/R損傷時(shí)的改變，本研究采用停灌/復(fù)灌方法[3，4]模擬I/R，觀察左心室流出道自發(fā)慢反應(yīng)動(dòng)作電位的改變，以及臨床一些常用的抗心律失常藥對(duì)上述電位改變的干預(yù)作用，為心肌梗死后再灌注心律失常的發(fā)病機(jī)制的研究提供直接的電生理實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本制備

健康豚鼠，250～350 g，擊昏后迅速開胸取出心臟，并用O2飽和的改良Locke液(mmol/L: NaCl 157，KCl 5.6，CaCl22.1，NaHCO31.8，葡萄糖5.6，pH 7.3～7.4)經(jīng)冠脈進(jìn)行灌注沖洗后，從主動(dòng)脈瓣的左瓣與后瓣間向下剪開心室，保留各瓣膜完整，并以此為寬度，向下切取約4 mm的前庭組織制成標(biāo)本。制好的標(biāo)本用不銹鋼針固定于灌流槽(1.5 cm×2 cm)內(nèi)的硅橡膠上。用O2飽和的改良Locke液進(jìn)行恒溫(35℃±1℃)、恒速(10 ml/min)灌流，標(biāo)本在灌流液中穩(wěn)定30 min后開始實(shí)驗(yàn)。

1.2 電位引導(dǎo)

采用常規(guī)玻璃微電極細(xì)胞內(nèi)電位記錄技術(shù)，引導(dǎo)心室流出道自律細(xì)胞的動(dòng)作電位。如能直接記錄到自發(fā)電位，則不再進(jìn)行刺激，若記錄不到，則將刺激電極置于標(biāo)本遠(yuǎn)離瓣膜一端的心肌組織上，給予波寬2 ms、1 Hz、兩倍閾強(qiáng)度的方波刺激，刺激時(shí)間由數(shù)秒至數(shù)分鐘不等，直至誘發(fā)出穩(wěn)定的自發(fā)節(jié)律，即停止電刺激開始實(shí)驗(yàn)。引導(dǎo)出的自發(fā)慢反應(yīng)電位，經(jīng)SWF-1B高阻抗微電極放大器放大，一路輸入監(jiān)聽器監(jiān)聽，另一路采用RM6280多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)，自動(dòng)顯示電信號(hào)，并分析自發(fā)慢反應(yīng)電位的各項(xiàng)參數(shù)指標(biāo)，即4相自動(dòng)除極速度(velocity of diastolic depolarization，VDD)、自發(fā)放電頻率(rate of pacemaker firing，RPF)、最大舒張電位(maximal diastolic potential，MDP)、0相最大除極速度(maximal rate of depolarization，Vmax)、動(dòng)作電位幅度(amplitude of action potential，APA)、復(fù)極50%和90%時(shí)間(50% and 90% of duration of action potential，APD50and APD90)。

1.3 實(shí)驗(yàn)過程和分組

待自發(fā)節(jié)律穩(wěn)定30 min后，開始采集一組正常的自發(fā)慢反應(yīng)電位做對(duì)照，然后進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)操作，實(shí)時(shí)記錄并分析自發(fā)慢反應(yīng)電位的變化。63只豚鼠隨機(jī)分成7組，每組9只。為保證藥效，各種藥液均在實(shí)驗(yàn)前1 h內(nèi)配制。實(shí)驗(yàn)分組如下：(1)I/R時(shí)豚鼠左心室流出道自發(fā)慢反應(yīng)電位的改變研究(n=9)：采集對(duì)照自發(fā)慢反應(yīng)電位，停灌10 min，然后以正常灌流液再灌模擬I/R，分別記錄對(duì)照組、停灌10 min組(I 10 min)、再灌2 min組(R 2 min)、和再灌15 min組(R 15 min)自發(fā)慢反應(yīng)電位的改變。(2)不同藥物對(duì)I/R時(shí)豚鼠左心室流出道自發(fā)慢反應(yīng)電位改變的影響研究(n=9)：采集對(duì)照自發(fā)慢反應(yīng)電位，停灌10 min模擬缺血，然后以正常灌流液再灌至2 min時(shí)，換用含有不同濃度的各種藥液再灌10 min，分別記錄對(duì)照組、停灌10 min/再灌2 min組(I 10 min/R 2 min)、1 μmol/L利多卡因(lidocaine)10 μmol/L普羅帕酮(propafenone)1 μmol/L胺碘酮(amiodarone)1 μmol/L維拉帕米(verapamil)50 μmol/L腺苷(adenosine)10 μmol/L硝普鈉(sodium nitroprusside，SNP)再灌10 min組自發(fā)慢反應(yīng)電位的改變。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 左心室流出道I/R過程中自發(fā)慢反應(yīng)電位的改變

與對(duì)照組相比，I 10 min組VDD和RPF明顯減慢(P<0.05)，MDP絕對(duì)值有所增大，但無顯著性差異，APA明顯增大(P<0.01)，Vmax明顯加快(P<0.01)，APD50和APD90輕度延長，但無顯著性差異。

與I 10 min組和對(duì)照組相比，R 2 min組VDD和RPF明顯加快(P<0.01)，MDP絕對(duì)值明顯增大(P<0.05)。Vmax與對(duì)照組相比明顯加快(P<0.05)，與I 10 min組相比有所減慢，但無顯著性差異。APA與I 10 min組相比明顯下降(P<0.05)，但仍顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。APD50和APD90與I 10 min組和對(duì)照組相比均顯著縮短(P<0.01)。

再灌至5 min的過程中，自發(fā)節(jié)律不穩(wěn)定，容易出現(xiàn)節(jié)律不齊，有二聯(lián)律、三聯(lián)律的出現(xiàn)，再灌至13 min時(shí)自發(fā)節(jié)律逐漸恢復(fù)穩(wěn)定。

與R 2 min組相比，R 15 min組VDD和RPF明顯減慢(P<0.05)，與對(duì)照組相比VDD仍明顯加快(P<0.05)，RPF基本恢復(fù)至對(duì)照組水平。與對(duì)照組相比，Vmax仍明顯加快(P<0.01)，MDP絕對(duì)值、APA、APD50和APD90基本恢復(fù)至對(duì)照組水平(圖1、表1)。

Fig. 1 Effects of I/R on the spontaneous action potentials of guinea-pig left ventricular outflow tract

Tab. 1 Effects of I/R on the spontaneous action potentials of guinea-pig left ventricular outflow tract(±s, n=9)

VDD: Velocity of diastolic depolarization; RPF: Rate of pacemaker firing; MDP: Maximal diastolic potential; Vmax: Maximal rate of depolarization; APA: Amplitude of action potential; APD50and APD90: 50% and 90% of duration of action potential; I： Ischemia; R: Reperfusion

*P<0.05,**P<0.01vscontrol；?#P<0.05,##P<0.01vsI 10 min;?△P<0.05,△△P<0.01vsR 2 min

2.2 不同藥物對(duì)I/R左心室流出道自發(fā)慢反應(yīng)電位改變的影響

1 μmol/L利多卡因、10 μmol/L普羅帕酮、1 μmol/L胺碘酮、1 μmol/L維拉帕米和50 μmol/L腺苷再灌10 min組均可使I 10 min/R 2 min時(shí)的VDD和RPF加快顯著減慢，與I 10 min/R 2 min組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。外源性NO供體SNP(10 μmol/L)再灌10 min組RPF明顯減慢，與I 10 min/R 2 min組相比有顯著差異(P<0.01)，但仍高于對(duì)照組水平，VDD與I 10 min/R 2 min組相比無明顯改變。與I 10 min/R 2 min組相比，MDP絕對(duì)值在利多卡因組、胺碘酮組、維拉帕米組均顯著減小(P<0.05)，SNP再灌組顯著增大(P<0.05)。APA在利多卡因組、胺碘酮組、維拉帕米組和腺苷組明顯減小(P<0.05)，SNP組顯著增大(P<0.01)。利多卡因、普羅帕酮、胺碘酮、維拉帕米、腺苷和SNP均可使I/R過程中APD50的縮短明顯恢復(fù)至接近對(duì)照組水平。與I 10 min/R 2 min組相比，APD90在普羅帕酮組、胺碘酮組、維拉帕米組和SNP組明顯延長(P<0.05)，其余各組無明顯改變。I/R過程中利多卡因再灌1 min之內(nèi)節(jié)律有所加快，但無顯著性差異，隨后自發(fā)節(jié)律逐漸減慢，灌流10 min時(shí)節(jié)律明顯減慢。I/R過程中，胺碘酮和SNP再灌，可明顯改善R造成的節(jié)律不齊，使自發(fā)節(jié)律較快恢復(fù)，并維持在相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)(圖2、表2)。

Fig. 2 Effects of different antiarrhythmic drugs on the spontaneous action potentials of guinea-pig left ventricular outflow tract under the conditions of I/R A: Effects of lidocaine(1 μmol/L) on I/R; B: Effects of propafenone(10 μmol/L) on I/R; C: Effects of amiodarone(1 μmol/L) on I/R; D: Effects of verapamil(1 μmol/L) on I/R; E: Effects of adenosine(50 μmol/L) on I/R; F: Effects of SNP (10 μmol/L) on I/R

Tab. 2 Effects of different antiarrhythmic drugs on the spontaneous action potentials of guinea-pig left ventricular outflow tract under the conditions of I/R(±s,n=9)

VDD(mV/s)RPF(beats/min)MDP(mV)Vmax(V/s)APA(mV)APD50(ms)APD90(ms)Control34．97±4．84138．53±11．72?45．37±2．238．06±1．0855．31±6．53139．20±10．85185．60±18．91I10min/R2min36．13±4．27?161．73±19．40??50．84±3．6311．14±1．15?60．20±4．76124．00±16．00?165．60±18．01?I/R+Lidocaine(1μmol/L)10min31．62±1．82#105．09±13．16##?42．19±3．337．90±1．39#46．75±3．47#141．60±9．67##177．60±24．74Control33．51±3．48133．89±8．93?50．78±3．758．16±1．3461．82±7．90147．80±16．08187．80±19．45I10min/R2min39．62±4．44?169．21±23．10??56．12±1．07?11．72±1．28?66．43±7．61129．96±19．25?161．30±17．97?I/R+Propafenone(10μmol/L)10min33．18±2．28#114．15±15．49#?50．98±2．6610．86±1．2761．51±3．01156．80±21．82#182．40±10．54#Control31．79±3．26145．32±16．67?53．64±5．848．67±1．4657．16±6．92143．20±10．55189．80±26．14I10min/R2min38．62±5．02?171．50±23．49???59．66±6．29?10．62±1．6862．55±5．91?130．80±13．00??178．40±18．04I/R+Amiodarone(1μmol/L)10min32．53±2．83#134．86±15．79##?53．02±4．879．06±1．35#55．59±5．60##146．40±11．20##196．00±23．08#Control33．19±4．00135．39±8．92?41．64±3．187．92±1．2049．22±1．35144．80±11．97193．60±20．53I10min/R2min35．96±3．74?179．52±10．76???53．60±6．40?9．46±1．09??58．15±6．60?132．00±11．31??180．00±21．32I/R+Verapamil(1μmol/L)10min32．47±3．52#137．80±8．77##?42．45±5．11#8．13±1．1651．18±3．94#144．20±8．73#196．40±20．54#Control33．34±5．87148．71±11．64?51．46±1．978．81±1．1659．04±8．18141．40±19．87188．00±20．34I10min/R2min35．89±5．85??180．38±8．61???56．89±1．01?10．25±1．3365．06±7．70?125．60±11．31?178．20±13．72I/R+Adenosine(50μmol/L)10min30．19±2．48#158．67±14．42#?55．54±3．299．00±0．7352．12±6．76#145．80±14．95#191．60±26．86Control32．72±3．45130．34±9．70?54．07±8．898．36±0．4860．10±5．18137．40±26．12175．00±17．20I10min/R2min43．22±11．70?163．75±7．54???59．01±10．11?10．10±1．38?63．27±11．41116．60±11．69?146．00±11．80?I/R+SNP(10μmol/L)10min34．97±4．67146．42±10．66##?61．24±11．04#10．34±1．3769．63±10．52#134．80±13．92#173．20±19．00#

*P<0.05,**P<0.01vscontrol;?#P<0.05,##P<0.01vsI 10 min/R 2 min

3 討論

心室流出道在發(fā)生上起源于心臟內(nèi)不同種類的細(xì)胞，也可由心臟外細(xì)胞移行而來[5]，因此決定了該部位組織細(xì)胞的動(dòng)作電位較復(fù)雜，具有電生理異質(zhì)性。左心室流出道自發(fā)慢反應(yīng)動(dòng)作電位的產(chǎn)生機(jī)制與竇房結(jié)起搏細(xì)胞類似，但節(jié)律較慢[2]。

缺血后再灌注?？蓪?dǎo)致心律失常。缺血誘導(dǎo)L-型鈣通道開放，大量Ca2+內(nèi)流，使缺血心室流出道自發(fā)慢反應(yīng)電位Vmax加快，APA增大。缺血過程中伴隨的能量合成障礙、缺氧、酸中毒等可激活A(yù)TP敏感性鉀電流(IKATP)，表現(xiàn)為外向電流增加，K+外流的進(jìn)行性衰減減慢，以及缺血對(duì)If的抑制作用，可導(dǎo)致VDD和RPF減慢。模擬缺血液灌流豚鼠心室肌細(xì)胞20 min，IK明顯減小[6]，可部分抵消KATP，故本實(shí)驗(yàn)?zāi)M缺血過程中APD50和APD90有所延長，但與對(duì)照組相比無顯著性差異。再灌注時(shí)的鈣超載使ICa-L受到抑制，L型鈣電流峰值電流密度明顯下降[7]，而導(dǎo)致再灌注時(shí)心室流出道自發(fā)慢反應(yīng)電位Vmax減慢，APA減小。I/R時(shí)的K+大量外流，可縮短該自發(fā)慢反應(yīng)動(dòng)作電位時(shí)程，表現(xiàn)為APD50和APD90顯著縮短，使有效不應(yīng)期(ERP)縮短而導(dǎo)致再灌注心律失常的發(fā)生。有文獻(xiàn)報(bào)道[8]，離體大鼠心臟再灌注后心律失常的發(fā)生率為100%，表現(xiàn)為室性心動(dòng)過速及室顫。

臨床上的抗心律失常藥主要作用于起搏細(xì)胞的離子流而發(fā)揮作用。利多卡因、普羅帕酮、腺苷均可抑制4期Na+內(nèi)流(If)[9]，利多卡因和腺苷還可促進(jìn)K+外流，其中腺苷可作用于細(xì)胞膜上的A1受體，通過Gi蛋白激活腺苷依賴性鉀通道(IK-Ado)，引起細(xì)胞膜過度極化，導(dǎo)致K+外流進(jìn)行性衰減減慢，胺碘酮可抑制ICa-T，使I/R過程中的心室流出道自律組織VDD和RPF減慢，自發(fā)節(jié)律減慢。本實(shí)驗(yàn)中，各種抗心律失常藥均可明顯抑制ICa-L，從而導(dǎo)致I/R過程中的Vmax減慢和APA減小。利多卡因和腺苷可促進(jìn)復(fù)極化過程中的K+外流，而導(dǎo)致心室流出道自發(fā)慢反應(yīng)電位的APD50和APD90縮短，胺碘酮可顯著抑制特異性延遲整流鉀電流，包括IKr和IKs，延長自發(fā)慢反應(yīng)電位的APD50和APD90以及ERP，有效終止各種微折返。普羅帕酮可阻斷IKr，使復(fù)極過程中的K+外流速度減慢，而導(dǎo)致APD50和APD90延長。維拉帕米具有顯著的抑制ICa-L作用，使再灌注過程中Ca2+內(nèi)流減少，APD50和APD90延長，并可減輕鈣超載而明顯減輕心肌缺血/再灌注損傷。另外，利多卡因還可通過增加Bcl-2表達(dá)，降低Caspase-3活性而減少再灌注損傷[10]。胺碘酮還可提高血清中超氧化物歧化酶和降低丙二醛水平，增加Bcl-2蛋白、減少Bax蛋白的表達(dá)，降低心肌細(xì)胞凋亡率減輕心肌缺血/再灌注損傷[11]。NO是參與心肌I/R病理生理過程中的重要?dú)怏w分子。在大鼠心臟缺血/再灌注早期，總NOS(tNOS)和內(nèi)皮型NOS(eNOS)活性降低，心肌NO含量明顯減少[12]，再灌注過程中補(bǔ)充不同濃度外源性NO供體SNP可顯著改善R造成的節(jié)律不齊，但若誘導(dǎo)型NOS(iNOS)活性升高，NO含量可升高[13]。

臨床上特發(fā)性左心室流出道室速發(fā)作時(shí)首選維拉帕米，部分可對(duì)腺苷和迷走神經(jīng)興奮劑敏感，特發(fā)性右心室流出道室速多數(shù)患者對(duì)傳統(tǒng)的抗心律失常藥物特別是β-受體阻斷劑有效。本研究表明各種抗心律失常藥可顯著改善再灌注時(shí)的心室流出道節(jié)律異常，其中胺碘酮和SNP再灌時(shí)可使心室流出道自發(fā)節(jié)律的異常較快恢復(fù)，且較穩(wěn)定。腺苷和利多卡因也可促使再灌注時(shí)的節(jié)律改變較快恢復(fù)，但持續(xù)時(shí)間相對(duì)較短，期望通過本研究對(duì)臨床上源于流出道的再灌注心律失常的治療提供指導(dǎo)。

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Electrophysiological effects of ischemia/reperfusion (I/R) on pacemaker cells in guinea-pig left ventricular outflow tract and the effects of antiarrhythmic drugs treatment

ZHAO Lan-ping1△, XUE Shu-fang1, CHEN Yan-jing2, WANG Xue-fang1, CHEN Li-feng1, FAN Yu-hong3, ZHANG Xiang-yu1

(1. Department of Physiology, Hebei North University, Zhangjiakou 075000; 2. Institute of Basic Theories, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700; 3. The First Clinical Medical College, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China)

Objective: To investigate the electrophysiological effects of ischemia/reperfusion (I/R) on the spontaneous slow response action potentials in guinea-pig left ventricular outflow tract and the effects of antiarrhythmic drugs on I/R． Methods: The action potentials of pacemaker cells in guinea-pig left ventricular outflow tract were recorded by conventional intracellular microelectrode technique． The influences of ischemia(I) 10 min, reperfusion(R) 2 min, and R 15 min on the spontaneous slow response potentials were investigated． The effects of lidocaine, propafenone, amiodarone, verapamil, adenosine, and sodium nitroprusside (SNP) on I/R were also studied. Electrophysiological parameters were examined: velocity of diastolic depolarization(VDD), rate of pacemaker firing(RPF), maximal diastolic potential(MDP), maximal rate of depolarization(Vmax), amplitude of action potential(APA), 50% and 90% of duration of action potential(APD50and APD90). Results: ①In I 10 min group, the values of VDD, RPF, Vmaxand APA were decreased markedly compared with control group (P<0.05,P<0.01)．In R 2 min group, VDD and RPF were increased significantly(P<0.01), MDP was increased notably(P<0.05), APD50and APD90were shortened significantly compared with I 10 min and control group. Vmaxwas increased markedlyvscontrol group(P<0.05). APA was decreased notablyvsI 10 min group (P<0.05), but was increased markedlyvscontrol group(P<0.05). In R 15 min group, the action potentials recovered gradually to the levels of control group. ② Compared with I 10 min/R 2 min group, 1 μmol/L lidocaine, 10 μmol/L propafenone, 1 μmol/L amiodarone, 1 μmol/L verapamil, 50 μmol/L adenosine, and 10 μmol/L SNP decreased VDD and RPF significantly. Conclusion: I/R injury can trigger abnormal spontaneous activities of guinea-pig left ventricular outflow tract. The electrophysiological effects of I/R injury on left ventricular outflow tract can be treated by antiarrhythmic drugs.

ischemia/reperfusion; left ventricular outflow tract; electrophysiological effect; drug treatment; guinea-pig

河北省衛(wèi)生廳重點(diǎn)科技研究計(jì)劃項(xiàng)目(20130038)；河北北方學(xué)院創(chuàng)新人才培育項(xiàng)目(CXRC1324)

2015-08-03

2016-05-18

Q463；R331.3

A

1000-6834(2016)05-466-05

10.13459/j.cnki.cjap.2016.05.021

△【通訊作者】Tel: 0313-4029313; E-mail: zhaolp2009@126.com