雍香宇
(蘇州大學實驗動物中心,江蘇蘇州 215021)
研究籠養(yǎng)下BMI對食蟹猴遺傳性的影響
雍香宇
(蘇州大學實驗動物中心,江蘇蘇州 215021)
運用調(diào)查法及數(shù)理統(tǒng)計法等研究方法對54只公猴進行身高體重的測量,進行特征分析,計算出BMI指數(shù)。利用基因提取的方法,測得多態(tài)性信息含量PIC。研究結果表明不同BMI指數(shù)的公猴在籠養(yǎng)的條件下對遺傳特性產(chǎn)生一定的影響??傊疚难芯棵鞒隽艘粭l野生猴實驗動物化的研究路線以及技術方案。對公猴的生理特性及后代的基因都有一定程度的影響,為以后管理方面提供了一定經(jīng)驗。
BMI;公猴;生理特性
實驗動物(Laboratory animals)中的動物選取可以來自野生動物,經(jīng)濟動物以及用來觀賞的動物,它們這些在人類的生命發(fā)展歷程當中承擔著無比巨大的作用,在我們?nèi)祟惖陌l(fā)展歷程中許許多多的發(fā)現(xiàn)都是靠這些實驗取得的,取得每一項巨大成果的背后,都有它們的努力。為提供高質量、足夠數(shù)量和種類的實驗動物來滿足生命科學和醫(yī)學的發(fā)展,并且減少野生動物的捕獲,野生動物實驗動物化成了必要現(xiàn)在被廣泛使用的實驗動物
隨即抽取檢疫房食蟹猴54只,進行編號,選取全是公猴,在工作人員的協(xié)助下,對選取的公猴進行坐高,體重測量,根據(jù)計算公式計算出BMI 指數(shù),并隨即選取不同BMI值得公猴進行多態(tài)信息含量測量。多測出幾組數(shù)據(jù),進行研究。統(tǒng)計學分析 采用EXCEL統(tǒng)計軟件,利用BMI 計算公式計算出結果,結果 BMI>=40的公猴數(shù)量為30只,BMI<=40的公猴數(shù)量為28只,從中隨即選取不同BMI值的公猴,進行EDTA的抗凝管中收集約1ml的血液,然后進行基因提取。
基因組微衛(wèi)星,又稱為簡單序列重復(SSR)或短串聯(lián)重復(STR)。一般是以1-6個堿基為核心序列,首尾相連組成的串聯(lián)重復序列。本研究利用微衛(wèi)星標記對“ 安徽實驗稱猴進行遺傳學研宄,包括遺傳多樣性分析、遺傳背景分析和遺傳監(jiān)測微衛(wèi)星位點的蹄選方法。
微衛(wèi)星位點的初步蹄選引物對基因組進行PCR擴增:模板DNA、正反向引物、lOxEasyTaq Buffer、2.5mMdNTPS、EasyTaqDNA Polymerase加經(jīng)高溫滅菌的去離子水共25ul,于94°C預變性5min,94°C變性30s,50-60°C復性30s,72'C延伸 Imin,30個循環(huán)后72°C延伸7min,最后降至4°C保溫。使用PCR儀(美國Bio-Rad伯樂S1000)設退火溫度梯度和DNA模板濃度梯度進行擴增,摸索各對引物的適宜退火溫度和模板DNA最佳用量。PCR產(chǎn)物經(jīng)加入核酸染料的1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測,在凝膠成像系統(tǒng)中觀察擴增效果,并拍照記錄。判斷各對引物是否能從安徽獼猴血液DNA擴增特異性片段,選擇擴增效果好的電泳成像。
從研究對象中隨即選取38只公猴,在EDTA的抗凝管中收集約1ml的血液,然后進行基因提取,我們從中選取10個位點,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10分析結果如下。
多態(tài)性信息含量LOUSNKHPIC 13742.7120.920.88 2384550.4680.45 33836100.1230.2 43644130.5640.62 5384590.5340.56 63649.5120.7640.76 73748.69100.6320.66 83547.8150.8430.87 9374550.7950.80 10383760.3650.40位點樣本數(shù)BMI等位基因數(shù)群體綜合度
根據(jù)以上結果我們可以看出食蟹猴的平均等位基因數(shù)為10.5,平均綜合度為0.632,平均多態(tài)性含量為0.653.通過以上方法測得的多態(tài)性信息含量基本上都是大于0.5的,就此我們可以知道,以上這些位點都是多態(tài)性高度較高。我們用微衛(wèi)星位點檢測到在國外一些國家的一些食蟹猴的群體雜合度的值大約為0.68和0.65,測得的我國海南地區(qū)的猴群群體雜合度平均值在0.75和0.695,它們比該地區(qū)的食蟹猴的群體雜合度較為高一點,所以我們該地區(qū)的食蟹猴的遺傳多樣性相對與其他地方來說稍微高一些,比較適合馴養(yǎng)成為基因一直性質比較好的,具有豐富的封閉群,這樣有助于避免系數(shù)上升過快。這樣的話,對我們以后的多樣性遺傳保持非常有利。
目前應用封閉群實驗動物進行試驗的結果重復性較差,主要因為遺傳性狀穩(wěn)定性較差,我們必須對影響其遺傳質量的因素進行控制。
對籠養(yǎng)食蟹猴進行遺傳學研究的目的是對其進行遺傳學控制,隨著封閉年限的增長稱食蟹猴體遺傳多樣性會降低盡管每年引進新種,由于種源來自于同一地區(qū),以這些種有可能和原有種是一個家系,所以近親交配不可避免,為配種過程中的基因丟失在宣配置時,對外形特征的偏好會導致種群基因庫中基因的丟失按- Hardy-Weinberg定律,非隨機配種和不完全配種使種群的遺傳基礎發(fā)生變化,是人工養(yǎng)殖的種群種性退化的重要原因,猴供應時導致的遺傳多樣性丟失由于遺傳背景信息不清晰,供種時非常混亂,極易將一個家系的后代全部供出。本文通過對野生食蟹猴和子一代普通級種群的遺傳結構分析結果顯示,BMI低于一定的值時,雜合度和多態(tài)性信息含量均有所降低,說明籠養(yǎng)狀態(tài)下BMI值得不同在一定程度上影響了食蟹猴的遺傳多樣性。
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