劉　瑛，王斌全，張克軍，李　偉，馮　彥，張　飛

(山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科，太原 030001)

ChinJAllergyClinImmunol，2016，10(4)：381- 384

真菌是自然界存在的微生物之一，據(jù)生物學(xué)家統(tǒng)計(jì)人類日常生活環(huán)境中存活約10萬(wàn)余種真菌，真菌成熟后其孢子與菌絲碎片主要由風(fēng)力傳播，特應(yīng)性體質(zhì)者反復(fù)吸入致敏真菌孢子可能誘發(fā)真菌過(guò)敏性鼻炎[1]。大部分致敏真菌孢子常年在空氣中存在，故調(diào)查其播散規(guī)律十分重要。20世紀(jì)90年代初太原市曾開(kāi)展真菌調(diào)查，但近20年來(lái)氣候發(fā)生變化，故本研究再次開(kāi)展太原市氣傳致敏真菌調(diào)查，為真菌過(guò)敏性鼻炎的防治提供依據(jù)。

材料和方法

真菌采集

曝片法：制備傘蓬式真菌取樣器[2]，采用重力沉降法每日定時(shí)曝片， 24 h回收并放置新片。參照真菌標(biāo)準(zhǔn)片及《中國(guó)氣傳真菌彩色圖譜》，顯微鏡(OLYMPUS CH-B145-T)下閱片。計(jì)數(shù)每日真菌孢子的數(shù)量，調(diào)查結(jié)束后總計(jì)全年的真菌種類及數(shù)量。具體操作步驟參照《變態(tài)反應(yīng)學(xué)技術(shù)》(第2版)。

曝皿法：采用滅菌沙保培養(yǎng)基于每月初放置空氣中暴露2～3 min，放置地點(diǎn)與曝片法相同，取回后室溫(23～25 ℃)下培養(yǎng)，定期觀察菌落生長(zhǎng)情況。當(dāng)相鄰菌落生長(zhǎng)即將融合，分離菌落并鑒定。具體操作步驟參照《變態(tài)反應(yīng)學(xué)技術(shù)》(第2版)。

真菌標(biāo)準(zhǔn)片制備

預(yù)先參加華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)院舉辦全國(guó)真菌調(diào)查培訓(xùn)班，在北京協(xié)和醫(yī)院?jiǎn)瘫平淌谟H授下現(xiàn)場(chǎng)制備常見(jiàn)的氣傳真菌標(biāo)準(zhǔn)片，以供真菌鑒定時(shí)參照。調(diào)查中未知菌屬(收集真菌結(jié)構(gòu)不清、圖譜上尚無(wú)記載等)，保留完整標(biāo)本，送至華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)院變態(tài)反應(yīng)科協(xié)助鑒定。調(diào)查中未知菌數(shù)量占全年真菌總數(shù)<5%為佳，>50%本次調(diào)查無(wú)意義。

氣象記錄

調(diào)取山西省氣象網(wǎng)站“太原市每日短期氣象學(xué)資料”，記錄各氣象要素(平均溫度、相對(duì)濕度、風(fēng)力、降雨量)。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

氣傳真菌數(shù)量與氣象數(shù)據(jù)相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析。

結(jié)　　果

太原市全年氣傳真菌調(diào)查結(jié)果

太原市2015年3月至2016年2月全年采用曝片法收集的氣傳真菌共14種屬，依次為平臍蠕孢屬、鏈格孢屬、內(nèi)臍蠕孢屬、棒孢屬、黑粉目、枝孢屬、尾孢屬、蛹孢蠣殼屬、細(xì)基格孢屬、彎孢屬、擬盤多毛孢屬、格孢腔菌屬、地舌菌屬、旋孢腔菌屬及其各菌絲碎片(表1)。曝皿法收集鑒定10種真菌，分別為鏈格孢霉、玉米黑粉霉、枝狀枝孢、匍枝根霉、米根霉、棕曲霉、黃曲霉、煙曲霉、新月彎孢屬、白地霉。

太原市氣傳真菌數(shù)量與氣象要素相關(guān)性分析

全年氣傳真菌數(shù)量結(jié)合山西氣象網(wǎng)站的氣象學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果顯示：夏季平均溫度、平均相對(duì)濕度、平均降水量較其他季度高，風(fēng)力2級(jí)及以上的天數(shù)占全年總天數(shù)較低，氣傳真菌數(shù)量較多。而冬季平均溫度低、相對(duì)濕度低，不利于真菌生長(zhǎng)，氣傳真菌數(shù)量越少。經(jīng)Pearson相關(guān)分析：風(fēng)力2級(jí)及以上的天數(shù)、平均溫度、平均相對(duì)濕度、平均降水量與全年氣傳真菌數(shù)量呈正相關(guān)(r=0.067、r=0.415、r=0.295、r=0.203)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表2、3)。

討　　論

真菌是常見(jiàn)的致敏原，迄今為止已有超過(guò)80屬真菌被證實(shí)可誘發(fā)呼吸道變態(tài)反應(yīng)疾病[3]。我國(guó)曾于20世紀(jì)70至80年代曾進(jìn)行真菌調(diào)查，近20年來(lái)隨著氣候與環(huán)境成分變化，需要更新全國(guó)氣傳真菌調(diào)查數(shù)據(jù)。武漢等[4]于20世紀(jì)90年代曾行太原市氣傳真菌調(diào)查，發(fā)現(xiàn)太原市在6月下旬到7月上旬氣傳真菌數(shù)量最高，之后數(shù)量稍回落，10月份又達(dá)數(shù)量高峰。本次研究中6月至10月太原市氣傳真菌數(shù)量最多，12月至次年2月氣傳真菌數(shù)量較少，說(shuō)明太原市氣傳真菌數(shù)量達(dá)高峰的時(shí)間較20年前的調(diào)查稍延長(zhǎng)，但季節(jié)消長(zhǎng)規(guī)律與武漢等調(diào)查基本相符。武漢等[4]曾報(bào)道太原市約12種氣傳真菌，共計(jì)數(shù)23 447個(gè)真菌孢子，本研究通過(guò)曝片法收集到太原市2015年3月至2016年2月氣傳真菌孢子種屬共14種，全年氣傳優(yōu)勢(shì)真菌為平臍蠕孢屬，其余氣傳優(yōu)勢(shì)真菌依次為：鏈格孢屬、內(nèi)臍蠕孢屬、棒孢屬、黑粉目、枝孢屬等。曝皿法收集氣傳真菌10種，共計(jì)數(shù)10 448個(gè)真菌孢子。本研究較前發(fā)現(xiàn)新的真菌種屬，擴(kuò)充太原市氣傳真菌的種類。

表1　太原市2015年3月至2016年2月曝片法氣傳真菌種類與計(jì)數(shù)Table 1　Collected count and type of airborne fungi with exposed plate method from March 2015 to February 2016 in Taiyuan

表2　太原市季節(jié)氣象學(xué)資料數(shù)據(jù)與氣傳真菌數(shù)量Table 2　Seasons meteorology data and numbers of airborne fungi in Taiyuan

表3　太原市全年氣傳真菌數(shù)量與氣象要素Pearson相關(guān)性分析Table 3　Correlation analysis of airborne fungi quantity one year and meteorology data in Taiyuan

真菌是自然界存在的微生物之一，其生長(zhǎng)過(guò)程中受到濕度、溫度、通風(fēng)等氣候條件的影響，成熟后其孢子與菌絲碎片主要由風(fēng)力傳播。太原市地處北半球中緯度及高原的地理環(huán)境，太陽(yáng)輻射強(qiáng)，受西風(fēng)環(huán)流的影響，夏秋季(6月至8月)氣溫高、濕度大、降水集中，7月下旬至8月上旬，降水平均為250～280 mm，占全年降水量的58%～65%，平均氣溫22～24 ℃。夏秋季濕熱多雨，利于真菌生長(zhǎng)，夏季常見(jiàn)西南風(fēng)向，利于真菌在市區(qū)飄散。而太原市冬季(12月至次年2月)寒冷干燥，多晴朗大風(fēng)天氣，平均氣溫-9～-5 ℃，降水量平均只有8～14 mm，占全年總降水量的2%～3%，常見(jiàn)西北風(fēng)向，且風(fēng)力2級(jí)以上，真菌生長(zhǎng)條件受到限制[5- 6]。本次調(diào)查結(jié)合山西省氣象網(wǎng)的數(shù)據(jù)，太原市氣傳真菌數(shù)量消長(zhǎng)受到溫度、相對(duì)濕度、風(fēng)力影響：其中平均溫度與全年氣傳真菌數(shù)量相關(guān)性相對(duì)較大(r=0.415)，其次為平均相對(duì)濕度、平均降水量、風(fēng)力2級(jí)及以上的天數(shù)(r=0.295、r=0.203、r=0.067)，說(shuō)明溫度、濕度是真菌數(shù)量增長(zhǎng)的重要?dú)庀笠蛩兀侍袣鈧髡婢鷶?shù)量高峰集中在夏秋季節(jié)(6月至10月)，而冬季(12月至次年2月)氣傳真菌數(shù)量較少。風(fēng)力對(duì)于真菌播散發(fā)揮重要作用，太原市冬季(12月至次年2月)風(fēng)力2級(jí)及以上的天數(shù)雖占全年總天數(shù)的17.29%±11.91%，但由于冬季真菌數(shù)量較其余三季少，故風(fēng)力2級(jí)及以上的天數(shù)與真菌數(shù)量相關(guān)性較小(r=0.067)。

氣傳真菌的分布具有一定地域性和季節(jié)性差異[7]，明確所在地區(qū)主要的致敏真菌種類及季節(jié)分布規(guī)律，為臨床真菌所致變應(yīng)性疾病診斷提供基礎(chǔ)理論依據(jù)，對(duì)真菌致敏性疾病防治具有重要指導(dǎo)意義。

[1]孫鶴齡.醫(yī)學(xué)真菌鑒定初編[M].北京:科學(xué)出版社,1987:313- 343.

[2]喬秉善.變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京：科學(xué)出版社,1996:129- 133,176- 180.

[3]Hormer WE,Helbling A, Salvaggio JE, et al. Fungal allergens[J].Clin Micribiol Rev,1995,8:161- 179.

[4]武漢,張世英,王保慶,等.太原地區(qū)氣傳致敏真菌的調(diào)查研究[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，1994,4:163- 164.

[5]葉世泰,喬秉善,路英述.中國(guó)致敏空氣真菌學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，1992: 35- 39.

[6]關(guān)凱,王良錄.真菌變態(tài)反應(yīng)研究進(jìn)展[J].中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志，2007,1: 83- 89.

[7]李志強(qiáng).武漢地區(qū)氣傳真菌調(diào)查[J].中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志，2009,3:269- 271.