板藍(lán)大青葉有效成分提取和精制工藝研究

李偉劍

（濟(jì)南市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心 山東濟(jì)南 250102）

板藍(lán)大青葉有效成分提取和精制工藝研究

李偉劍

（濟(jì)南市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心 山東濟(jì)南 250102）

目的：總結(jié)板藍(lán)大青葉有效成分提取和精制工藝。方法：分析板藍(lán)大青葉有效成分提取和精制工藝，總結(jié)最佳制備參數(shù)和方法。結(jié)果：乙醇滲漉工藝在60目藥材粒度、40ml/min的滲漉速度、75%的乙醇體積分?jǐn)?shù)下綜合得率為0.049%。殼聚糖除雜工藝較適合工業(yè)化生產(chǎn)。結(jié)論：在板藍(lán)大青葉有效成分提取和精制工藝方面，乙醇滲漉工藝和殼聚糖具有較好的效果，可深入研究應(yīng)用。

板藍(lán)大青葉 有效成分 提取和精制 工藝研究

1 藥物成分和藥理

1.1 板藍(lán)根藥物成分和藥理

板藍(lán)根是一種十字花科植物菘藍(lán)干燥根,廣泛分布于我國(guó)福建、浙江、廣西等地。性寒味苦,當(dāng)前主要應(yīng)用于清熱解毒、涼血利咽等。根據(jù)藥理學(xué)研究,具有抗菌、抗病毒、加強(qiáng)免疫等多種功效［1］。當(dāng)前探明的板藍(lán)根主要成分有靛苷、靛藍(lán)、靛玉紅、多糖和多種氨基酸、有機(jī)酸、黃酮類等成分。其主要藥理作用為抗腫瘤、清除氧自由基、加強(qiáng)人體免疫等。

1.2 大青葉藥物成分和藥理

大青葉是十字花科植物菘藍(lán)干燥劑,主要功效為清熱解毒、涼血化癍,對(duì)呼吸系統(tǒng)感染具有良好療效。經(jīng)檢測(cè)其主要成分為靛玉烷B、靛藍(lán)、靛玉紅、葡萄糖蕓苔素、腺苷、無機(jī)元素、棕櫚酸、色氨酸、色氨酮等。主要藥理作用為抗內(nèi)毒素、抗炎、解熱、抗病原微生物、增強(qiáng)免疫力等。

2 板藍(lán)大青葉有效成分提取和精制工藝

2.1 鑒別

半板藍(lán)根的鑒別主要從性狀及實(shí)驗(yàn)室分析入手。性狀包括直徑、長(zhǎng)度、顏色、紋理等。實(shí)驗(yàn)室鑒別可采集水煎液,在紫外光燈下觀看,取粉末0.5g,以20ml乙醇稀釋,與精氨基酸對(duì)照。采用薄層色譜分析法等進(jìn)行檢查,以《中國(guó)藥典》中板藍(lán)根標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)。大青葉同樣以薄層色譜分析法進(jìn)行分析,以中國(guó)藥典中大青葉標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)。

2.2 藥物提取工藝確定

根據(jù)相關(guān)測(cè)定,板藍(lán)根大青葉的主要成分在水提液中含量較低,在醇提液中含量增多,所以在提取中一般以一定濃度的乙醇溶液作為提取溶液。吸收溶媒量的程度影響著提取的效果,為提高藥材提取水平,應(yīng)先進(jìn)行吸乙醇率的測(cè)定。將60g板藍(lán)根和大青葉分為4份,加入10倍量的70%乙醇溶液,隔半小時(shí)觀察浸透情況,直至藥材全部被浸透。根據(jù)乙醇吸取率公式計(jì)算,藥材的吸乙醇率為237%左右,在滲漉浸潤(rùn)時(shí)可加2.4倍乙醇液。

測(cè)定乙醇體積對(duì)靛藍(lán)、靛玉紅回流條件提取物得率的影響,取15g的板藍(lán)根和大青葉共4份,加入至90%、75%、60%、45%的乙醇溶液300ml。進(jìn)行回流提取,過濾,將濾液減壓濃縮至無醇味,并以氯仿萃取至氯仿層透明?；厥章确略?0°C恒溫干燥箱中烘干,進(jìn)行測(cè)定。經(jīng)測(cè)定在乙醇體積分?jǐn)?shù)為75%時(shí)提取物的率最高；在回流時(shí)間上,同樣取板藍(lán)根、大青葉各15g共4份,加入300ml的75%乙醇溶液,回流時(shí)間分別設(shè)定為2h、4h、6h、8h,過濾減壓至無醇味,氯仿萃取至氯仿層透明。烘干測(cè)定,經(jīng)分析,在2～4h時(shí)提取率上升,4h達(dá)到峰值,然后逐漸下降,表明4h時(shí)靛藍(lán)、靛玉紅提取物得率最高；在提取工藝參數(shù)上,分別從藥材粒度、回時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)3方面以回流法從板藍(lán)根及大青葉中提取靛藍(lán)、靛玉紅進(jìn)行試驗(yàn)研究。藥材粒度選為40目、60目和80目?；亓鲿r(shí)間選為3h、4h和5h。乙醇體積分?jǐn)?shù)選為65%、75%和85%。以L9（34）試驗(yàn)研究提取靛藍(lán)、靛玉紅。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為藥材粒度英對(duì)藥材提取物得率影響最大,其次為乙醇體積分?jǐn)?shù),回流時(shí)間影響最小。所以可確定主要參數(shù)為：藥材粒度60目, 提取時(shí)間4h,乙醇體積分?jǐn)?shù)為75%。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果和分析,綜合得率為0.043%,以直接比色測(cè)定測(cè)得靛藍(lán)與靛玉紅的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為222.47g/g和203.58g/g。

同時(shí)以上述方法進(jìn)行乙醇滲漉工藝進(jìn)行測(cè)定,測(cè)得影響提取效果的主要因素為乙醇體積分?jǐn)?shù)、藥材粒度、滲漉速度［2］。測(cè)得靛藍(lán)、靛玉紅的最佳提取工藝參數(shù)為60目藥材粒度、40ml/min的滲漉速度、75%的乙醇體積分?jǐn)?shù)。在最佳工藝條件下的綜合得率為0.049%,靛藍(lán)與靛玉紅的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為253.49g/g和235.38g/g。

由此證明,滲漉法在提取物收率、靛藍(lán)、靛玉紅得率的三項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于回流法,同時(shí)在能量消耗上滲漉法也具有一定的優(yōu)異性。

3 板藍(lán)根大青葉提取液的除雜工藝

板藍(lán)根大青葉提取液除雜工藝主要有天然澄清劑吸附澄清精制和大孔吸附樹脂法兩種。天然澄清劑主要有殼聚糖、ZTC1+1天然澄清劑、果汁澄清劑。其中殼聚糖除雜最佳,殼聚糖是一種甲殼素經(jīng)強(qiáng)堿水解及酶解脫去一部分乙?；玫降囊环N線性高分子碳水化合物,為白色或淡黃色半透明狀固體。在殼聚糖溶解后,成高聚物溶液,有一定的粘度,濃度越高分子量越大,同時(shí)粘度也越大。殼聚糖在防止過程中對(duì)酸不穩(wěn)定,所以一般現(xiàn)用現(xiàn)配。影響殼聚糖除雜質(zhì)的主要影響因素為放置時(shí)間、殼聚糖加入量、藥物濃度。測(cè)定在10%殼聚糖用量、2h放置時(shí)間、0.4g/ml藥物濃度最佳。靛藍(lán)與靛玉紅的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為52.49g/g和49.78g/g。

大孔吸附樹脂法特點(diǎn)是吸附容量大、再生簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性佳。樹脂用量、藥液濃度、淋洗乙醇用量是影響大孔吸附樹脂法除雜的主要因素。在生藥樹脂比為1：2,藥液濃度為0.4g/ml,淋洗乙醇用量為200%時(shí)效果最佳,靛藍(lán)與靛玉紅的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為62.11g/g和、58. 18g/g。

4 小結(jié)

殼聚糖和大孔吸附樹脂是最佳的除雜材料,大孔吸附樹脂效果明顯優(yōu)于殼聚糖,但大孔吸附樹脂廚灶工藝消耗乙醇較多,在工業(yè)生產(chǎn)方面來說應(yīng)選殼聚糖。

［1］胡中英.大孔吸附樹脂在感冒退熱顆粒工藝改進(jìn)中的應(yīng)用［J］.重慶工商大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2012，05：92-95.

［2］孫星，盛華剛，張超，林桂濤.殼聚糖絮凝沉降法對(duì)葛根芩連湯中黃酮和生物堿類成分的影響［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，20：12-16.

R28

A

1674-2060（2016）03-0222-01

李偉劍（1993—），男，山東濟(jì)南人，研究方向：無機(jī)化學(xué)專業(yè)。