王蓮,肖繼椿,田垚,王嵐,張榮泉(天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所,天津300020)
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雙葉制劑生產(chǎn)工藝研究
王蓮,肖繼椿,田垚,王嵐,張榮泉*
(天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所,天津300020)
摘要:建立功能食品雙葉顆粒的生產(chǎn)工藝。以柿葉與山楂葉為主要原料,采用L9(34)正交試驗(yàn)篩選最佳的原料提取及生產(chǎn)工藝,制備成為雙葉顆粒。雙葉制劑的最佳提取條件為:提取溶劑純凈水,提取時(shí)間1.5 h,提取固液比為1∶8(g/mL),提取次數(shù)為3次;最佳生產(chǎn)工藝為:制劑輔料選擇淀粉、糊精和糖粉,配比1∶1∶1(g∶g∶g),使用65 %乙醇作為潤(rùn)濕劑制劑。按照試驗(yàn)確定的最佳工藝參數(shù),可制備得到質(zhì)量穩(wěn)定、服用方便的功能食品-雙葉顆粒。
關(guān)鍵詞:柿葉;山楂葉;生產(chǎn)工藝
柿葉系柿樹科(Ebenaceae)柿樹屬(Diospyros)植物柿(Diospyros kaki L.f.)的新鮮或干燥葉子,具有清熱解毒、潤(rùn)肺強(qiáng)心、鎮(zhèn)咳止血、抗癌防癌等多種醫(yī)療保健功能[1];山楂葉系薔薇科植物山里紅(Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.)或山楂(Crataegus pinnatifida Bge.)的干燥葉,能夠消食健胃、行氣散瘀[2]。我國(guó)是世界上最主要的柿樹和山楂樹生產(chǎn)國(guó),二者葉片資源十分豐富。但是長(zhǎng)期以來,人們對(duì)于山楂樹和柿樹的利用主要集中于果實(shí)之上,大量的葉片資源易被忽視,多以堆成農(nóng)家肥、喂牛羊或放火燒掉,難以得到有效的利用及其開發(fā)。本文特提出對(duì)者易被忽視的葉片資源配方提取制粒工藝,探討以二葉片的提取物為原料配以輔料,通過工藝試驗(yàn)研究,研發(fā)制備出具有防治高脂血癥及預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化功能且質(zhì)量穩(wěn)定、服用方便的功能食品雙葉顆粒。
1.1材料與試劑
柿葉與山楂葉:均產(chǎn)自天津市薊縣黃崖關(guān),經(jīng)鑒定為柿科植物柿的干燥葉及薔薇科植物山楂的干燥葉,自然晾干。
微晶纖維素:遼寧奧達(dá)制藥有限公司;乳糖:DAVISCO FOODS INTERNATIONAL.INC;玉米淀粉:河北海玉食品有限責(zé)任公司;糊精:遼寧奧達(dá)制藥有限公司;砂糖:廣東恒福糖業(yè)集團(tuán)有限公司;粉碎,過100目篩網(wǎng)。
甲醇(優(yōu)級(jí)純)、無水乙醇、苯、石油醚均為分析純:天津市化學(xué)試劑批發(fā)公司;聚酰胺粉(100-200目):江蘇長(zhǎng)豐化工有限公司;蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(10080-200707):中國(guó)藥品生物制品鑒定所。
1.2儀器與設(shè)備
SPECORD 210 PLUS紫外可見光分光光度計(jì):德國(guó)耶拿;AB204-E電子天平(精確值0.000 1 g):METTLER TOLEDO;KQ-100超聲波清洗器:昆山市超聲儀器有限公司;DL-203B電熱干燥箱:天津?qū)嶒?yàn)儀器廠;LDZ5-2低速自動(dòng)平衡離心機(jī):北京京立離心機(jī)有限公司。
2.1雙葉顆粒的制備
將采集得到的柿葉、山楂葉分別干燥粉碎為粗粉,用適當(dāng)溶劑進(jìn)行煎煮提取,提取液濃縮為浸膏,加入規(guī)定濃度與用量的潤(rùn)濕劑,攪拌制軟材,14目篩網(wǎng)制粒,60℃干燥后整粒,并篩除細(xì)粉,備用。
2.2提取工藝研究
柿葉、山楂葉均為葉片型原料,纖維含量較多,直接制劑服用,功效成分不易釋出,故擬采用純凈水作為提取溶劑,對(duì)干燥后的柿葉和山楂葉進(jìn)行煎煮提取,濃縮成為浸膏后進(jìn)行制劑。本研究以雙葉浸膏的總黃酮含量作為考察指標(biāo),采用正交試驗(yàn)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,篩選原料最佳提取工藝。
根據(jù)柿葉、山楂葉功效成分的性質(zhì),針對(duì)提取時(shí)間、提取固液比、提取次數(shù)3個(gè)主要影響因素,選用L9(34)正交試驗(yàn)篩選最佳水提工藝,正交試驗(yàn)因素水平見表1。
表1原料提取工藝試驗(yàn)因素水平表Table 1 The factors and levels of the raw material extraction experiment
根據(jù)設(shè)定的因素和水平,對(duì)柿葉和山楂葉進(jìn)行提取與濃縮,制備浸膏,以其總黃酮含量作為考察指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
2.3制劑工藝研究
顆粒劑產(chǎn)品的顆粒成型性受到多方面條件的影響,其中原輔料、溶媒等影響較大。本部分試驗(yàn)以干燥后的柿葉與山楂葉的提取浸膏為主料,考察輔料為淀粉(D)、糊精(H)、糖粉(T)、乳糖(R)、微晶纖維素(W),使用不同濃度的食用乙醇作為潤(rùn)濕劑進(jìn)行制劑,通過L9(34)正交試驗(yàn)篩選最佳制劑工藝配方,正交試驗(yàn)因素水平見表2。
為判定各因素水平對(duì)制粒過程中顆粒成型的影響,以成品率、溶化性、粘網(wǎng)程度、粒型狀況等作為考察指標(biāo),量化為分?jǐn)?shù)值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
表2制劑工藝試驗(yàn)因素水平表Table 2 The factors and levels of the preparation experiment
表3制劑工藝試驗(yàn)量化分值Table 3 The quantitative score of the preparation experiment
2.4總黃酮含量測(cè)定
柿葉和山楂葉中含有豐富的黃酮類化合物,文獻(xiàn)報(bào)道可有效調(diào)節(jié)體內(nèi)脂代謝功能,故本文將總黃酮含量作為該顆粒質(zhì)量控制的重要標(biāo)志成分。
2.4.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
精密稱取蘆丁對(duì)照品約20.0 mg,加甲醇溶解并定容至100 mL,得蘆丁對(duì)照品溶液。分別吸取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL蘆丁對(duì)照品溶液于25 mL量瓶中,加水至6 mL,加入5 %亞硝酸鈉溶液1 mL,搖勻,放置6 min,加10 %硝酸鋁溶液1 mL,搖勻,放置6 min,加氫氧化鈉溶液10 mL,搖勻,加水至刻度,放置15 min,以0.0 mL對(duì)照品溶液制得的溶液作為空白,于波長(zhǎng)510 nm比色測(cè)定,進(jìn)行線性關(guān)系考察,計(jì)算回歸方程。2.4.2供試品總黃酮含量測(cè)定
依據(jù)確定的最佳工藝提取了3批浸膏,按照制劑工藝制成雙葉顆粒(批號(hào)為:201401、201402、201403)。精密稱取顆粒約1.0 g,置索氏提取器中,加入石油醚加熱回流提取至提取液無色,棄去石油醚液,樣渣揮去石油醚,轉(zhuǎn)移至具塞錐形瓶中,精密加入甲醇25 mL,密塞,稱定重量,超聲處理30 min,放冷至室溫,用甲醇補(bǔ)足重量,搖勻,離心,取上清液為供試品溶液,并于波長(zhǎng)510 nm處比色測(cè)定,計(jì)算總黃酮含量。
3.1提取工藝研究
柿葉與山楂葉水提工藝的正交試驗(yàn)結(jié)果及方差分析見表4和表5。
表4原料提取工藝試驗(yàn)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果Table 4 The orthogonal design and results of the raw material extraction experiment
表5原料提取工藝試驗(yàn)方差分析Table 5 The ANOVA results of the raw material extraction experiment
通過對(duì)正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,篩選出柿葉和山楂葉的最佳水提工藝為A2B2C3,即提取時(shí)間1.5 h,提取固液比為1∶8(g/mL),提取次數(shù)為3次。其中,提取次數(shù)對(duì)總黃酮提取率影響最大,其次是提取固液比,相對(duì)影響最小的是提取時(shí)間。
3.2制劑工藝研究
選擇最佳制劑工藝配方的正交試驗(yàn)結(jié)果及方差分析結(jié)果見表6和表7。
表6制劑工藝試驗(yàn)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果Table 6 The orthogonal design and results of the preparation experiment
續(xù)表6制劑工藝試驗(yàn)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和結(jié)果Continue table 6 The orthogonal design and results of the preparation experiment
表7制劑工藝試驗(yàn)方差分析Table 7 The ANOVA results of the preparation experiment
正交試驗(yàn)篩選出的最佳制劑工藝為A1B2C1,即輔料選擇淀粉、糊精和糖粉,配比1∶1∶1(g∶g∶g),使用65 %乙醇作為潤(rùn)濕劑制劑,其中,不同輔料配比對(duì)制劑工藝影響最大。按照確立的制劑處方及工藝制備雙葉顆粒,效果良好。
3.3總黃酮含量測(cè)定
3.3.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線
以吸光度(A)為縱坐標(biāo),蘆丁對(duì)照品溶液濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖1),線性回歸方程為y=0.012 8x-0.005 3(R2=0.999 7)。結(jié)果表明,蘆丁試樣在0.00 μg/mL~45.60 μg/mL濃度范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。
圖1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線圖Fig.1 The standard curve of rutin
3.3.2供試品總黃酮含量測(cè)定
對(duì)雙葉顆粒試樣分別進(jìn)行比色測(cè)定,計(jì)算總黃酮含量,結(jié)果見表8。
表8供試品測(cè)定結(jié)果Table 8 The results of total flavonoids detected
1)本文以柿葉和山楂葉為主要原料,通過試驗(yàn)確定了雙葉制劑的最佳提取條件為:提取溶劑純凈水,提取時(shí)間1.5 h,提取固液比為1∶8(g/mL),提取次數(shù)為3次;最佳生產(chǎn)工藝為:制劑輔料選擇淀粉、糊精和糖粉,配比1∶1∶1(g∶g∶g),使用65 %乙醇作為潤(rùn)濕劑進(jìn)行制劑。以此工藝參數(shù)制備得到的功能食品雙葉顆粒色澤均勻一致,粒型適宜,質(zhì)量穩(wěn)定,為柿葉、山楂葉的配方配伍及加工利用提供了一條新途徑。
2)總黃酮的提取方法多為醇性溶劑提取[3-4],其優(yōu)點(diǎn)是提取效率較高,但也存在提取過程醇消耗量大、生產(chǎn)成本高、易產(chǎn)生溶劑殘留等缺點(diǎn);本文所采用水提法提取率相對(duì)較低,但其生產(chǎn)成本低廉、操作簡(jiǎn)便、無溶劑殘留,且安全生產(chǎn)性能高,在工業(yè)化大生產(chǎn)中更具有優(yōu)勢(shì)。
3)本文以L9(34)正交試驗(yàn)確定原料葉片的最佳水提工藝為提取時(shí)間1.5 h,提取固液比為1∶8(g/mL),提取次數(shù)為3次,雖然提取次數(shù)增加有可能進(jìn)一步提高原料的提取率(包括黃酮類等),但考慮到實(shí)際生產(chǎn)條件及能耗消耗等問題,故確定最佳提取次數(shù)為3次。
4)提取浸膏在制備顆粒的過程中,需考慮浸膏制成軟材的均勻性問題,經(jīng)試驗(yàn)反復(fù)摸索,需要將浸膏熱熔,再加入適量的食用酒精,當(dāng)呈現(xiàn)稠狀混合膏狀,方可加入一定比例的輔料,制作軟材,顆粒的均勻性才可得以保障,否則易出現(xiàn)顆粒色澤不均勻,干燥后顆粒總黃酮含量的測(cè)定結(jié)果差異較大的問題。
參考文獻(xiàn):
[1]王燕.柿葉中黃酮類化合物的研究進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2011,7 (4):173-174
[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M] .北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015:32
[3]王寧,李遠(yuǎn)志,徐莉珍,等.超聲波法提取柿葉總黃酮的工藝研究[J].現(xiàn)代食品科技,2008,24(7):687-690
[4]許瑞波,趙躍強(qiáng),魯升麗,等.山楂葉黃酮的超聲提取、精制及抗氧化性研究[J].食品研究與開發(fā),2007,28(4):64-69
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Study on Production Technology of Shuangye Preparation
WANG Lian,XIAO Ji-chun,TIAN Yao,WANG Lan,ZHANG Rong-quan*
(Tianjin Institute of Pharmaceutical and Medical Science,Tianjin 300020,China)
Abstract:To develop a production technology of Shuangye granule. Persimmon leaf and hawthorn leaf were used as raw material to prepare Shuangye granule,and the optimum extraction and production techniques were
beselectedby L9(34)orthogonaltest.Theoptimumextractionconditionof Shuangyepreparationwas:theextraction solvent was purified water,extraction time 1.5 h,extraction solid-liquid ratio 1∶8(g/mL),extraction times 3;
and the optimum production technology was:the excipients were starch,dextrin and powdered sugar,
excipients radio 1∶1∶1(g∶g∶g),the wetter was 65 % ethanol. The granule with stable quality and easy taking can be prepare by the optimal production technology.
Key words:persimmon leaf;hawthorn leaf;production technology
收稿日期:2015-12-10
*通信作者:張榮泉(1964—),男,研究員,研究方向:中藥、天然藥物的開發(fā)及研究、保健食品的研究開發(fā)申報(bào)及生產(chǎn)。
作者簡(jiǎn)介:王蓮(1982—),女(漢),助理研究員,碩士,主要從事天然產(chǎn)品和保健食品的研發(fā)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。
DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2016.03.032