勞雪芬+曹錚+湯里平+楊云喬+姚秋霞+尚秋晨+許小琴

摘要： 為研究富硒女貞子對山羊生產(chǎn)性能、血液學和血清生化指標的影響，選取30只山羊隨機均分為5組，其中C組飼喂基礎(chǔ)日糧，CLL組基礎(chǔ)日糧中添加女貞子30 g/（只·d），LSLL組、MSLL組、HSLL組基礎(chǔ)日糧中分別添加富硒女貞子10、30、50 g/（只·d），給藥組于試驗開始的第5天給藥，連續(xù)5 d。進行產(chǎn)奶量、血液中WBC、RBC、HGB含量、血清中TP、ALB、ALT、AST、CK、LDH的水平測定。結(jié)果顯示：富硒女貞子和普通女貞子均能提高山羊的產(chǎn)奶量，在試驗1～7 d、22～38 d產(chǎn)奶量增長率由大到小的排序為：LSLL組>MSLL組>HSLL組>CLL組>C組；CLL組能顯著提高山羊RBC（P<0.05），MSLL組、CLL組均能顯著提高山羊HGB含量（P<0.05）；LSLL組、MSLL組、HSLL組和CLL組均能顯著提高山羊血清中TP含量（P<0.05），LSLL組、MSLL組和CLL組均能顯著提高山羊血清中ALB含量（P<0.05），LSLL組能顯著降低血清中AST活性（P<0.05）；添加富硒女貞子對山羊WBC含量、ALT、CK、LDH活性均無顯著影響（P>0.05）。說明日糧中添加富硒女貞子在提高山羊產(chǎn)奶量的同時，亦提高了血液RBC、HGB和血清TP、ALB的含量，降低了血清AST活性，對山羊WBC、ALT、CK、LDH活性影響不明顯。

關(guān)鍵詞： 富硒女貞子；山羊；生產(chǎn)性能；血液學；血清生化

中圖分類號： S853.72 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2016）03-0256-04

隨著規(guī)?；?、集約化養(yǎng)殖模式的不斷發(fā)展，使用抗生素類添加劑來提高動物生產(chǎn)水平、降低發(fā)病率已成為普遍現(xiàn)象，但長期不加選擇地濫用抗生素類飼料添加劑，導(dǎo)致了一系列耐藥微生物的出現(xiàn)，給畜禽疾病的防治帶來了新的難題，亦給人類健康帶來了潛在的威脅。中草藥由于含有多糖、生物堿、蛋白質(zhì)、氨基酸、苷類、礦物質(zhì)元素和維生素等生物活性物質(zhì)，使其具有健脾開胃、提高畜禽生長速度、增強動物免疫機能、改善動物產(chǎn)品品質(zhì)、提高飼料報酬等效果而備受關(guān)注[1]。中草藥資源豐富，其作用和安全性已被人們所認可，作為動物飼料添加劑是近年來國際動物營養(yǎng)學研究的一大熱點。本研究的目的是考察富硒女貞子對山羊的生產(chǎn)性能、血液學和血液生化指標的影響，為新型藥源素材研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗山羊 選用30只體質(zhì)量、胎次、泌乳量相近，分娩日期與體況相近并處于泌乳期的成年健康薩能山羊作為試驗對象。試驗地點：上海浦東新區(qū)杰隆生物制品股份有限公司試驗羊場。

1.1.2 試驗藥材 富硒女貞子（硒含量1.88 μg/g）、對照藥女貞子由筆者所在實驗室保存[2]，60 ℃烘干粉碎。

1.1.3 主要儀器 BS-120生化分析儀、BC-2800vet血液細胞分析儀（邁瑞mindray），通用臺式冷凍離心機（Eppendorf公司），一次性使用負壓采血管（江蘇榮業(yè)科技有限公司產(chǎn)品），核酸蛋白濃度檢測儀（美國伯騰儀器有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 分組及處理方法 選用30只泌乳期健康薩能山羊，經(jīng)編號隨機均分5組，分別為空白對照組（C組，基礎(chǔ)日糧）和4個試驗給藥組，即普通女貞子組（CLL組，基礎(chǔ)日糧+女貞子30 g/（只·d））、富硒女貞子低劑量組[LSLL組，基礎(chǔ)日糧+富硒女貞子10 g/（只·d）]、富硒女貞子中劑量組[MSLL組，基礎(chǔ)日糧+富硒女貞子30 g/（只·d）]、富硒女貞子高劑量組[HSLL組，基礎(chǔ)日糧+富硒女貞子50 g/（只·d）]，飼養(yǎng)于同一羊舍，采用舍飼圈養(yǎng)方式飼養(yǎng)，自由飲水。試驗期從2014年5月5日至6月12日（共38 d），給藥組于試驗開始的第5天給藥，連續(xù)5 d。

1.2.2 測定指標

1.2.2.1 產(chǎn)奶量的采集與分析 試驗期間每天記錄羊的產(chǎn)奶量，試驗結(jié)束后統(tǒng)計分析每組產(chǎn)奶量的變化規(guī)律。

1.2.2.2 血液樣品的采集保存與分析 在試驗1、7、14、21、38 d的06：30，試驗羊空腹狀態(tài)下頸靜脈無菌采血7 mL，分成2份，分別為：2 mL置于含EDTA-K2抗凝劑的負壓采血管進行血液學指標的測定；5 mL置于負壓采血管常溫保存，待血清析出后離心（3 000 r/min，4 ℃，10 min），血清分裝于EP管中，-20 ℃保存，用于檢測血清生化指標含量。血液學指標：主要檢測白細胞數(shù)（WBC）、紅細胞數(shù)（RBC）和血紅蛋白（HGB），均采用BC-2800vet血液細胞分析儀測定。血清生化指標：采用BS-120生化分析儀測定血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、肌酸磷酸激酶（CK）和乳酸脫氫酶（LDH）的含量。樣品測定所用試劑盒均購自深圳邁瑞公司。

1.3 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件處理，運用方差分析進行分析，統(tǒng)計結(jié)果以x±s表示，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 富硒女貞子對山羊產(chǎn)奶量的影響

由表1可知，隨著時間的延長，C組的產(chǎn)奶量呈先上升后下降的趨勢，富硒女貞子各劑量組的產(chǎn)奶量均呈先上升再下降最后上升的趨勢，CLL組的產(chǎn)奶量一直呈上升趨勢。試驗1～7 d各組的產(chǎn)奶量均增加，且各給藥組的增長率較C組大（增長率是指該組某時間段的產(chǎn)奶量與同組試驗前5 d的平均產(chǎn)奶量相比）；8～14 d、15～21 d各組的產(chǎn)奶量上升率較1～7 d小甚至下降；22～38 d時，各給藥組的產(chǎn)奶量均增加，C組則下降。在試驗1～7 d、22～38 d產(chǎn)奶量增長率由大到小的排序為：LSLL組>MSLL組>HSLL組>CLL組>C組。

2.2 富硒女貞子對山羊血液學指標的影響

由表2可知，給藥后各組WBC都有所提高，但差異不顯著（P>0.05），C組WBC在各時間點變化不大。各給藥組的RBC隨著試驗時間的延長變化不大，在試驗7、14、21 d時，CLL組的RBC顯著高于C組（P<0.05），其余時間點各組間RBC差異不顯著（P>0.05）。各組的HGB含量隨著試驗時間的延長呈先下降后上升的趨勢。在試驗1、7、21、38 d時MSLL組的HGB含量均顯著高于C組（P<0.05），在試驗14、21、38 d時CLL組的HGB含量均顯著高于C組（P<005），其余時間點各組間RBC差異不顯著（P>0.05）。

2.3 富硒女貞子對山羊血清生化指標的影響

由表3可知，各給藥組的TP與ALB含量隨著時間的延長均有所提高，C組則有所下降，但差異均不顯著（P>0.05）。其中14 d時各劑量富硒女貞子組的TP含量極顯著高于C組（P<0.01），21、38 d時LSLL組的TP含量顯著高于C組（P<0.05）；7 d時LSLL組、CLL組的ALB含量顯著高于C組（P<0.05），38 d時LSLL組、MSLL組、CLL組的ALB含量顯著高于C組（P<0.05）。各組ALT、AST的活性隨著試驗時間的延長均呈下降趨勢。38 d時LSLL組、CLL組、C組的ALT活性顯著低于7、14 d的活性（P<0.05），MSLL組、HSLL組的ALT活性隨著時間的延長差異不顯著（P>0.05）；38 d時MSLL組的AST活性顯著低于7 d的活性（P<0.05），38 d時C組的AST活性顯著低于14 d的活性（P<0.05），14 d 時LSLL組的AST活性顯著低于C組（P<0.05），38 d時CLL組顯著高于C組（P<0.05）。各組CK與LDH的活性隨著時間的延長變化不大，差異不顯著（P>0.05）。

3 討論

3.1 富硒女貞子對山羊產(chǎn)奶量的影響

產(chǎn)奶量是衡量奶畜泌乳性能高低最重要的指標，也是奶農(nóng)收益的可靠保障。影響產(chǎn)奶量的因素有很多，概括起來主要包括2個方面：遺傳因素和飼養(yǎng)管理條件。據(jù)測定，奶山羊產(chǎn)奶量的遺傳力為0.3～0.35，因此，其產(chǎn)奶量的高低主要受飼養(yǎng)管理等環(huán)境因素的影響，而飼糧營養(yǎng)水平就是主要的環(huán)境因素之一。中草藥一般含有多種營養(yǎng)成分，如維生素、礦物質(zhì)、微量元素等，大多兼有營養(yǎng)與藥用2種屬性，在防病治病的同時，用作飼料添加劑可促進動物生長、提高生產(chǎn)性能。研究表明，日糧中添加1%的女貞子能顯著提高產(chǎn)蛋雞的產(chǎn)蛋量[3]。李慶試驗發(fā)現(xiàn)，肌注復(fù)方微量元素注射液“生命元”能明顯提高山羊日采食量，顯著增加日增質(zhì)量和降低料質(zhì)量比[4]。張瑞霜等發(fā)現(xiàn)日糧中添加1%女貞子粉可使蛋雞平均日產(chǎn)蛋量和產(chǎn)蛋率較對照組顯著提高了20.09%和18.75%[5]。崔國強試驗發(fā)現(xiàn)飼料中添加0.6 mg/kg的亞硒酸鈉與0.8 mg/kg酵母硒組合對促進種母雞采食量、提高產(chǎn)蛋率和蛋質(zhì)量、降低料蛋比的效果最好[6]。吳顯實研究發(fā)現(xiàn)日糧中添加富硒益生菌、益生菌或亞硒酸鈉均能提高奶牛產(chǎn)奶量，且提高效果由高到低排序為：富硒益生菌組>益生菌組>亞硒酸鈉組>對照組[7]。魯玉花等報道日糧中補硒可極顯著提高山羊的日增質(zhì)量[8]。張春香等發(fā)現(xiàn)0.3 mg/kg硒水平可以促進山羊的生長和提高飼料的利用率[9]。

本試驗結(jié)果顯示，飼料中添加各劑量富硒女貞子粉和普通女貞子粉均能提高山羊的產(chǎn)奶量，在試驗1～7 d、22～38 d產(chǎn)奶量增長率由大到小的排序為：LSLL組>MSLL組>HSLL組>CLL組>C組。表明飼料中添加富硒女貞子粉、普通女貞子粉均能提高山羊產(chǎn)奶量，這可能是飼料中添加的富硒女貞子粉和普通女貞子粉中含有多糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、齊墩果酸等物質(zhì)，可以補充和提高飼料的營養(yǎng)價值，進而提高山羊的生產(chǎn)性能。葉面噴施亞硒酸鈉水溶液可提高作物對硒的生物利用率，植物通過自身的生理代謝，將生物活性低的無機硒轉(zhuǎn)化成以硒蛋白、硒多糖為主的有機硒，從而提高了女貞子的營養(yǎng)價值和藥效[10]。這是富硒女貞子提高山羊生產(chǎn)性能效果較普通女貞子好的原因。且每只山羊添加10 g富硒女貞子（硒的總含量為18.8 μg/g）的效果最好。此劑量是根據(jù)《中華人民共和國獸藥典》（2010年版）中女貞子的劑量確定的推薦劑量，30、50 g/（頭·d）是其推薦劑量的3、5倍。結(jié)果表明添加30、50 g/（頭·d）富硒女貞子對山羊產(chǎn)奶量均有促進作用，但其作用與富硒女貞子劑量不呈正相關(guān)，且作用效果低于10 g/（頭·d）。由此可見，日糧中添加10 g/（頭·d）富硒女貞子的效果較好，且血液學、血清生化指標的試驗結(jié)果均證明了這一結(jié)論。

3.2 富硒女貞子對山羊血液學指標的影響

血液是動物內(nèi)環(huán)境的重要組成部分，參與動物新陳代謝，是體內(nèi)代謝原料、廢物運輸及基礎(chǔ)代謝反應(yīng)進行的重要場所。紅細胞通過血紅蛋白運輸O2、CO2和營養(yǎng)物質(zhì)，對機體產(chǎn)生的酸性或堿性物質(zhì)起緩沖作用；白細胞能刺激機體增強對外源抗原的抵抗力，反映機體免疫功能水平的高低。所以血液對動物來說是十分重要的，其成分的變化往往反映機體的代謝和健康情況。李慶試驗發(fā)現(xiàn)，肌注復(fù)方微量元素注射液“生命元”能適度提高波爾山羊的白細胞數(shù)，顯著提高其紅細胞數(shù)和血紅蛋白含量[4]。張春香等試驗發(fā)現(xiàn)日糧中添加0.3、0.5 mg/kg亞硒酸鈉組WBC顯著升高，添加0.1、0.3 mg/kg 亞硒酸鈉組RBC顯著升高，改善了山羊的免疫狀況[9]。

本試驗結(jié)果顯示，飼料中添加富硒女貞子粉和普通女貞子粉能適度提高山羊的白細胞數(shù)，增強奶山羊抵抗力。飼料中添加普通女貞子粉組的紅細胞數(shù)顯著高于空白對照組，添加30 g/（頭·d） 富硒女貞子粉和普通女貞子粉組的血紅蛋白含量顯著高于空白對照組。由此可見，飼料中添加 30 g/（頭·d） 富硒女貞子粉和普通女貞子粉均能顯著提高山羊的紅細胞數(shù)和血紅蛋白含量。此結(jié)果與上述報道一致。

3.3 富硒女貞子對山羊血清生化指標的影響

血清生化指標的改變是組織細胞通透性發(fā)生改變和機體新陳代謝機能發(fā)生改變的反映，也是反映機體代謝狀況最敏感的一類指標。

血清總蛋白是由白蛋白和球蛋白2個部分組成，總蛋白含量高，有利于提高代謝水平和免疫力，促進動物健康快速生長。血清蛋白質(zhì)是動物機體最主要的貯存蛋白質(zhì)之一，在畜體氮素營養(yǎng)良好時能形成蛋白質(zhì)的貯備。而當?shù)夭蛔銜r，貯存蛋白質(zhì)則被動物機體用來維持重要的組織結(jié)構(gòu)和代謝機能。因此，血清蛋白質(zhì)對動物的生產(chǎn)性能具有重要的生理意義。本試驗結(jié)果顯示，7、38 d時富硒女貞子各劑量組和普通女貞子組的TP和ALB含量顯著高于空白對照組，且富硒女貞子低劑量組效果最好。表明日糧中添加富硒女貞子和普通女貞子均能提高山羊血清TP和ALB的含量，即富硒女貞子和普通女貞子能加強山羊血清蛋白質(zhì)合成代謝，促進山羊的生長發(fā)育，尤以10 g/（頭·d）富硒女貞子效果最優(yōu)。

轉(zhuǎn)氨酶是催化氨基酸與酮酸之間氨基轉(zhuǎn)移的一類酶。普遍存在于動物、植物組織和微生物中，心肌、腦、肝、腎等動物組織中含量較高。ALT和AST反映了蛋白質(zhì)合成和分解的狀況。ALT主要是催化氨基酸在丙氨酸和谷氨酸之間轉(zhuǎn)移，在非必需氨基酸的合成和蛋白質(zhì)分解代謝中起重要的中介作用。AST催化谷氨酸與草酰乙酸之間的轉(zhuǎn)氨作用，以心臟中活力最大，其次為肝臟。正常情況下血清ALT和AST活性很低，當這些組織細胞受損或通透性增大時，可有大量的ALT和AST溢入血清，造成血清中ALT和AST的活性升高。故可根據(jù)血清中ALT和AST活性的變化，作為診斷心、肝功能的指標之一[11]。本試驗結(jié)果顯示各試驗組血清ALT和AST活性與空白對照組相比有降低趨勢，14 d時富硒女貞子低劑量組的AST活性顯著低于空白對照組，說明日糧中添加富硒女貞子和普通女貞子對山羊心臟和肝臟無損害，在一定程度上驗證了其安全性。

CK是一種器官特異性酶，以骨骼肌含量最高，其功能是催化三磷酸腺苷中的高能磷酸鍵轉(zhuǎn)移到磷酸分子上，生成磷酸肌酸而貯存能量[12]。應(yīng)激可使動物采食量下降、糖原降低，因肌肉功能不足而導(dǎo)致肌肉營養(yǎng)不良，從而使血液CK活性升高，故CK活性的升高是應(yīng)激反應(yīng)的一個重要特征。本試驗各組的CK活性變化不大，差異不顯著。表明富硒女貞子和普通女貞子對山羊血清的CK活性影響不明顯。提示本試驗期間山羊沒有受到應(yīng)激。

LDH催化丙酮酸與L-乳酸之間的還原與氧化反應(yīng)，是糖酵解和糖異生的主要酶之一，廣泛存在于動物機體所有組織中，沒有器官特異性。但腎、心肌、骨骼肌含量最為豐富，其次是肝、脾、胰及肺組織內(nèi)較多。若器官或組織損傷，可釋放LDH至血液中，血清該酶含量即見增高。本試驗各組的LDH活性變化不大，差異不顯著。表明富硒女貞子和普通女貞子對山羊血清的LDH活性影響不明顯。提示本試驗期間富硒女貞子和普通女貞子對山羊器官組織無損害。

4 結(jié)論

日糧中添加富硒女貞子、普通女貞子均能提高山羊產(chǎn)奶量，且添加10 g/（頭·d）富硒女貞子的效果最好；添加30 g/（頭·d） 富硒女貞子和普通女貞子能顯著提高山羊的RBC和HGB含量，且均能提高血清中TP、ALB含量，降低了AST活性，但對山羊WBC、ALT、CK、LDH影響不明顯。

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