成傳述，石長庚，趙仕義

（1.四川省宣漢縣東鄉(xiāng)鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，四川宣漢　636150；2.四川省宣漢縣云蒙山合作示范牧場，四川宣漢　636154；3.四川省宣漢縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所，四川宣漢　636150）

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宣漢縣蜀宣花牛體內寄生蟲感染情況調查

成傳述1，石長庚2，趙仕義3

（1.四川省宣漢縣東鄉(xiāng)鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，四川宣漢636150；2.四川省宣漢縣云蒙山合作示范牧場，四川宣漢636154；3.四川省宣漢縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所，四川宣漢636150）

近幾年來，蜀宣花牛寄生蟲病呈上升趨勢，嚴重影響了宣漢縣養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展[1]。本文筆者針對蜀宣花牛繁育場和部分養(yǎng)殖專業(yè)戶所養(yǎng)的蜀宣花牛的體內寄生蟲感染情況進行了調查。

1　材料與方法

1.1糞便樣品采集在蜀宣花牛繁育場分別選擇犢牛舍、育成牛舍、成年牛舍、產房等不同圈舍中不同年齡的牛，部分糞便樣品取自精神沉郁、厭食、喜歡躺臥、腹瀉、所排糞便帶血和含大量纖維素樣薄膜、發(fā)育遲緩、進行性消瘦或體重減輕、后期糞便呈黑色的牛。按0～6月、0.5～1歲、1～2歲、3～4歲、4歲以上5個年齡段編為5組，每組隨機采集剛排出的糞便樣品20～30份。每頭受檢牛直腸取糞100～150g，裝入采樣袋中。養(yǎng)殖專業(yè)戶同樣也按不同年齡段分組編號，也選取了部分精神沉郁、厭食、喜歡躺臥、腹瀉、所排糞便帶血和含大量纖維素樣薄膜、發(fā)育遲緩、進行性消瘦或體重減輕的牛進行取樣。所有糞樣均應在采樣單上記錄好牛的耳標號、年齡，糞樣用冷藏箱保存運輸，放入4℃冰箱中待查。

1.2檢測方法

1.2.1線蟲蟲卵的檢查采用飽和鹽水漂浮法檢查線蟲蟲卵。先把糞便樣品在采樣袋中混合均勻，然后取25 g放入100mL三角瓶中，加入50mL飽和鹽水至瓶口，輕輕攪拌均勻后靜置2～30 min，用載玻片蓋在三角瓶口部沾上漂浮糞渣，然后取下載玻片用蓋玻片蓋上，鏡檢，檢測線蟲卵、球蟲卵囊。用測微尺測量蟲卵大小，依據有關資料[2-3]進行寄生蟲種類鑒定。

1.2.2吸蟲、絳蟲蟲卵的檢查采用水洗沉淀法檢查吸蟲、絳蟲蟲卵。取攪拌均勻的糞樣50g，放入260目棉綸篩兜中加蒸餾水沖洗，直到洗出清亮透明的水為止，再通過60目銅篩過濾出粗物，濾液放入錐形杯中，靜置25min，倒出上清液，用竹簽挑取沉淀涂片鏡檢，檢測吸蟲卵。用測微尺測量蟲卵大小，依據有關資料進行寄生蟲種類鑒定。

1.3蟲卵（卵囊）計數采用麥克馬斯特氏計數法和斯陶爾氏法對蟲卵（卵囊）進行計數，計算出每克牛糞中的蟲卵（卵囊）數量[2]。

1.4培養(yǎng)及鑒定

1.4.1球蟲卵囊分離培養(yǎng)及鑒定取有蟲卵（卵囊）陽性樣品于燒杯中，加入適量清水，用玻璃棒充分搗碎混勻，用銅篩過濾之，收集濾液，經離心機300 r/min離心5min；拋棄上清液，在沉淀物中加入飽和食鹽水靜置漂浮20 min，再以300 r/min離心5 min；取其上清液，加10倍蒸餾水，最后再以300 r/min離心5 min；棄去上清液，取其沉淀物放到2.5%重鉻酸鉀溶液培養(yǎng)皿里，置28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。其間每6h觀察卵囊發(fā)育狀態(tài)，直至孢子化。

在孢子化后，取出培養(yǎng)皿中的卵囊液于載玻片上制片，然后置于有測微尺的400倍顯微鏡下觀察孢子化卵囊的結構、形態(tài)、色澤、大小。同時，根據卵囊、子孢子、孢子囊等的微結構特征（用油鏡觀測）、形態(tài)、色澤、大小等，依據有關資料[4]進行寄生蟲種類鑒定。

1.4.2隱孢子蟲的檢測與鑒定用配制的飽和蔗糖溶液漂浮法檢測，操作步驟如下：取10g樣品加適量蒸餾水，用玻璃棒攪拌均勻，60目銅篩過濾，將濾液用離心機以300r/min離心10min；倒出上清液，在離心沉淀物中加入飽和蔗糖溶液20mL，攪拌均勻后置入離心機中，經300r/min離心10min；離心后取出靜置1min，用接種環(huán)蘸取離心液表面層液膜涂片，于400倍顯微鏡下檢測，并用測微尺測量卵囊的大小。

用改良抗酸染色法鑒定種類，其操作方法如下：取10g樣品加適量的蒸餾水，用玻璃棒攪拌均勻，60目銅篩過濾，將濾液用離心機300r/min離心10min，倒出上清液，在離心管底取出沉淀物放于載玻片上，用鐵絲環(huán)涂成硬幣大小的糞膜，晾干后用甲醇固定，然后用抗酸染色液染色，最后在1000倍油鏡下測量卵囊大小。

2　結果與分析

2.1蜀宣花牛體內寄生蟲感染情況本次調查共采集蜀宣花牛糞便樣品579份，檢出陽性303份，總感染率為52.3%。其中規(guī)模養(yǎng)殖場采樣279份，陽性106份，感染率為37.99%；養(yǎng)殖專業(yè)戶采樣300份，陽性197份，感染率為65.66%。檢測結果見表1。

表1　蜀宣花牛體內寄生蟲感染情況

從表1可見，不同地方、不同年齡階段蜀宣花牛的寄生蟲感染率不一樣。總的來講，規(guī)模場感染率低于專業(yè)養(yǎng)殖戶，犢牛感染率高于育成牛和成年牛。感染率最高的是專業(yè)養(yǎng)殖戶養(yǎng)的犢牛，感染率為81.67%；感染率最低的是規(guī)模養(yǎng)殖場4歲以上的牛，感染率為31.67%。

2.2蜀宣花牛原蟲感染情況在本次采集的579份蜀宣花牛糞便樣品中，原蟲陽性127份，總感染率為21.93%，規(guī)模養(yǎng)殖場感染率為13.26%，養(yǎng)殖專業(yè)戶感染率為30%。其中，球蟲感染率為22.97%，隱孢子蟲感染率為2.41%。各地和各年齡階段都有球蟲感染，以犢牛感染率最高，專業(yè)養(yǎng)殖戶高于規(guī)模養(yǎng)殖場；隱孢子蟲主要發(fā)生在犢牛和育成牛，成年3歲以上的牛均沒檢出。檢測結果詳見表2。

表2　蜀宣花牛體內原蟲感染情況

2.3蜀宣花牛蠕蟲感染情況579份糞便樣品中，蠕蟲陽性68份，總感染率為11.74%（68/579），規(guī)模養(yǎng)殖場感染率為5.73%（16/279），養(yǎng)殖專業(yè)戶感染率為17.33%（52/300）。不同地方、不同年齡段蜀宣花牛的蠕蟲感染率和感染種類不同，犢牛（1歲以內）主要感染蛔蟲，其他年齡的牛主要感染食道口線蟲，個別牛感染捻轉血矛線蟲，吸蟲感染主要是肝片吸蟲和前后盤吸蟲。在規(guī)模養(yǎng)殖場和養(yǎng)殖專業(yè)戶的1～2歲牛糞樣品中，有3份樣品同時檢出線蟲卵和吸蟲卵，其中規(guī)模場占2份，養(yǎng)殖專業(yè)戶占1份。檢測結果詳見表3。

表3　蜀宣花牛體內蠕蟲感染情況

2.4蜀宣花牛糞便卵囊數統(tǒng)計球蟲OPG值在不同地方都有較高的感染，蜀宣花牛各個年齡階段都有感染，最高OPG值出現在專業(yè)養(yǎng)殖戶1歲以內的犢牛（犢牛有臨床癥狀）；線蟲EPG值只有在規(guī)模養(yǎng)殖場3歲以上的牛身上沒有檢出，最高EPG值出現在專業(yè)養(yǎng)殖戶6月齡～1歲的牛（來自有臨床癥狀的牛）；吸蟲EPG值在規(guī)模養(yǎng)殖場0～6月齡、6月齡～1歲和養(yǎng)殖專業(yè)戶0～6月齡的牛身上都沒有檢出，最高EPG值出現在養(yǎng)殖專業(yè)戶4歲以上的成年牛身上。EPG值最高值為1 000，全部來自有貧血、血便、精神不振、食欲下降、腹瀉的牛，最低值為100。統(tǒng)計結果詳見表4。

表4　蜀宣花牛糞便卵囊數統(tǒng)計

2.5蜀宣花牛體內寄生蟲混合感染與單純感染情況

由表5分析可知：規(guī)模養(yǎng)殖場和養(yǎng)殖專業(yè)戶都存在寄生蟲交叉混合感染的情況，混合感染率分別是20.83%（15/72）、46.60%（48/103）。養(yǎng)殖專業(yè)戶所養(yǎng)蜀宣花牛的混合感染嚴重，4歲以上的混合感染率達到90.90%，感染寄生蟲少則2種，多則4種。

2.6蜀宣花牛體內寄生蟲種類在所采集的579份樣品中，檢測出的蟲卵有犢牛蛔蟲、食道口線蟲、吸蟲、球蟲等，球蟲分別是斯氏艾美耳球蟲、橢圓艾美耳球蟲，吸蟲有肝片吸蟲、前后盤吸蟲。

3　討論

3.1寄生蟲的直接危害

3.1.1掠奪蜀宣花牛草料的營養(yǎng)，產生毒素，破壞機體組織，導致牛生長速度下降、飼料利用率降低，嚴重時引起死亡；易繼發(fā)細菌感染，造成疾病診斷困難，增加用藥成本。

3.1.2低死亡率造成養(yǎng)殖業(yè)主對驅蟲工作有所忽視。無論體內寄生蟲還是體外寄生蟲，它們在致病過程中所產生的癥狀及危害都是漸進的、緩慢的，一般不會像細菌性、病毒性疾病那么猛烈、突然。但是，寄生蟲感染可使育成牛生長速度下降8%～15%，飼料利用率下降13%～25%，對養(yǎng)殖效益影響極大。

3.1.3寄生蟲病的存在使牛對細菌性疾病易感，比如腸道蛔蟲感染會使細菌性腸炎發(fā)病率增加?；紫x移行至肺臟或后圓線蟲感染，會加重呼吸綜合征的癥狀；蛔蟲移行至肝臟或肝片吸蟲感染，會降低肝臟的解毒能力，引發(fā)黃疸性疾病。

表5　蜀宣花牛體內寄生蟲混合感染與單純感染情況

3.1.4寄生蟲感染會增加臨床診斷的難度?；紫x、腎蟲移行到肺臟或后圓線蟲感染，會引起咳嗽、氣喘等呼吸道癥狀，易與病原微生物引起的呼吸道疾病混淆。蛔蟲寄生于腸道引起的腹瀉和球蟲造成的腹瀉易與病毒性、細菌性腹瀉混淆。腎蟲病引發(fā)的后軀不能負重、跛行，易與營養(yǎng)缺乏、風濕等癥混淆。

3.1.5寄生蟲病的存在會造成臨床用藥不準確。由于習慣思維的影響，臨床上出現腹瀉癥狀就立即選用抗菌止痢藥物，出現呼吸道癥狀就認為是細菌、病毒感染，這樣往往會造成治療上的不及時和誤診。

3.2防控建議宣漢縣所有蜀宣花牛養(yǎng)殖場應當根據牛群狀況制定出綜合防疫措施，定期驅蟲，及時清掃牛糞，做好圈舍和環(huán)境的清潔衛(wèi)生，采用發(fā)酵等方法無害化處理糞便，選用高效環(huán)保的驅蟲藥品對牛體定期驅蟲。放牧要到清潔衛(wèi)生之地，飲水要用清潔衛(wèi)生的水，或對水消毒后才給予牛飲用，同時加強飼養(yǎng)管理。這樣方可減少寄生蟲病的發(fā)生，保障蜀宣花牛養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展。

參考文獻：

[1]徐發(fā)榮，趙景義，等.北京地區(qū)奶牛寄生蟲病感染情況的調查[J].中國獸醫(yī)雜志，2011，30（6）：173-174.

[2]秦建華，李國清.動物寄生蟲病學實驗教程[M].中國農業(yè)出版社，2007：6-10.

[3]趙其平，韓紅玉，等.上海地區(qū)奶牛球蟲病感染現狀調查[J].畜牧與獸醫(yī)，2007（7）：9-15.

[4]金蘭梅，伍清林，等.江蘇部分地區(qū)奶牛球蟲病流行情況調查[J].中國奶牛，2010（7）：9-15.

作者簡介：成傳述（1965—），男，四川省宣漢縣人，大學文化，獸醫(yī)師，現任宣漢縣東鄉(xiāng)鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站站長。

收稿日期：2015-10-09

中圖分類號：S852.7

文獻標識碼：A

文章編號：1001-8964（2016）02-0024-03