結(jié)核病診斷中痰涂片及TB—DNA檢測方法的應(yīng)用價值

熊險莉　黃茉瑛　梅越華

摘要：目的 對比分析TB-DNA與痰涂片對結(jié)核病的診斷價值。方法 選取我院接診結(jié)核病患者72例，肺結(jié)核與肺外結(jié)核患者各36例，另從同期體檢人群中選取非肺結(jié)核人群36例，取清晨深咳膿性痰，行痰涂片制作，PCR法測定痰液TB-DNA。結(jié)果 肺結(jié)核組、肺外結(jié)核組與非結(jié)核組痰TB-DNA陽性率均顯著高于痰涂片陽性率（P<0.01）；肺結(jié)核組、肺外結(jié)核組TB-DNA敏感度、特異度均比痰涂片高。結(jié)論 結(jié)核病診斷中，TB-DNA與痰涂片均具有一定的應(yīng)用價值，但TB-DNA敏感度與特異度更高。

關(guān)鍵詞：結(jié)核病；痰涂片；TB-DNA；診斷

結(jié)核病是一種因結(jié)核分期桿菌所引起的慢性傳染性疾病。該病被納入我國重大傳染疾病之一，致使人民群眾健康的呼吸道傳染病造成非常嚴重的危害[1]。本研究在結(jié)核病診斷中，通過運用TB-DNA與痰涂片進行檢測，現(xiàn)將測定結(jié)果及對比情況總結(jié)如下。

1資料與方法

1.1一般資料 本研究病例來自我院2013年1月～2015年6月接診的結(jié)核病患者，所有患者均符合《臨床診療指南：結(jié)核病分冊》（中華醫(yī)學會）中關(guān)于結(jié)核病的相關(guān)描述。選取結(jié)核患者72例，其中肺結(jié)核組患者36例，女性12例，男性24例，患者年齡為15～83歲，平均年齡為（50.14±1.25）歲；肺外結(jié)核患者36例，女性13例，男性23例，患者年齡為17～85歲，平均年齡為（52.22±1.14）歲；另從我院體檢人群中選取36例非結(jié)核人群，其中女性10例，男性36例，患者年齡為18～92歲，平均年齡為（51.25±0.89）歲。三組對象一般資料逐項比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1標本采集 指導患者清晨晨起后，取深咳膿性痰，并將其放置于無菌容器內(nèi)及時送檢。

1.2.2標本檢測 根據(jù)《痰涂片鏡檢標準化操作及質(zhì)量保證手冊》中相關(guān)要求，對痰涂片進行測定。取制作后抗酸桿菌染色載玻片放置在顯微鏡下方面進行觀察，并做好相關(guān)記錄，若觀察發(fā)現(xiàn)每100個視野抗酸桿菌中超過3個即可確定陽性。采用熒光定量PCR法對痰液TB-DNA進行測定。運用實時熒光定量PCR儀（羅氏診斷產(chǎn)品（上海）有限公司）與配套試劑盒，操作均嚴格按照試劑盒說明書進行。結(jié)果判定以陽性定量和陽性、陰性質(zhì)控品的Ct值作為參考。

2 結(jié)果

2.1痰涂片與TB-DNA測定結(jié)果比較 肺結(jié)核組、肺外結(jié)核組與非結(jié)核組痰TB-DNA陽性率與痰涂片陽性率比較，均更高，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.01），見表1。

2.2痰涂片與TB-DNA敏感度與特異度 肺結(jié)核組痰涂片敏感度為36.11%，特異度為100.00%；肺外結(jié)核組痰涂片敏感度為19.44%，特異度為100.00%。肺結(jié)核組TB-DNA敏感度為75.00%，特異度為77.42%；肺外結(jié)核組TB-DNA敏感度為55.56%，特異度為77.42%。肺結(jié)核組、肺外結(jié)核組TB-DNA敏感度、特異度均比痰涂片高。

3 討論

在結(jié)核病的臨床診斷中，病例檢查與細菌學檢查是公認的“金標準”。但盡管痰涂片具有較好的特異度，但其米娜敢賭卻卻非常。根據(jù)本研究結(jié)果來看，肺結(jié)核組痰涂片敏感度僅36.11%，肺外結(jié)核組痰涂片敏感度甚至只有19.44%。該結(jié)果充分證實了上述觀點。為了打破病理檢查與細菌學檢查等局限性問題，近幾年來，關(guān)于結(jié)核病的診斷技術(shù)不斷發(fā)展，其中包括免疫學和血清學診斷。但有研究者認為，結(jié)核病是一種宿主感染結(jié)核分歧桿菌后，致使機體出現(xiàn)免疫應(yīng)答的病變過程，而血清學以此為基礎(chǔ)，對血清中是否出現(xiàn)結(jié)核分歧桿菌抗體來進行判斷，這種準確性尚需進一步探討[2]。而免疫學診斷中，TST特異性較差，同樣未受到學界的共同認可。本研究在結(jié)核病診斷中，對痰涂片與TB-DNA測定結(jié)果進行對比，結(jié)果顯示，TB-DNA測定陽性率均顯著高于痰涂片，且敏感性與特異度也均顯著高于痰涂片。這表明，TB-DNA是一種敏感度與特異度均較高的測定方法。

綜上所述，本研究通過對比證實，痰涂片與TB-DAN在結(jié)核病診斷中均具有一定的應(yīng)用價值，但相對來說，TB-DAN的敏感度和特異度更高。但需要注意的是，TB-DAN在測定中極易因采樣、試劑等污染致使結(jié)果出現(xiàn)誤差，為此，在實際運用中，建議與其他診斷方法聯(lián)合運用，并加強無菌操作管理，以此來提高結(jié)核病的診斷準確性。

參考文獻：

[1]Huang Hongli， Li Xiaofei， Liang Guiliang， et al. Evaluation of the clinical application of the three methods for the detection of tuberculosis [J]. Journal of Tropical Medicine，2015，14 （1）：40-41，65.

[2]Huang Limei， Lin Jianxiong， Peng Dongdong， et al. Study on the rapid diagnosis of tuberculosis and multi drug resistant tuberculosis by combined detection technology[J]. Journal of the Chinese Journal of pathogenic biology， 2015，27（7）：638-641.

編輯/羅茗柯