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      常見驅(qū)鳥劑成分檢測與最佳組合初探

      2016-05-30 06:09:12趙永健崔國發(fā)劉潤澤曲宏黃三祥
      南方農(nóng)業(yè)學報 2016年2期
      關(guān)鍵詞:正交試驗

      趙永健 崔國發(fā) 劉潤澤 曲宏 黃三祥

      摘要:【目的】確定常見驅(qū)鳥劑的有效成分及其安全性,并通過正交試驗篩選出最佳的驅(qū)鳥成分組合,為驅(qū)鳥劑成分研究及合理搭配提供參考依據(jù)。【方法】綜合GC-MS、IR、1H-NMR、XRF等方法對常見的11種驅(qū)鳥劑進行定性定量檢測,并以灰鴿子為研究對象,選取有效成分鄰氨基苯甲酸甲酯、肉桂醛、樟腦油及輔助成分脂肪醇聚氧乙烯醚(AEO-3)進行4因素4水平的正交試驗,驗證不同效應因子的驅(qū)避效果?!窘Y(jié)果】從11種驅(qū)鳥劑中共檢測出30種成分,包含了13種有效成分和17種輔助成分。正交試驗結(jié)果顯示,不同驅(qū)鳥劑組合對灰鴿子的驅(qū)避保有率在23.27%~84.91%,對驅(qū)鳥有效性的影響排序為:鄰氨基苯甲酸甲酯>肉桂醛>樟腦油>AEO-3,其中鄰氨基苯甲酸甲酯和肉桂醛對驅(qū)鳥有效性的影響達顯著水平(P<0.05),而樟腦油與AEO-3對驅(qū)鳥效果的影響不顯著(P>0.05)。最佳的驅(qū)鳥劑組合為鄰氨基苯甲酸甲酯45 mL/L、肉桂醛10 mL/L、樟腦油5 mL/L、AEO-3乳化劑0.5 mL/L,其驅(qū)避保有率為84.91%?!窘Y(jié)論】按不同成分和劑量搭配的驅(qū)鳥劑組合具有不同的驅(qū)鳥效果,生產(chǎn)中可適當增加鄰氨基苯甲酸甲酯、肉桂醛的劑量以提高驅(qū)鳥效果。

      關(guān)鍵詞: 驅(qū)鳥劑;成分檢測;最佳組合;正交試驗;驅(qū)避保有率

      中圖分類號: S482.56 文獻標志碼:A 文章編號:2095-1191(2016)02-0306-06

      0 引言

      【研究意義】近年來,隨著國民環(huán)保意識的增強,人們對鳥類的保護力度逐漸加大,鳥類數(shù)量有所增加。農(nóng)藥類殺蟲劑的大量使用有助于減少農(nóng)作物及苗木生產(chǎn)的害蟲數(shù)量,但鳥類可選擇的食源也隨之減少,大量的鳥類開始侵害玉米、稻谷、果蔬等農(nóng)作物,導致農(nóng)業(yè)鳥害陡增(余韻,2011;李財厚等,2013)。Jackson(1968)通過調(diào)查得知,在美國加利福尼亞州每年因鳥害造成的經(jīng)濟損失為300萬~400萬美元。據(jù)統(tǒng)計,全世界的山鳥在一年內(nèi)可吞食1500萬t糧食,這些糧食足以養(yǎng)活世界9000萬人口。在這種背景下,市面上各類驅(qū)鳥劑應運而生,但此類產(chǎn)品大多缺乏相關(guān)成分說明,對其有效成分、安全性、有效性研究較少。因此,檢測市面上常見驅(qū)鳥劑的成分,分析評價其安全性,對規(guī)范驅(qū)鳥劑行業(yè)的發(fā)展具有重要意義?!厩叭搜芯窟M展】驅(qū)鳥劑主要通過刺激鳥類的味覺感官達到驅(qū)鳥目的。林翔云(2011)對植物源動物驅(qū)避劑進行分析,發(fā)現(xiàn)純種芳樟葉油、草果油、肉桂油、乙酸芐酯、花椒油等配制的驅(qū)鳥劑驅(qū)鳥效果良好。目前市場上已有的驅(qū)鳥劑可分為原油驅(qū)鳥劑、顆粒驅(qū)鳥劑、粉劑驅(qū)鳥劑、水劑驅(qū)鳥劑、膏劑驅(qū)鳥劑等(熊文江等,2009)。大多數(shù)驅(qū)鳥劑的產(chǎn)品標簽上會注明該產(chǎn)品為純天然無公害的生物試劑,布點使用,能緩慢持久地釋放出一種影響鳥類神經(jīng)和呼吸系統(tǒng)的特殊清香氣味,鳥雀聞后即會飛走,在其記憶期內(nèi)不會再來(王興民等,2012;楊金琛等,2012;魏耀鋒等,2012)。驅(qū)鳥劑使用方法簡單,驅(qū)鳥效果顯著,但產(chǎn)品的主要成分及含量極少注明。部分專家認為,很多驅(qū)鳥劑登記為香料制劑且執(zhí)行衛(wèi)生標準,不屬于農(nóng)藥范疇(黃越,2011),但也有專家認為驅(qū)鳥劑應盡快進入研究開發(fā)之列,相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)研究與國外尚存在較大差距(張一賓,1998)。此外,有些驅(qū)鳥劑時效短,且易造成果品的化學殘留,存在安全隱患(王丹,2011)。【本研究切入點】目前,國內(nèi)對驅(qū)鳥劑的成分及有效性研究較少,缺乏相關(guān)的行業(yè)標準與監(jiān)管機制,針對驅(qū)鳥劑組合搭配的研究也鮮見報道?!緮M解決的關(guān)鍵問題】檢測常見驅(qū)鳥劑中的成分與含量,確定其有效成分及進行安全性分析,并通過正交試驗研究驅(qū)鳥劑成分組合對灰鴿子取食驅(qū)避效果的影響,篩選出最佳組合,以期為驅(qū)鳥劑成分研究及合理搭配提供參考依據(jù)。

      1 材料與方法

      1. 1 試驗材料

      選取目前市場上銷量較高、用戶使用評價較好的11種驅(qū)鳥劑產(chǎn)品。根據(jù)驅(qū)鳥劑物質(zhì)狀態(tài),可分為液態(tài)驅(qū)鳥劑(L)和固態(tài)驅(qū)鳥劑(S)。對11種驅(qū)鳥劑進行分類編號:L01(巨地驅(qū)鳥劑)、L02(格林驅(qū)鳥劑)、L03(多爾護果驅(qū)鳥劑)、L04[EUTRA(德國)新型野生動物驅(qū)趕劑]及S01(艾豐太陽花驅(qū)鳥先鋒)、S02(鳥飛盡驅(qū)鳥博士)、S03[兔鼠(禽)一聞避粉劑]、S04(新勵顆粒驅(qū)鳥劑)、S05(韓國農(nóng)創(chuàng)Dr.B.A.T.C驅(qū)鳥顆粒)、S06(鳥怯膏狀驅(qū)鳥劑)、S07(好美特驅(qū)鳥濕巾)。主要儀器設(shè)備:GC-MS測試儀(島津GCMS-QP2010Ultra)、色譜Rtx-5MS柱[30 m×0.25 mm(id)×0.25 μm]、IR測試儀(Nicolet 5700)、1H-NMR解析儀(ANCE III HD 400)和XRF檢測儀(EDX8300H)。

      1. 2 分離取樣

      液體樣品:(1)旋蒸。取適量液體(5~8 g)于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上加熱旋蒸(水浴加熱至70~80 ℃),得到樣品中的高沸組分。(2)蒸餾。取適量液體(15~25 g)于常壓蒸餾裝置中蒸餾,按不同沸點收集樣品中各段液體組分,蒸餾采用油浴加熱,最高溫200 ℃。(3)難以通過上述兩種方法分離的樣品,則通過自制柱色譜或薄層色譜分離樣品組分。固體樣品采用溶劑分步提?。喝?~2 g樣品,經(jīng)一系列不同極性溶劑依次提?。ǖ湫腿軇橐宜嵋阴?、二氯甲烷、丙酮、甲醇、水、酸水等),分別得到各段溶出物。所有分離后的樣品均在900 ℃下灼燒3 h,分析無機鹽含量。

      1. 3 定性定量方法

      綜合GC-MS、IR、1H-NMR、XRF等方法進行定性分析,同時綜合理化分析及GC-MS、1H-NMR、XRF等方法進行定量分析。如GC-MS定性定量:未知化合物質(zhì)譜圖經(jīng)計算機檢索,同時與NIST Library和Wiley Library兩個質(zhì)譜庫相匹配,并結(jié)合人工圖譜解析及資料分析對不同驅(qū)鳥劑樣品的總離子流圖(圖1)進行處理,按峰面積歸一化法測定各組分的百分含量(馬國玲等,2011;劉仲等,2014)。

      1. 4 正交試驗

      選取常見驅(qū)鳥劑中使用率較高的3種有效成分(鄰氨基苯甲酸甲酯、肉桂醛和樟腦油)為驅(qū)鳥原劑,因這3種有效成分均難溶于水,須使用HLB值為6~7的脂肪醇聚氧乙烯醚(AEO-3)作為W/O型乳化劑。將以上成分作為驅(qū)鳥組合的搭配因素,開展4因素4水平的正交試驗(表1)。試驗動物為市場上購買的12羽灰鴿子,將體型大小接近的2羽灰鴿子作為一個試驗組放入同一只籠子,共分成6組?;\子規(guī)格60 cm×40 cm×40 cm,每個籠子放置兩個食槽和一個飲水碗。試驗前正常投喂鴿子料(以玉米為主,摻雜少量豌豆、白豆、紅高粱等雜糧)和清水3 d。

      每個籠子中設(shè)有一個食槽為空白對照食槽,每天加入鴿子料50.0 g;另一個食槽為試驗食槽,每天將混合好的驅(qū)鳥組合噴灑到50.0 g鴿子料上,約晾曬5 min后加入試驗食槽,籠內(nèi)清水保持充足。早上喂食時間為7:00,晚上19:00時稱量每個食槽剩余的鴿子料。記錄試驗組和對照組的平均取食量,并計算當天的驅(qū)避保有率(%):

      驅(qū)避保有率(%)=×100

      每天清洗食槽并晾干,并在第2 d喂食前調(diào)換兩個食槽的位置。試驗期間記錄鴿子每天的行為狀態(tài)情況,試驗前后分別對12羽灰鴿子進行稱重。

      1. 5 統(tǒng)計分析

      試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2010進行整理,以SPSS 19.0軟件對正交試驗結(jié)果進行單因素方差分析。

      2 結(jié)果與分析

      2. 1 驅(qū)鳥劑成分含量與有效成分

      由表2可知,從11種驅(qū)鳥劑中共檢測出30種不同的化合物與混合物,包含了13種有效成分和17種輔助成分(主要根據(jù)物質(zhì)揮發(fā)性與用途判斷)。其中,有8種驅(qū)鳥劑中含有鄰氨基苯甲酸甲酯(C8H9NO2),占總檢測樣品量的72.7%;有7種驅(qū)鳥劑中含有樟腦油(主要成分為樟腦,C10H16O),占總檢測樣品量的63.6%;有3種驅(qū)鳥劑中含有肉桂醛(C9H8O),占總檢測樣品量的27.3%。這3種成分為驅(qū)鳥劑的主要有效成分,而諾香草胺、苯甲地那銨、冰片、鄰苯二甲酸二甲酯、水楊酸甲酯、環(huán)己酮、甲苯、萘、叔丁醇、桉葉油醇等有效成分僅包含在1~2種驅(qū)鳥劑中。

      其余17種輔助成分(非有效成分)包括水、乙二醇單丁醚,吐溫-80、十二烷基苯硫酸鈉、月桂酸甲酯、棕櫚酸甲酯、AEO-3、脂肪醇聚氧乙烯醚(AEO-9)、聚酯纖維、凡士林、膨潤土、硅酸鈣、碳酸鈣、磷酸鋁、三乙醇胺硼酸鹽、碳黑和紅色染料,其充當?shù)淖饔脼榛钚詣⑷榛瘎?、緩釋載體、染料、溶劑等。

      2. 2 有效成分的相關(guān)說明

      在所有的有效成分中,多數(shù)是通過刺激鳥類嗅覺與味覺感官而達到驅(qū)鳥目的,主要是由于鳥類不同于大多數(shù)哺乳動物,在其舌頭背部表面通常缺少味覺乳頭和味蕾(Ganchrow et al.,1993),但某些鳥類偶爾也能有效識別苦味食物(Roura et al.,2012)。諾香草胺和苯甲地那銨常溫下均為固體,不具有揮發(fā)性,更適用于驅(qū)避哺乳動物,如小型的嚙齒類動物等;其他有效成分主要通過具有揮發(fā)性的特質(zhì)而影響鳥類進食。13種驅(qū)鳥劑有效成分的來源、急性毒性與安全性說明及基本用途詳見表3。

      2. 3 最佳驅(qū)鳥劑成分組合篩選結(jié)果

      由表4可知,鴿子對各試驗組的取食量明顯低于其對照組,驅(qū)避保有率在23.27%~84.91%。各單因素方差分析結(jié)果及其極差也存在差異,說明鄰氨基苯甲酸甲酯、肉桂醛、樟腦油、AEO-3等4個因素在單因素條件下對灰鴿子的取食均產(chǎn)生了一定影響,降低了鴿子的取食量。

      對正交試驗結(jié)果進行方差分析,結(jié)果(表5)發(fā)現(xiàn)各因素對驅(qū)鳥有效性的影響排序為:A>B>C>D,且鄰氨基苯甲酸甲酯(P=0.014)和肉桂醛(P=0.041)對驅(qū)鳥有效性的影響達顯著水平(P<0.05),而樟腦油(P=0.105)與AEO-3(P=0.152)對驅(qū)鳥效果的影響不顯著(P>0.05,下同),說明按不同成分和劑量搭配的驅(qū)鳥劑組合,其驅(qū)鳥效果也存在一定差異。

      由表4的極差分析結(jié)果可知,A、B、C、D各因素選取的最佳水平為A4B3C1D4,即鄰氨基苯甲酸甲酯濃度45 mL/L,肉桂醛濃度10 mL/L,樟腦油0 mL/L,AEO-3為2.0 mL/L。但對正交試驗結(jié)果進行3次重復驗證試驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn)A4B3C1D4組合的驅(qū)避保有率均低于正交試驗中的A4B3C3D2組合(驅(qū)避保有率為84.91%),故本研究最終確定A4B3C3D2為最佳的驅(qū)鳥劑組合,即鄰氨基苯甲酸甲酯45 mL/L,肉桂醛10 mL/L,樟腦油5 mL/L,AEO-3乳化劑0.5 mL/L。

      試驗前灰鴿子的平均重量為407.17±7.82 g,試驗后的平均重量為412.08±9.47 g,二者間無顯著差異。對灰鴿子的進食行為進行觀察,僅發(fā)現(xiàn)試驗組1和試驗組2的鴿子在第8 d有所萎靡,之后恢復正常,說明藥劑濃度的選擇對鴿子相對安全。

      3 討論

      林翔云(2011)研究表明,樟腦油僅對蚊蟲和家蠅起驅(qū)避作用,對鴿鳩等鳥類沒有影響。從本研究的正交試驗結(jié)果也發(fā)現(xiàn),隨著樟腦油濃度的增加,K值呈下降趨勢,可能是鴿子對樟腦油的味道并不敏感。此外,由于L03(多爾護果驅(qū)鳥劑)的主要成分含有環(huán)己酮、萘等致癌物質(zhì),且甲苯對人類的神經(jīng)及生殖系統(tǒng)有傷害(李衛(wèi)華,2015),因此建議消費者不要購買,同時相關(guān)部門需建立完善的驅(qū)鳥劑監(jiān)管機制及出臺相關(guān)標準。本研究對驅(qū)鳥劑安全性的評價僅從鴿子體重及其行為狀態(tài)方面進行初步探究,為得到更全面可靠的結(jié)論,今后應從鳥類行為學、味覺、嗅覺等角度進行深入研究。

      目前,國內(nèi)驅(qū)鳥劑產(chǎn)業(yè)的發(fā)展相對較混亂,其產(chǎn)品缺乏相關(guān)成分說明,研究也不夠深入,尚無針對不同野外肇事鳥類的專項研究。由于不同鳥類對不同驅(qū)鳥劑成分的反應并不一樣,且長期使用驅(qū)鳥劑,鳥類易產(chǎn)生適應性,加之高濃度藥液噴施在植物表面上,易對葉片造成灼傷(楊金琛等,2012),甚至引起鳥類死亡(劉培培等,2010)。魏耀鋒等(2012)研究發(fā)現(xiàn),驅(qū)鳥劑的作用效果還與施用時間和當?shù)靥鞖饷芮邢嚓P(guān)。因此,針對不同農(nóng)作物及不同鳥類應施用不同驅(qū)鳥劑,且達到驅(qū)鳥效果的同時需盡量節(jié)約成本,如適當在鳥類遷徙、缺乏食物的季節(jié)進行人工補食,采用語音、超聲波等綜合驅(qū)鳥防控措施,或培育抗鳥農(nóng)作物,以減少其對農(nóng)作物的破壞性。

      4 結(jié)論

      按不同成分和劑量搭配的驅(qū)鳥劑組合具有不同的驅(qū)鳥效果,生產(chǎn)中可適當增加鄰氨基苯甲酸甲酯、肉桂醛的劑量以提高驅(qū)鳥效果。

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      (責任編輯 蘭宗寶)

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