盧朝亮（山東省淄博市高青縣食品藥品監(jiān)督管理局，山東 淄博 256300）

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白靈菇液體菌種的制備應(yīng)用試驗(yàn)

盧朝亮
（山東省淄博市高青縣食品藥品監(jiān)督管理局，山東 淄博 256300）

關(guān)鍵詞白靈菇；液體菌種；麥粒菌種；菌絲長(zhǎng)勢(shì)

白靈菇（Pleurotus nebrodensis）又名白靈側(cè)耳，子實(shí)體潔白，肉質(zhì)細(xì)膩，口感脆滑，菌肉肥厚，有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及藥用價(jià)值，其產(chǎn)品在國(guó)內(nèi)外食用菌高端市場(chǎng)供不應(yīng)求。由于白靈菇的人工栽培歷史較短，且發(fā)菌、制種周期較長(zhǎng)，生物轉(zhuǎn)化率低，滿足不了市場(chǎng)的需求，而采用液體菌種發(fā)酵技術(shù)制種，有明顯的優(yōu)越性。

液體菌種具有生產(chǎn)時(shí)間短，接種方便，接種后菌絲萌發(fā)快，生長(zhǎng)迅速的特點(diǎn)。為充分發(fā)揮液體菌種的優(yōu)勢(shì)，需要找出白靈菇液體菌種的最佳培養(yǎng)時(shí)間（菌齡），避免因培養(yǎng)時(shí)間過(guò)短，菌絲生物量過(guò)少，或培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，菌絲體老化、自溶等。筆者對(duì)此進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果如下。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

白靈菇菌種由山東梁山正大食用菌研究所提供，斜面母種在冰箱中4 ℃下保藏。

母種培養(yǎng)基配方為葡萄糖2.0%，土豆15.0%，麥麩5.0%，瓊脂2.0%。將土豆切片和麥麩共煮20 min，四層紗布過(guò)濾，棄去濾渣，葡萄糖、瓊脂溶入濾液，加水至預(yù)定體積，pH值自然，0.1 MPa，121 ℃滅菌20 min。

液體培養(yǎng)基配方為豆餅粉1.0%，玉米粉2.0%，葡萄糖2.0%，酵母膏0.2%，KH2PO40.1%， MgSO40.1%，pH自然，0.1 MPa，121 ℃滅菌20 min。

麥粒培養(yǎng)基配方為麥粒99%，石灰粉1%，另加石膏粉1%，KH2PO40.1%，MgSO40.1%。用清水淘洗小麥粒2次，去除雜質(zhì)，用1%的溫石灰水浸泡12 h以上，煮沸后文火保持30 min，以麥粒煮透無(wú)白心不破皮為度，將煮好的麥粒瀝水撈出，晾至麥粒表皮無(wú)水漬為止。按照配方將各種原輔料拌勻，將配好的料裝入500 mL輸液瓶，裝至瓶肩處，清潔瓶口、瓶身，塞好棉塞，棉塞松緊適度。0.15 MPa、121 ℃保持2 h。

1.2試驗(yàn)方法

（1）母種的制 備。將白靈菇菌種活化后接至試管母種培養(yǎng)基，置于恒溫箱中24 ℃培養(yǎng)至菌絲滿管，置冰箱中4 ℃保藏備用。

（2）白靈菇菌絲體一級(jí)搖瓶菌種接種及培養(yǎng)。250 mL三角瓶（搖瓶）裝液量為100 mL，每個(gè)搖瓶接種活化過(guò)夜的白靈菇母種2塊，每塊為1 cm2，搖床轉(zhuǎn)速為150 r/min，培養(yǎng)溫度25 ℃，采用不同培養(yǎng)時(shí)間的液體菌種接種麥粒培養(yǎng)基（表1），通過(guò)菌絲長(zhǎng)速得出最佳培養(yǎng)時(shí)間。

（3）二級(jí)搖瓶菌種接種培養(yǎng)。500 mL三角瓶裝液量200 mL，每個(gè)搖瓶接種一級(jí)搖瓶菌種10 mL，搖床轉(zhuǎn)速為150 r/min，培養(yǎng)溫度24 ℃，采用不同培養(yǎng)時(shí)間的液體菌種接種麥粒培養(yǎng)基（表1），通過(guò)菌絲長(zhǎng)速得出最佳培養(yǎng)時(shí)間。

（4）不同培養(yǎng)基菌種接種培養(yǎng)。母種接麥粒培養(yǎng)基，每瓶接1 cm2大小的母種塊2塊，接10瓶；液體菌種接麥粒培養(yǎng)基，每瓶接10 mL，接20瓶；麥粒種接麥粒培養(yǎng)基，每瓶接10粒左右，接10瓶。接種后，在25 ℃、相對(duì)黑暗的條件下培養(yǎng)，觀察菌絲萌發(fā)、菌絲覆蓋料面、瓶底出現(xiàn)菌絲、滿瓶等的時(shí)間，比較不同類型的菌種在麥粒培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)表現(xiàn)。

2　結(jié)果與分析

2.1一級(jí)液體菌種的適宜菌齡

將不同培養(yǎng)時(shí)間的白靈菇一級(jí)液體菌種接入麥粒培養(yǎng)基的試驗(yàn)結(jié)果表明（表1），一級(jí)液體菌種最佳菌齡為96 h，菌絲生長(zhǎng)快、活力強(qiáng)，滿瓶時(shí)間為8天，優(yōu)勢(shì)明顯。2.2二級(jí)液體菌種的適宜菌齡

表1　白靈菇不同菌齡的一級(jí)和二級(jí)液體菌種接種后的菌絲長(zhǎng)速

將培養(yǎng)時(shí)間不同的白靈菇二級(jí)液體菌種接入麥粒培養(yǎng)基中，結(jié)果如表1所示，二級(jí)液體菌種的最佳菌齡為72 h，接種后發(fā)菌速度最快，滿瓶所需的時(shí)間最短。2.3不同類型菌種接種后的菌絲長(zhǎng)勢(shì)

麥粒培養(yǎng)基含有適宜白靈菇菌絲生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，接種后萌發(fā)的菌絲粗壯，吃料快，適應(yīng)能力強(qiáng)，菌絲發(fā)滿后用作生產(chǎn)栽培種非常適宜，且主要原料麥粒來(lái)源廣，價(jià)格低。

白靈菇液體菌種接種到麥粒培養(yǎng)基上分散度好，菌絲萌發(fā)點(diǎn)多，具有立體發(fā)菌優(yōu)勢(shì)，發(fā)菌時(shí)間遠(yuǎn)快于麥粒菌種及母種（表2）；而麥粒種菌絲粗白濃密，長(zhǎng)勢(shì)好，主要原因可能是麥粒菌種是固體菌種，麥粒內(nèi)營(yíng)養(yǎng)豐富，以麥粒菌種接種麥粒培養(yǎng)基，菌絲不需要適應(yīng)新培養(yǎng)基。

表2　不同類型菌種接種于麥粒培養(yǎng)基上的長(zhǎng)勢(shì)

3　小　結(jié)

試驗(yàn)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，不同種齡的液體菌種發(fā)菌速度存在很大的差異，其中以培養(yǎng)96 h的一級(jí)液體菌種和培養(yǎng)72 h的二級(jí)液體菌種接種于麥粒培養(yǎng)基后發(fā)菌速度快，相較于母種、麥粒種接種麥粒培養(yǎng)基，液體菌種可大大縮短發(fā)菌時(shí)間，在白靈菇的生產(chǎn)栽培種具有應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。

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作者簡(jiǎn)介：盧朝亮，男，工程師，碩士，畢業(yè)于河北大學(xué)食藥用真菌研究所，長(zhǎng)期從事食用菌菌種推廣與研發(fā)工作

中圖分類號(hào)：S646

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：2095-0934（2016）02-098-02