布日額

（內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028043）

科爾沁植被區(qū)桔梗染色體的核型分析

布日額

（內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028043）

運(yùn)用植物根尖壓片法，對桔梗的染色體數(shù)目、核型分析研究。結(jié)果表明，桔梗的染色體基數(shù)2n=18，核型公式2n=2X=6 m（2SAT）+12 sm，核型類型屬于2A型，較不對稱，為較原始類型。

科爾沁；桔梗；染色體；核型

桔梗，蒙古名浩日敦-查干，味辛、甘，性寒[1]。具有清肺熱，止咳，祛痰，排膿等功效。由于大氣自然環(huán)境的改變，對植物的多樣性帶來了巨大的影響。關(guān)于桔梗染色體的核型分析報(bào)道中染色體數(shù)目相同（2n=18），但核型公式卻不盡相同[2-3]。為此，本文對科爾沁植被區(qū)的桔梗染色體的核型分析驗(yàn)證，為桔梗遺傳多樣性的保護(hù)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用桔梗種子，該項(xiàng)目組在科爾沁植被區(qū)內(nèi)采集。

1.2 方法

1.2.1 切片制作：選取試驗(yàn)用的種子，保證其在室溫條件下發(fā)芽，等到其根尖長度大約達(dá)到1 cm時(shí)，在早上大概七點(diǎn)鐘左右進(jìn)行取樣。在0.002 mol/L的8-羥基喹啉溶液中對所取材料進(jìn)行2 h的預(yù)處理，用水進(jìn)行沖洗操作。完成預(yù)處理后，采用卡諾固定液進(jìn)行固定，時(shí)間大概為24 h，以備后續(xù)應(yīng)用。用水對所選取的固定好的材料進(jìn)行反復(fù)的沖洗，于50%的乙醇溶液中進(jìn)行半小時(shí)的處理，然后于l mol/L的鹽酸溶液中進(jìn)行1 h的處理。用水對解離材料進(jìn)行反復(fù)的沖洗，之后，于45%的醋酸溶液中進(jìn)行1 h的軟化。采用改進(jìn)的石炭酸品紅染色，采用常規(guī)根尖壓片法完成制片操作。

1.2.2 明確染色體數(shù)目：如果染色體數(shù)目＞30個(gè)細(xì)胞，其中＞85%的細(xì)胞所具有的染色體數(shù)是恒定一致的，那么能夠就此對該植物的染色體數(shù)目加以明確。

1.2.3 測量染色體：借助于顯微鏡，直接應(yīng)用接目鏡測微尺進(jìn)行測量。選取的細(xì)胞共10個(gè)，對每條染色體的長、短臂長度進(jìn)行分別的測量，對臂比值進(jìn)行計(jì)算，在掌握Levan等（l964）提出的染色體命名系統(tǒng)的基礎(chǔ)上對染色體類型加以確定[3]。

1.2.4 染色體核型分析：實(shí)施染色體核型分析時(shí)依照Stebbins（1971）的分類法則[4]，在掌握染色體的長度和臂比值的基礎(chǔ)上進(jìn)行存在于同一個(gè)細(xì)胞內(nèi)染色體的配對。在非同一細(xì)胞間進(jìn)行染色體臂值長度平均數(shù)的計(jì)算時(shí)，作為主要參數(shù)的是臂比值，被當(dāng)做第二參數(shù)的是染色體長度，目的是使誤差的發(fā)生率降低。

2 結(jié)果與分析

對中期分裂相的細(xì)胞進(jìn)行觀察和統(tǒng)計(jì)，桔梗染色體數(shù)為2n=2X=18；根據(jù)表1了解桔梗染色體參數(shù)，根據(jù)圖1了解染色體核型模式。2n=2X=6m（2SAT）+12sm為核型公式，B染色體并未發(fā)現(xiàn)。通過對Levan等的染色體分類標(biāo)準(zhǔn)加以了解和掌握，被認(rèn)定為中部著絲點(diǎn)染色體的是第5，6，9號染色體，被認(rèn)定是近中部著絲點(diǎn)染色體的是第1，2，3，4，7，8號染色體，具有隨體的是第6號染色體。染色體相對長度變化范圍為8.79～13.78，平均臂比為1.86，核型為2A型，表現(xiàn)為較不對稱性和較原始的特點(diǎn)。見表1、圖1。

表1 桔梗染色體參數(shù)

圖1 桔梗染色體核型模式

3 討 論

桔梗染色體數(shù)的核型分析，本試驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道的相關(guān)參數(shù)基本一致。本試驗(yàn)結(jié)果表明，染色體核型為2A型，核型公式為2n=2X=6m（2SAT）+12sm，具有隨體的是第6號染色體，屬于中部著絲點(diǎn)染色體共3對，屬于近中部著絲點(diǎn)染色體共6對。

[1] 李 盈,王舉濤,桂雙英,等.桔梗的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].食品與藥品,2016,18(1):72-75.

[2] 李 國 泰 .桔 梗 染 色 體 核 型 分 析 [J].內(nèi) 蒙 古 醫(yī) 學(xué) 院 學(xué)報(bào),1998,20(3):185-186.

[3] 趙 樺,楊培君,李會寧.三種藥用植物染色體組型分析[J].漢中師范學(xué)院學(xué)報(bào),2004,22(1):70-73.

本文編輯：劉欣悅

Nuclear analysis of the orange stalk of the coltham vegetation area

BU Ri-e
(The university of Inner Mongolia national university is a medical school, Inner Mongolia Tongliao 028043,China)

The chromosome number and karyotype analysis of Platycodon grandif l orum were studied by using the method of root tip compression.The results showed that the chromosome number2n=18,the karyotype formula 2n=2X=6m(2SAT)+12sm,and the karyotype type belonged to 2A type,which were more asymmetric than the original type.

Horqin;Platycodon grandif l orum;Chromosome;Karyotype

S567.239

A

ISSN.2095-6681.2016.33.28.02

內(nèi)蒙古自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（2013ZD11）