IL-15與腫瘤治療的研究進(jìn)展①

羅　信　吳淑云　王凌云

(中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院消化內(nèi)科，廣州510120)

IL-15與腫瘤治療的研究進(jìn)展①

羅信吳淑云王凌云

(中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院消化內(nèi)科，廣州510120)

早在1994年，IL-15就被作為刺激T細(xì)胞復(fù)制的細(xì)胞因子被發(fā)現(xiàn)[1]，IL-15屬于4-螺旋束細(xì)胞因子家族，作為一種可溶性細(xì)胞因子，在NK細(xì)胞、T細(xì)胞和B細(xì)胞的復(fù)制和分化都起著重要作用[2]。而腫瘤的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移的過程離不開淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，IL-15增強(qiáng)T細(xì)胞分化增值和B細(xì)胞分泌抗體等特性，對(duì)于增強(qiáng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫應(yīng)答起著關(guān)鍵作用。本課題組前期研究了胃癌組織中免疫反應(yīng)的抑制受體PD-L1/PD-1的表達(dá)情況，這種抑制通路在T細(xì)胞激活的情況下激發(fā)，誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的免疫抑制功能[3]，并且可能在腫瘤的免疫逃逸中起關(guān)鍵作用[4]，而應(yīng)用IL-15更可以在CD8+T細(xì)胞表面上調(diào)PD-1的表達(dá)，這相應(yīng)地抑制了免疫反應(yīng)的增強(qiáng)，我們設(shè)想通過阻斷這一抑制受體通路來增強(qiáng)IL-15的效應(yīng)，探究并分析其在腫瘤治療中的作用、評(píng)估其作為協(xié)同治療因子的價(jià)值。IL-15作為腫瘤治療的前景因子近年來被用于腫瘤治療的研究并取得進(jìn)展，相關(guān)的多項(xiàng)Ⅰ、Ⅱ期臨床試驗(yàn)(NCT01021059、NCT01337544等)已經(jīng)完成，而且更多的研究正在開展中。就目前的荷瘤動(dòng)物和人體上的研究而言，IL-15的應(yīng)用價(jià)值已經(jīng)貫穿了腫瘤治療的前期預(yù)防、治療作用和預(yù)后評(píng)估，本文就IL-15在這些方面的研究進(jìn)展作一綜述。

1IL-15及IL-15R的結(jié)構(gòu)及信號(hào)通路

人源IL-15具有4-螺旋束結(jié)構(gòu)，分子量為14-15 kD，含有114個(gè)氨基酸，主要在單核細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞合成。其由單基因編碼，定位于染色體4q31，含有8個(gè)外顯子[2]。IL-15主要通過和IL-15R三聚體復(fù)合物結(jié)合發(fā)揮作用，其中的β鏈和IL-2Rβ相同而γ鏈則和IL-2、4、7、9、21的Rγ共用，這提示了這些細(xì)胞因子之間功能的相互聯(lián)系。IL-15與在抗原提呈細(xì)胞上表達(dá)的高親和力α受體結(jié)合并呈遞到IL-2/15Rβγ二聚體。在生成細(xì)胞內(nèi)，IL-15Rα與IL-15在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合并經(jīng)高爾基體傳遞到包膜，反式呈遞到膜表達(dá)IL-2/15Rβγc的效應(yīng)細(xì)胞，引起效應(yīng)細(xì)胞內(nèi)的通路激活。反式呈遞是IL-15發(fā)揮功能的主要機(jī)制，此外還有IL-15Rα和IL-2/15Rβγc在同一個(gè)細(xì)胞膜上的順式呈遞方式等[5]。

IL-15與在抗原提呈細(xì)胞上表達(dá)的高親和力α受體結(jié)合并呈遞到IL-2/15Rβγ二聚體，然后可有三條通路被激活：JAK1/STAT3、JAK3/STAT5，STAT磷酸化后激活核內(nèi)轉(zhuǎn)錄；募集Shc并激活Grb2，經(jīng)過PI3K途徑最終激活A(yù)kt，又或者繞過PI3K途徑結(jié)合SOS并激活RAS-RAF，最終激活MAPK。以上的途徑都向著一個(gè)方向：細(xì)胞的增殖和維持?？偨Y(jié)起來就是：增生信號(hào)的增強(qiáng)——JAK/STAT,Ras/MAPK；凋亡信號(hào)的減弱——Bcl-2、Bcl-Xl(抗凋亡蛋白)的上調(diào)，Bim、Puma(促凋亡蛋白)的下調(diào)[6,7]。而在表達(dá)水平，IL-15的作用體現(xiàn)在其促進(jìn)細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞(CTL)的和NK細(xì)胞的增生和活化的上，此外，IFN-γ、TNF-α分泌水平也有顯著提升。見圖1。

圖1　IL-15的信號(hào)通路示意圖Fig.1　Signaling pathway of IL-15Note: ①Trans-presentation of IL-15;②Intracelluler pathway of IL-15.

2IL-15用于篩查腫瘤、病情判斷、評(píng)價(jià)預(yù)后

人源IL-15 mRNA可存在于許多組織和細(xì)胞中，組織有胎盤、骨骼肌、肺、腎、心等，細(xì)胞包括纖維母細(xì)胞、上皮細(xì)胞、角化細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等，但I(xiàn)L-15卻僅在有限的幾種細(xì)胞中分泌和表達(dá)，主要是樹突狀細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞。這種IL-15的mRNA和其表達(dá)不一致的現(xiàn)象可歸因于上游的轉(zhuǎn)錄后檢查點(diǎn)對(duì)翻譯的抑制[6]。而對(duì)于腫瘤患者，這種IL-15在不同組織分布的不平衡性和相較于健康人的水平差異則有一定的診斷價(jià)值。在不同的腫瘤患者中，IL-15有不同的表達(dá)部位和水平。作為炎癥因子的IL-15在多種腫瘤中呈高表達(dá)，多發(fā)性骨髓瘤惡性骨髓細(xì)胞表達(dá)IL-15R的全部三種亞基[8]，皮膚T細(xì)胞淋巴瘤(CTCL)患者皮損和外周血T細(xì)胞表達(dá)IL-15mRNA和蛋白[9]，大顆粒淋巴細(xì)胞(LGL)白血病患者血清有可溶性 IL-15Rα的升高、IL-2/15Rβγ的組成性表達(dá)和白血病細(xì)胞中存在膜型的IL-15[10]。

Porrata等[11]在50名非霍奇金淋巴瘤患者中檢測并評(píng)估細(xì)胞因子譜，發(fā)現(xiàn)在病人自體外周血干細(xì)胞移植(APHSCT)后第15天IL-15≥76.5 pg/mL者擁有更高的總體生存率OS和更長的無進(jìn)展生存期PFS，而多變量分析提示僅有NK-15(APHSCT第15天NK細(xì)胞水平)是生存率的預(yù)后因素，提示IL-15提高生存率的作用很可能與增強(qiáng)APHSCT后NK細(xì)胞的恢復(fù)有關(guān)。Thiant等[12]挑選40名完全緩解期的血液系統(tǒng)惡性腫瘤病人，都是骨髓抑制下的完全HLA配對(duì)(10/10)的骨髓移植，前瞻性地檢測血漿IL-7 和IL-15水平，發(fā)現(xiàn)后續(xù)急性GVHD發(fā)生和分級(jí)都和14+天IL-7 和IL-15水平的增高有密切關(guān)系。惡性腫瘤的復(fù)發(fā)則和14+天的IL-15水平下降密切相關(guān)。Pratt等[13]研究造血細(xì)胞移植后的慢性GVHD也得出了相似的結(jié)論。

盡管較早前的研究表示在非血液惡性腫瘤中，IL-15在血清的平均表達(dá)水平和正常人無異[14]，其對(duì)于實(shí)體腫瘤的預(yù)后評(píng)估甚至早期腫瘤篩查方面卻被證實(shí)有意義。Zhou等[15]在隊(duì)列研究中發(fā)現(xiàn)乙肝相關(guān)肝細(xì)胞癌術(shù)后患者在肝臟癌周組織中高水平的IL-2和IL-15與肝癌復(fù)發(fā)率的減少和生存期的延長高度相關(guān)，這提示以上細(xì)胞因子在病人的預(yù)后分組方面有重要意義。Mengus等[16]通過比較良性前列腺增生BPH和1到2c期早期前列腺癌PCA患者的血清細(xì)胞因子的表達(dá)和蛋白滴度發(fā)現(xiàn)IL-7和IL-15在早期PCA患者血清中表達(dá)的增加，提供了一種通過血清細(xì)胞因子滴度測定從良性增生中篩查出早期PCA的方法。

3腫瘤的治療

應(yīng)用于人類的研究目前已進(jìn)行了重組人IL-15(rhIL-15)治療和血液系統(tǒng)腫瘤的過繼細(xì)胞治療的Ⅰ、Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段。rhIL-15具備成熟的制備技術(shù)，并且經(jīng)荷瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)了其抗瘤效果[17]。在第一次人體上應(yīng)用rhIL-15的Ⅰ期臨床試驗(yàn)中，轉(zhuǎn)移性腎癌和黑色素瘤患者上rhIL-15都能安全地應(yīng)用，并且通過外周流式細(xì)胞術(shù)檢測到顯著的NK細(xì)胞和記憶CD8+T細(xì)胞增長，然而在超過 0.3 μg/kg 每天的大劑量療法中檢測到低血壓、血小板減少和轉(zhuǎn)氨酶升高的副反應(yīng)，確定了可耐受的最大劑量值[18]。 而IL-15在荷瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中則有多種應(yīng)用形式，包括制備腫瘤疫苗、轉(zhuǎn)染過繼細(xì)胞、轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞等，還有多種聯(lián)合治療方法，與單克隆抗體、化療藥物、細(xì)胞因子、免疫抑制劑等聯(lián)合治療。

3.1腫瘤疫苗腫瘤疫苗已在乳腺、前列腺、胰腺癌和白血病(細(xì)胞)上證實(shí)具有良好的抗腫瘤免疫效應(yīng)，這些疫苗在提高腫瘤病人的生存時(shí)間上卓有功效。其中，Morris等[19]使用腺病毒載體構(gòu)建了共表達(dá)IL-15和IL-15Rα的TRAMP-C2 前列腺癌細(xì)胞或者TS/A 乳腺癌細(xì)胞，在經(jīng)絲裂霉素C處理后接種于小鼠，接受此疫苗平臺(tái)接種小鼠在遭受腫瘤打擊的時(shí)候可獲得更高的生存率。而且，實(shí)驗(yàn)中NK細(xì)胞或者CD8+T細(xì)胞的耗竭使IL-15或IL-15Rα誘導(dǎo)的腫瘤抑制作用減弱，提示了兩者在腫瘤抑制中的地位。

樹突狀細(xì)胞DC是人免疫系統(tǒng)的最典型的抗原提呈細(xì)胞，除了提呈腫瘤抗原外也被證明具有殺傷腫瘤的能力，這種多功能的特點(diǎn)使其成為腫瘤免疫治療的新工具。Anguille等[20]以IL-15誘導(dǎo)單核細(xì)胞來源的DC并證明了其擁有除提呈腫瘤抗原能力外的殺瘤能力，當(dāng)提供腫瘤抗原特異T細(xì)胞的情況下，培育的IL-15 DCs 可以誘導(dǎo)人類K562 腫瘤細(xì)胞系的凋亡。IL-15 DCs的細(xì)胞毒性主要由顆粒酶B及TRAIL(小范圍內(nèi))介導(dǎo)，與穿孔蛋白、Fas配體、TNF-α則相獨(dú)立。而Hira等[21]在轉(zhuǎn)移性淋巴瘤的完整抗原的存在下構(gòu)建了重組IL-15的DC，處理組的Kaplan Meier估計(jì)顯示相比對(duì)照組獲得更高的生存率。Gatza等[22]則認(rèn)為IL-15不能增強(qiáng)對(duì)腫瘤的細(xì)胞免疫反應(yīng)，并對(duì)提高接種疫苗小鼠荷瘤生存率沒有顯著作用，實(shí)驗(yàn)者把相反結(jié)論的獲得歸因于IL-15的協(xié)同增強(qiáng)免疫能力必須要在已有腫瘤特異的CD8+T細(xì)胞條件下發(fā)揮作用。

另一方面，一項(xiàng)針對(duì)黑色素瘤患者臨床研究表明，縮氨酸負(fù)載的朗格漢斯細(xì)胞疫苗(LCs)相比其單核細(xì)胞來源樹突狀細(xì)胞(moDC)可生成更多的IL-15并在不施加外源性IL-15的情況下通過溶細(xì)胞IFN-γ原件激發(fā)更多的抗原特異淋巴細(xì)胞。低劑量的IL-15可使DCs在3、4周的時(shí)間內(nèi)刺激生成5到6倍多的腫瘤抗原特異效應(yīng)記憶T(EMRA)細(xì)胞，而IL-2可與IL-15在moDC刺激溶細(xì)胞T細(xì)胞作用中起協(xié)同作用[23]。

DC(或其來源的)疫苗注射后的NK細(xì)胞反應(yīng)在抗瘤效應(yīng)中起到重要作用，而且DC疫苗也在前期研究中被證明可以有效地激活NK細(xì)胞，因此Boudreau等[24]制備了感染VSV-DeltaM51的DC并證明使用toll樣受體(TCR)和感染VSV-DeltaM51都可以誘導(dǎo)DC細(xì)胞成熟。研究中只有感染VSV-DeltaM51的DC具有抑制腫瘤的作用，而單純TCR處理則不能抑制腫瘤，提示IFN I在DC抑制腫瘤中的重要作用，而通過感染IL-15-/-骨髓來源的DCs并使之和幼稚NK細(xì)胞共培養(yǎng)，并在共培養(yǎng)之前使用抗體封閉IL-15受體β鏈以確認(rèn)，發(fā)現(xiàn)對(duì)于溶瘤NK細(xì)胞的激活來說DC產(chǎn)生的IL-15同樣不可或缺。

3.2基因治療免疫系統(tǒng)具有識(shí)別和清除腫瘤抗原的能力，但在腫瘤發(fā)生時(shí)免疫系統(tǒng)的反應(yīng)往往作用不足，免疫系統(tǒng)的無能也正是腫瘤發(fā)生發(fā)展的因素之一。細(xì)胞因子如IL-2、IL-12、IL-15、IFN-γ和TNF-α等則具有不同的增強(qiáng)免疫效應(yīng)的能力，因此這些細(xì)胞因子在腫瘤治療策略中具有研究意義。但如果全身給藥，在達(dá)到抗瘤效應(yīng)的細(xì)胞因子濃度時(shí)，往往伴隨著很多嚴(yán)重的副作用[25,26]，而且IL-15作為一種人體自體分泌的因子，其半衰期短，而且其分子小的特點(diǎn)致腎臟清除率高，過去曾經(jīng)使用過每天多次注射給藥的方法，在方法上極其不便[27,28]。而在IL-15的作用機(jī)制上，IL-15信號(hào)通路必須經(jīng)過一個(gè)結(jié)合IL-15Rα的反式遞呈機(jī)制[29]，因此單純應(yīng)用重組IL-15同樣在腫瘤治療上受限。細(xì)胞因子的基因治療正好彌補(bǔ)了以上不足?；蛑委煹陌邢蛐蕴攸c(diǎn)使得藥物濃度集中于靶點(diǎn)，而不會(huì)造成全身的毒副作用，在應(yīng)用上有更廣闊的天地。

IL-15轉(zhuǎn)染細(xì)胞可以通過不同的載體得以實(shí)現(xiàn)。較早前在動(dòng)物模型上有研究者運(yùn)用了腺病毒載體表達(dá)IL-15基因，在小鼠肺癌模型并獲得較好的效果。Liu等[30]構(gòu)建了CCL20/IL-15 雙順反子腺病毒，并在小鼠模型體內(nèi)外協(xié)同表達(dá)CCL20和IL-15，使淋巴細(xì)胞產(chǎn)生了腫瘤特異的殺傷T細(xì)胞，促進(jìn)了IFN-γ的釋放，并在動(dòng)物模型中檢測到腫瘤生長的減少。

然而由于腺病毒載體本身的毒性和所造成的炎癥反應(yīng)，對(duì)人的基因治療則要另辟蹊徑[31]。 安全性更優(yōu)的病毒載體rAAV2得到了研究者們的關(guān)注[32,33]。Yu等[34]先用PCR擴(kuò)增hIL15的EcoRⅠ和 BamHⅠ位點(diǎn)，然后把擴(kuò)增的hIL15 cDNA 插入pAAV-MCS 的EcoRI和BamHⅠ之間，以生成pAAV-hIL15質(zhì)粒，然后利用腺相關(guān)病毒包裝系統(tǒng)(help-free system)制備rAAV2-hIL15載體并用于JC乳腺癌移植瘤，取得腫瘤發(fā)生和發(fā)展時(shí)間延遲和荷瘤小鼠生存時(shí)間的延長的效果[34]。到了2012年，同一課題組成員使用類似方法，制備rAAV-2-hIL15，并用于SV40 T/t 抗原誘導(dǎo)乳腺癌小鼠模型，增強(qiáng)LAK細(xì)胞殺傷活性并可同樣延緩腫瘤細(xì)胞生長，并最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡[35]。對(duì)于腫瘤免疫治療方面，在淋巴細(xì)胞刪除的預(yù)處理下過繼T細(xì)胞治療已取得了重要進(jìn)展[36,37]。而逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)則可以有效地增強(qiáng)轉(zhuǎn)染的效率。Lv等[38]為了檢測CD4+T細(xì)胞是否在腫瘤免疫起關(guān)鍵作用，使用逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)IL-15在Ova特異的CD4+T 細(xì)胞上的表達(dá)，并導(dǎo)致了抗原特異的CD4+T細(xì)胞選擇性的擴(kuò)增，并在活體上證實(shí)了抑瘤能力。

許多臨床前期模型和臨床試驗(yàn)(NCT00289016，NCT00028158等)表明溶瘤細(xì)胞病毒同樣是一種安全的有效的腫瘤治療方法，而水皰性口炎病毒(VSV)就其中的一種。Stephenson等[39]通過在VSV中插入高分泌型hIL-15以增強(qiáng)溶瘤細(xì)胞病毒的殺瘤毒性，被轉(zhuǎn)染的CT-26腫瘤細(xì)胞局部表達(dá)IL-15明顯增強(qiáng)，并導(dǎo)致抗瘤的T細(xì)胞反應(yīng)增強(qiáng)和生存率的提高，而額外的全身性給與IL-15則不能提高療效。

而非病毒載體則從根本上減少了免疫原性和引起的炎癥反應(yīng)。聚乙烯亞胺聚合物PEI能防止DNA降解，但卻其細(xì)胞毒性卻隨著轉(zhuǎn)染率的增高而上升，因此研究者們在給其轉(zhuǎn)載上肝素，形成低細(xì)胞毒性的HPEI納米凝膠，形成了有效非病毒基因轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，近年來此系統(tǒng)也被用于IL-15的基因轉(zhuǎn)染。Zhou等[40]制備了納米凝膠HPEI-pIL-15復(fù)合物并用于B16-F10 黑色素瘤和CT26結(jié)腸癌的肝臟轉(zhuǎn)移瘤。獲得腫瘤指數(shù)降低，血清中NK細(xì)胞、TNF-α和IFN-γ水平的升高，并可觀測到淋巴細(xì)胞殺傷活性的增強(qiáng)。

3.3聯(lián)合治療IL-2,IL-15和 IL-7 都可以通過連接表達(dá)在NK細(xì)胞上的具有共同g鏈的多聚受體刺激細(xì)胞的激活、復(fù)制或者存活。而且它們也和NK細(xì)胞的分化相關(guān)。于是，Decot等[41]期望通過比較以上三種細(xì)胞因子單獨(dú)或者聯(lián)合應(yīng)用，以探索最佳選擇和劑量。他們通過CD3/CD19刪除的方法培育刪除B、T細(xì)胞的NK細(xì)胞，然后用不同劑量培養(yǎng)最終發(fā)現(xiàn)IL-2和IL-15的最適劑量，然而研究并沒有支持相互之間的協(xié)同作用。而不單獨(dú)分離NK細(xì)胞又是另一種情況，對(duì)于抗原激活的腫瘤引流淋巴結(jié)(DLN)淋巴細(xì)胞，Cha等[42]則發(fā)現(xiàn)IL-7/15聯(lián)合應(yīng)用比單獨(dú)應(yīng)用IL-2能使B/I激活的T細(xì)胞的復(fù)制加快加長，產(chǎn)生更高比例的CD8+T 細(xì)胞，更多中央記憶型T細(xì)胞，提升活體中抗4T1乳腺癌能力。此外亦有IL-2和IL-15在人肺腺癌上聯(lián)合應(yīng)用[43]。4-1BBL 作為共刺激分子TNF 超家族的成員，主要表達(dá)于活化的B 細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等抗原提呈細(xì)胞表面，Kermer等[44]構(gòu)建了一個(gè)含有腫瘤特異重組抗體、連接有IL-15的IL-15Rα 鏈和4-1BBL胞外域的三功能聚合蛋白R(shí)D IL-15 scFv 4-1BBL，應(yīng)用于黑色素瘤B16-FAP,B16wt，刺激了T細(xì)胞復(fù)制、PBMC的IFN-γ釋放和激活T細(xì)胞殺傷活性，減少了腫瘤轉(zhuǎn)移。然而最近的研究卻發(fā)現(xiàn)了協(xié)同4-1BBL和IL-15的過繼NK細(xì)胞療法導(dǎo)致了移植物抗宿主病(GVHD)[45]。Yu等[46]在小鼠CT26結(jié)腸癌模型中使用IL-15聯(lián)合PD-L1抗體和CTLA-4抗體，使CD8+T細(xì)胞表面PD-1表達(dá)顯著下降，PD-1/PD-L1的負(fù)調(diào)節(jié)通路被阻斷，使CTL殺傷活性增強(qiáng)，IFN-γ分泌增多，并減少了有免疫抑制功能的細(xì)胞因子IL-10的分泌，荷瘤動(dòng)物獲得更長的生存期和更少的腫瘤肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)。通過阻斷免疫負(fù)調(diào)節(jié)通路來增強(qiáng)IL-15免疫治療效果的方法，為IL-15的聯(lián)合治療提供了新的角度。此外還有IL-15聯(lián)合其他單克隆抗體、免疫抑制劑等[47,48]。

4IL-15治療的安全性問題

IL-15基因治療效果顯著，但如果對(duì)其進(jìn)行敲除使其在細(xì)胞內(nèi)不表達(dá)，是否具有相反的效果呢？Gillgrass等[49]給了我們答案，他們分別設(shè)置了IL-15-/-,IL-15 轉(zhuǎn)基因 (TG)和IL-15/IL-15Rα處理的C57BL/6小鼠注射乳腺癌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)缺乏IL-15的IL-15-/-小鼠在所有組中腫瘤轉(zhuǎn)移指數(shù)最高，甚至高于NK細(xì)胞刪除對(duì)照小組。 表達(dá)IL-15雖然能改善生存期和減少轉(zhuǎn)移，但在體內(nèi)過度表達(dá)則是另一種情況，過往研究表明其在體內(nèi)的過表達(dá)則會(huì)直接導(dǎo)致血液系統(tǒng)的腫瘤發(fā)生[50-52]， 這對(duì)IL-15在治療安全方面又提出了新的問題。Sato等[53]使用人IL-15轉(zhuǎn)基因的小鼠模型來研究IL-15的表達(dá)是否可致白血病發(fā)生，發(fā)現(xiàn)IL-15Rα對(duì)于侵襲性的淋巴細(xì)胞的復(fù)制是必須的。并且，研究者發(fā)現(xiàn)如果對(duì)該模型人為施予干預(yù)，使需要組成性持續(xù)表達(dá)IL-15Rα的CD8+T細(xì)胞具有選擇優(yōu)勢并成為生成細(xì)胞，生長速度遠(yuǎn)大于其他淋巴細(xì)胞，則會(huì)形成一個(gè)白血病樣的內(nèi)環(huán)境。

大顆粒淋巴細(xì)胞(LGL)白血病已被證實(shí)可由IL-15的過表達(dá)而誘發(fā)[50,54,55]。Mishra等[56]發(fā)現(xiàn)了Myc介導(dǎo)下IL-15上調(diào)了極光激酶，導(dǎo)致了中心體反常和異倍體形成并通過誘導(dǎo)Myc/NF-kappaBp65/Hdac-1抑制miR-29b，導(dǎo)致Dnmt3b過表達(dá)和DNA的甲基化，闡明了過量IL-15致瘤的機(jī)制，并活體上證實(shí)了在IL-15培養(yǎng)下的野生型LGL過繼轉(zhuǎn)化可致惡變。

此外，IL-15的其他副作用包括誘導(dǎo)其他炎癥因子、參與誘導(dǎo)自身免疫病的發(fā)生、誘導(dǎo)冠心病、血象中血紅蛋白減少、中性粒細(xì)胞減少和體重下降等[5]。IL-15的安全性問題值得學(xué)者們關(guān)注并在研究中需要嚴(yán)格監(jiān)測其副作用。

5展望

IL-15從20余年前發(fā)現(xiàn)至今以來研究逐漸深入并展現(xiàn)出在腫瘤治療中的卓越前景，目前對(duì)其研究已涵蓋了篩查、預(yù)防、檢測、治療、預(yù)后等方面，并已經(jīng)在基礎(chǔ)研究逐步向臨床研究轉(zhuǎn)化。重組人IL-15治療已經(jīng)進(jìn)入了臨床試驗(yàn)階段應(yīng)用，然而因?yàn)槠涔逃械亩贪胨テ诤蛯?duì)人副作用甚至致癌的風(fēng)險(xiǎn)存在等問題，需要進(jìn)一步的研究已明確其安全性和有效性。另一方面，基因治療方面IL-15可轉(zhuǎn)染于T細(xì)胞、NK/T細(xì)胞、DC細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等，可用于疫苗的誘導(dǎo)和制備、過繼細(xì)胞療法、腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)染等。下一步的研究方向可以是提高基因轉(zhuǎn)染效率、減少載體毒性和致病性、找尋更有效的協(xié)同因子等，為人體上的應(yīng)用積累證據(jù)，并在臨床前期實(shí)驗(yàn)充分的情況下向臨床試驗(yàn)轉(zhuǎn)化。此外，尋找其他疾病或者各種腫瘤預(yù)后判斷和篩查與其之間的關(guān)系也同樣值得研究者們?nèi)ヌ剿鳌?/p>

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[收稿2015-06-22修回2015-07-15]

(編輯許四平)

doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2016.06.033

作者簡介：羅信(1990年-)，男，在讀碩士，主要從事胃腸道腫瘤臨床與基礎(chǔ)研究，E-mail:lawsonlx@qq.com。 通訊作者及指導(dǎo)教師：王凌云(1969年-)，女，博士，副主任醫(yī)師，副教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事胃腸道腫瘤臨床與基礎(chǔ)研究，E-mail:xzr020@aliyun.com。

中圖分類號(hào)R730.51

文獻(xiàn)標(biāo)志碼A

文章編號(hào)1000-484X(2016)06-0911-06

①本文受廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2012B031800362)資助。