趙慶峰，張大方,劉同彥，劉　佳，李麗靜

(1.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥藥理教研室, 吉林 長(zhǎng)春 130117;2.吉林敖東集團(tuán)力源制藥股份有限公司，吉林 敦化 133700)

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養(yǎng)血飲口服液對(duì)失血性貧血小鼠的影響*1

趙慶峰1，張大方1,劉同彥2，劉佳1，李麗靜1

(1.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥藥理教研室, 吉林 長(zhǎng)春 130117;2.吉林敖東集團(tuán)力源制藥股份有限公司，吉林 敦化 133700)

摘要:目的：通過(guò)小鼠眼眶后靜脈叢放血法建立失血性貧血小鼠模型，觀察養(yǎng)血飲口服液對(duì)失血性貧血小鼠的影響.方法：通過(guò)小鼠眼眶后靜脈叢放血法，建立失血性貧血模型，觀察給藥后各組小鼠的血紅蛋白(Hb)和紅細(xì)胞(RBC)變化，并且用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清中的促紅細(xì)胞生成素(Erythropoietin，EPO).結(jié)果:造模成功后，RBC數(shù)目和Hb含量明顯降低，EPO反饋性增加.而給予養(yǎng)血飲口服液的小鼠，其RBC和Hb都得到了明顯的改善，并且血清中的EPO進(jìn)一步升高.結(jié)論:通過(guò)實(shí)驗(yàn)可知，養(yǎng)血飲口服液能夠增加失血性貧血小鼠的Hb含量和RBC數(shù)目，而這些作用可能與其增加血中EPO的含量有關(guān).

關(guān)鍵詞:失血性血虛；血紅蛋白；紅細(xì)胞；促紅細(xì)胞生成素

養(yǎng)血飲口服液是一種中藥復(fù)方制劑，由當(dāng)歸、鹿角膠、黃芪、阿膠及大棗組成.具有補(bǔ)氣養(yǎng)血、益腎助脾的功效，主要用于氣血兩虧、體虛羸弱、崩漏下血、血小板減少及貧血的治療.研究還發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)血飲口服液對(duì)放、化療所導(dǎo)致的白細(xì)胞減少癥也具有一定的療效[1].為了更進(jìn)一步地研究其療效，筆者通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察了養(yǎng)血飲口服液對(duì)失血性貧血小鼠的影響.

1材料與方法

1.1藥品

養(yǎng)血飲口服液，由吉林敖東集團(tuán)力源制藥股份有限公司提供，批號(hào):1405006；復(fù)方阿膠漿(陽(yáng)性對(duì)照藥)，由河南省新四方制藥有限公司提供，批號(hào)20150215.

1.2動(dòng)物

昆明種SPF級(jí)小鼠，體重18g～22g，雌雄各半，購(gòu)于長(zhǎng)春億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司，許可證號(hào)：SCXK(吉)2011-0008.飼養(yǎng)于長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房，適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后供試驗(yàn)用.

1.3儀器與設(shè)備

EPO試劑盒;XT-2000型五分類血液細(xì)胞分析儀;TG16-W型微量高速離心機(jī);Imark型酶標(biāo)儀.

1.4實(shí)驗(yàn)方法

除空白組外，其余各組由眼眶后靜脈叢放血0.5mL，同時(shí)控制其正常飲食量，攝食量控制在每天75g/kg體重，自由飲水，連續(xù)七天[2].

將小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、養(yǎng)血飲高劑量組、養(yǎng)血飲中劑量組、養(yǎng)血飲低劑量組，每組12只，雌雄各半.各給藥組于造模前七天灌胃相應(yīng)藥物，每日1次，連續(xù)灌胃至造模第8天(即給藥第15天).模型組和空白組則灌胃等體積生理鹽水.

1.5外周血象測(cè)定

在造模的第0、4、7天每只小鼠尾靜脈采血20μL，然后檢測(cè)外周血中的RBC數(shù)目和Hb含量.

1.6血清EPO的測(cè)定

于造模后第8天，摘眼球取血，制備血清，按酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)血中的EPO含量[3].

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2結(jié)果

2.1對(duì)外周血RBC的影響

模型對(duì)照組小鼠外周血中RBC數(shù)目顯著低于空白組(P<0.01).養(yǎng)血飲各劑量組在給藥14天(造模第7天)時(shí)外周血RBC數(shù)與模型對(duì)照組比均有明顯升高，其中低劑量組顯著升高(P<0.05)，與陽(yáng)性組效果接近.見(jiàn)表1.

表1養(yǎng)血飲口服液對(duì)失血性貧血小鼠外周血RBC的影響

組別造模開(kāi)始各時(shí)間點(diǎn)RBC總數(shù)/×1012/L0天4天7天空白組7.61±0.427.33±0.67**7.65±0.44**模型組7.65±0.485.66±0.575.90±0.54陽(yáng)性組7.94±0.406.04±0.416.60±0.62**高劑量組7.80±0.735.82±0.766.17±0.53中劑量組7.75±0.515.60±1.016.19±0.40低劑量組7.60±0.735.95±0.726.52±0.50*

注:與模型對(duì)照組比，*P<0.05,**P<0.01.

2.2對(duì)外周血Hb的影響

與空白組相比，模型組小鼠外周血中Hb含量顯著降低(P<0.01).養(yǎng)血飲口服液給藥11天(即造模第4天)時(shí)，高、中、低劑量組Hb含量顯著高于模型對(duì)照組(P<0.05)，給藥14天時(shí)，中、低劑量組顯著高于模型對(duì)照組(P<0.05，P<0.01)，與陽(yáng)性對(duì)照藥效果相當(dāng).可見(jiàn)養(yǎng)血飲口服液可升高外周血中Hb含量，減輕放血法所致外周血象的下降趨勢(shì).見(jiàn)表2.

表2養(yǎng)血飲口服液對(duì)失血性貧血小鼠外周血Hb的影響

組別造模開(kāi)始各時(shí)間點(diǎn)Hb含量/g·L-10天4天7天空白組135.25±7.25127.55±9.52131.17±6.87模型組136.00±8.5690.30±10.67▲▲101.90±9.14▲▲陽(yáng)性組137.50±7.60102.40±7.11*118.55±9.60高劑量組139.49±13.94101.40±12.90*108.60±7.95中劑量組137.92±7.20100.00±13.41*118.61±27.24△△低劑量組134.73±11.70102.23±10.69*114.70±10.5△

注:與4d模型組比較，*P<0.05;與7d模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01;與4d、7d陰性對(duì)照組比較，▲▲P<0.01.

2.3對(duì)血清EPO含量的影響

模型組小鼠造模后，血清中EPO含量較空白組明顯增加(P<0.01)，這可能與機(jī)體自身反饋調(diào)節(jié)有關(guān).養(yǎng)血飲口服液各劑量組EPO含量和模型對(duì)照組相比進(jìn)一步增加，且養(yǎng)血飲高劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示這可能是其促進(jìn)造血功能的一個(gè)重要方面.見(jiàn)表3.

表3養(yǎng)血飲口服液對(duì)失血性貧血小鼠血清EPO的影響

組別EPO/IU·L-1空白組31.40±8.94**模型組65.14±17.64陽(yáng)性組81.90±31.40高劑量組90.41±21.05△中劑量組82.60±8.92低劑量組66.79±27.63

注:與模型對(duì)照組比較，**P<0.01，△P<0.05.

3討論

養(yǎng)血飲口服液主要由阿膠、黃芪等為主要原料組成.其中，阿膠被稱為補(bǔ)血“圣藥”[4].現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，阿膠作為明膠蛋白，有加速RBC和Hb生長(zhǎng)、促進(jìn)骨髓造血、促進(jìn)造血系統(tǒng)功能作用.黃芪能夠補(bǔ)氣生血，用于氣血不足的治療.現(xiàn)代研究證實(shí)[5]，黃芪能夠明顯提高動(dòng)物的體能，改善動(dòng)物的疲勞狀態(tài)，并能減少骨骼肌和血中乳酸的堆積，降低血清中LDH和BUN的含量.

研究發(fā)現(xiàn)，EPO作用于骨髓紅系祖細(xì)胞上的受體.EPO能夠促進(jìn)骨髓造血干細(xì)胞分化為原RBC，加速幼R(shí)BC分裂并促進(jìn)Hb的合成[6].養(yǎng)血飲口服液能夠增加血液中EPO含量，這也許是其促進(jìn)造血功能的一個(gè)重要方面.

考慮到本模型為急性失血性貧血，動(dòng)物恢復(fù)較快，如果造模后給予治療藥，其療效勢(shì)必?zé)o法正確判斷，所以本實(shí)驗(yàn)采取預(yù)防性給藥.

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，小鼠造成失血性貧血模型后，RBC數(shù)目和Hb含量明顯降低，EPO則增加.這些結(jié)果為養(yǎng)血飲口服液的進(jìn)一步研究提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù).

參考文獻(xiàn)：

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(責(zé)任編輯:王海波)

DOI:10.13877/j.cnki.cn22-1284.2016.04.014

*收稿日期：2016-01-20

作者簡(jiǎn)介：趙慶峰，男，碩士研究生.

通訊作者：李麗靜，女，副教授，碩士生導(dǎo)師.

中圖分類號(hào)：R285

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1008-7974(2016)02-0044-02