萱藻配子孤雌生殖絲狀體的采苗及育苗研究

李曉麗，申元，曹淑青，張澤宇

（大連海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧大連116023）

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萱藻配子孤雌生殖絲狀體的采苗及育苗研究

李曉麗，申元，曹淑青，張澤宇

（大連海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧大連116023）

摘要：為研究萱藻Scytosiphon lomentaria的絲狀體育苗，以大連沿海萱藻為材料，采用配子孤雌生殖方法，進(jìn)行了絲狀體的誘導(dǎo)及采苗、育苗研究。結(jié)果表明：單株種藻獲得的配子經(jīng)孤雌生殖形成的盤狀體在20℃時(shí)生長最快，15℃時(shí)次之，10℃時(shí)最慢；盤狀體直徑達(dá)到100 μm以上時(shí)開始形成絲狀體，絲狀體在20℃時(shí)形成的時(shí)間最短、數(shù)量最多、生長速度最快，15℃時(shí)次之，10℃時(shí)最差；將絲狀體剝下經(jīng)增殖后切碎采苗，在10℃時(shí)幼苗形成最快、形成率最高，15℃時(shí)次之，20℃時(shí)無幼苗形成；在10℃時(shí)，采苗后培養(yǎng)30 d幼苗長度達(dá)到 （11.0±0.3）mm，移至海區(qū)栽培4個(gè)月后獲得藻體長度為60 cm左右的萱藻成體。

關(guān)鍵詞：萱藻；配子；孤雌生殖；絲狀體；采苗；室內(nèi)培養(yǎng)

萱藻Scytosiphon lomentaria是經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的一年生大型經(jīng)濟(jì)褐藻，在中國北至遼寧、南至廣東沿海均有分布，萱藻在冬春季生長繁茂，藻體最大長度可達(dá)80～110 cm，能在近岸潮間帶和潮下帶的巖礁區(qū)形成大的藻場，是中國沿海重要的海藻資源［1-2］。萱藻營養(yǎng)豐富、味道鮮美，是人們喜歡食用的主要海藻之一［3］。研究發(fā)現(xiàn)，萱藻中氨基酸含量豐富且種類齊全，共含有7種人體必需氨基酸、2種半必需氨基酸和7種非必需氨基酸，其中天門冬氨酸和谷氨酸含量占總氨基酸的20%以上，兒童生長發(fā)育必需的精氨酸和組氨酸含量也較高［4］，而且萱藻中巖藻聚糖硫酸脂含量豐富，具有顯著的護(hù)肝作用［5］。近年來，萱藻作為健康和保健食品，市場需求量迅速增大，有關(guān)萱藻規(guī)?；绶N生產(chǎn)技術(shù)、海區(qū)栽培技術(shù)的研究已經(jīng)引起人們的關(guān)注。

目前，國內(nèi)外有關(guān)萱藻的研究報(bào)道多集中在其生活史和生態(tài)學(xué)方面［6-10］，關(guān)于萱藻人工育苗的研究報(bào)道較少，久保昭史［11］進(jìn)行了配子 （合子）采集和盤狀體孢子體培養(yǎng)初步研究；三浦昭雄［12］將室內(nèi)培養(yǎng)的盤狀孢子體切碎并附著在維尼綸繩上，在海區(qū)浮筏上培育出萱藻幼苗；張澤宇等［13］從合子萌發(fā)形成的盤狀孢子體上得到絲狀體，將絲狀體再轉(zhuǎn)化為盤狀孢子體并培養(yǎng)至形成單室孢子囊，采集從成熟孢子囊放出的孢子并在室內(nèi)培育出萱藻幼苗。本研究中利用萱藻配子異宗結(jié)合的特點(diǎn)，用單株藻體采集配子的方法，從配子孤雌生殖形成的盤狀體上獲得絲狀體，經(jīng)增殖后，采用絲狀體采苗的方法將絲狀體切碎并使其附著在維尼綸繩網(wǎng)簾上，絲狀體細(xì)胞直接萌發(fā)為萱藻幼苗，并將其在海區(qū)浮筏上栽培成成體，可將育苗時(shí)間縮短為20～30 d。作者根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，掌握了盤狀體生長以及絲狀體形成、生長和采苗期的最適宜溫度，可為萱藻的規(guī)?；绶N生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)。

1　材料與方法

1.1材料

試驗(yàn)用萱藻種藻于2014年4月采集于大連市黑石礁海區(qū)自然種群，采集時(shí)取藻體表面形成配子囊的成熟種藻 （圖1），單株用海水洗凈后分別放入塑料袋內(nèi)，帶回實(shí)驗(yàn)室供試驗(yàn)使用。

1.2方法

1.2.1配子放散與采集 將單株種藻鋪放在白紙上，在室內(nèi)陰干2～3 h后，分別放入盛有100 mL消毒海水的 200 mL燒杯內(nèi)，在光照強(qiáng)度≥60 μmol/（m2·s）下刺激配子放散，當(dāng)有褐色煙霧狀配子放散后撈出種藻，用吸管在向光處水表面配子趨光集中的褐色區(qū)域汲取配子水，分別取2～3

1.2.2盤狀體的形成及生長試驗(yàn) 將附著胚配子的載玻片移至直徑為9 cm的培養(yǎng)皿 （下同）內(nèi)，添加培養(yǎng)液后置于不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng)，每5 d測定1次盤狀體的生長狀況，測定50個(gè)盤狀體的直徑并取其平均值。

1.2.3溫度對絲狀體形成和生長的影響試驗(yàn) 在溫度為20℃、光照強(qiáng)度為40 μmol/（m2·s）、光照周期為12 h/d的條件下，盤狀體直徑達(dá)到100 μm左右時(shí)，將生長盤狀體的載玻片移到培養(yǎng)皿內(nèi)，添加培養(yǎng)液后移至不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。每10 d檢查1次盤狀體，每次測量50個(gè)盤狀體，按形成絲狀體的盤狀體數(shù)與盤狀體總數(shù)的百分比計(jì)算絲狀體形成率。

將生長在盤狀體表面的絲狀體剝下，移至盛有培養(yǎng)液的300 mL燒瓶中，培養(yǎng)至肉眼可見的藻團(tuán)時(shí)，將絲狀體藻團(tuán)移到載玻片上，用雙面刀片切碎后撒在鋪有載玻片的培養(yǎng)皿內(nèi)，添加培養(yǎng)液后靜置過夜，次日上午將附著絲狀體藻段的載玻片分別移入裝有培養(yǎng)液的不同培養(yǎng)皿內(nèi)，并置于不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。每5 d測定1次絲狀體的生長狀況，每次測量50個(gè)絲狀體的長度并取其平均值。

1.2.4絲狀體切碎及幼苗培養(yǎng) 取增殖后的絲狀體藻團(tuán)2 g（濕質(zhì)量），添加300 mL培養(yǎng)液后，用組織搗碎機(jī) （Philip HR2096）切碎，時(shí)間為120 s，在測定藻段長度后，灑在鋪有載玻片的培養(yǎng)皿內(nèi)，附著3 d后，將載玻片移至直徑為15 cm的培養(yǎng)皿內(nèi)，添加培養(yǎng)液后置于不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。每5 d測定1次幼苗形成率，每次測量50個(gè)絲狀體，按形成幼苗的絲狀體數(shù)與絲狀體總數(shù)的百分比計(jì)算幼苗形成率；最后將形成幼苗的載玻片移入不同培養(yǎng)皿內(nèi)，并置于不同溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。每5 d測定1次幼苗生長狀況，每次測量50個(gè)個(gè)體的長度并取其平均值。

以上培養(yǎng)過程均在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行，溫度分別設(shè)定為10、15、20℃，光源為日光燈，光照周期為12 h/d，光照強(qiáng)度為40 μmol/（m2·s）。培養(yǎng)液為過濾后加熱至80℃以上再冷卻的海水，營養(yǎng)鹽的添加量為 NaNO3100 mg/L，KH2PO420 mg/L，微量元素PI溶液［14］1 mL/L，每3 d全量更換培養(yǎng)液1次。

1.2.5幼苗培育及海區(qū)栽培 2014年10月20日，將增殖后的孤雌生殖絲狀體采用相同方法切碎，灑在鋪有維尼綸繩網(wǎng)簾的塑料水槽 （水體0.3 t）內(nèi)，待附著牢固后，將網(wǎng)簾移入玻璃鋼水槽（水體2 t）內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)用水為過濾的自然海水，營養(yǎng)鹽添加量為NaNO320 mg/L，NaH2PO410 mg/L，培養(yǎng)用水每3 d全量更換1次，待幼苗肉眼可見時(shí)移至海區(qū)浮筏上栽培。

2　結(jié)果與分析

2.1配子附著、萌發(fā)與盤狀體的形成及生長

配子呈梨形，大小為 （6.0～7.0）μm× （3.5～5.0）μm，色素呈體盤狀，具眼點(diǎn)，側(cè)生兩條不等長鞭毛 （圖2-A）。配子放散具正趨光性，附著時(shí)表現(xiàn)出負(fù)趨光性，游向背光處并附著。配子附著時(shí)長鞭毛接觸基質(zhì)并快速旋轉(zhuǎn)將鞭毛收回體內(nèi)，當(dāng)配子前端與基質(zhì)接觸后停止旋轉(zhuǎn)并附著，成為胚配子。胚配子為圓形，直徑約5 μm，在20℃下24 h后開始萌發(fā)，細(xì)胞首先在側(cè)面產(chǎn)生突起并拉長呈長圓形，經(jīng)2～3次細(xì)胞橫分裂后形成5～7個(gè)細(xì)胞的長條狀盤狀體 （圖2-B），隨后細(xì)胞開始向周邊分裂，形成多細(xì)胞盤狀體。

剛形成的盤狀體呈圓形或橢圓形，直徑為20～30 μm，由數(shù)十個(gè)橢圓形細(xì)胞組成，呈放射狀排列，細(xì)胞內(nèi)含1個(gè)褐色的盤狀色素體。在20℃下，盤狀體細(xì)胞首先沿著基質(zhì)的表面分裂增加附著面積，培養(yǎng)15 d時(shí)，盤狀體直徑達(dá)到60 μm以上。之后盤狀體中部細(xì)胞橫分裂加快，由中央開始逐漸向上隆起，厚度逐漸增加。培養(yǎng)25 d時(shí)，盤狀體直徑均超過100 μm，中央部略隆起，盤狀體進(jìn)入快速生長階段，周邊外層可見由透明長方形分生細(xì)胞組成的分生膜。培養(yǎng)2個(gè)月時(shí)，盤狀體直徑達(dá)2 mm左右，肉眼已清楚可見。

從表1可見，培養(yǎng)20 d時(shí)，20℃下盤狀體直徑為 （80.0±3.0）μm，15℃和10℃下分別為（60.0±2.0）、（45.0±2.0）μm；培養(yǎng)30 d時(shí)，20℃下盤狀體直徑增加至 （120.0±4.0）μm，明顯大于15℃和10℃下的 （85.0±3.0）、（60.0±3.0）μm。

2.2溫度對絲狀體、葉狀體形成的影響

當(dāng)盤狀體直徑達(dá)到100 μm左右時(shí)，其中央及周邊部分表面細(xì)胞拉長并延伸出盤狀體表面，細(xì)胞內(nèi)原生質(zhì)向上移動(dòng)使細(xì)胞頂端膨大呈褐色棒狀，部分棒狀細(xì)胞經(jīng)2～3次細(xì)胞橫分裂，形成3～5個(gè)細(xì)胞的絲狀體，經(jīng)生長后形成多細(xì)胞絲狀體 （圖2-C）。剛形成的絲狀體為單條絲狀體，絲狀體長為30.0～40.0 μm，寬為12.0～15.0 μm，內(nèi)含褐色盤狀色素體，隨后產(chǎn)生分枝并生長成為分枝絲狀體藻團(tuán)。

圖1　成熟萱藻Fig.1 Mature gametophytes of brown alga Scytosiphon lomentaria

從表2可見：在20℃下，培養(yǎng)5 d時(shí)開始形成絲狀體，培養(yǎng)10 d時(shí)形成率達(dá)到 （25.0± 5.0）%，培養(yǎng)30 d時(shí)絲狀體形成率達(dá)到100%，每個(gè)盤狀孢子體上一般都形成多個(gè)絲狀體；在15℃下，培養(yǎng)10 d時(shí)，盤狀體上開始形成絲狀體，培養(yǎng)30 d時(shí)，絲狀體形成率為 （80.0±6.0）%；在10℃下，培養(yǎng)20 d時(shí)，盤狀體上才開始形成絲狀體，培養(yǎng)30 d時(shí)，絲狀體形成率僅為 （20.0± 3.0）%，且每個(gè)盤狀孢子體上形成的絲狀體數(shù)量均明顯少于20℃和15℃下形成的絲狀體數(shù)量（P＜0.01）。

表1　不同溫度對萱藻盤狀體生長 （直徑）的影響Tab.1 Effect of different temperature on growth（diameter）of crusts of brown alga Scytosiphon lomentaria　μm

表2　不同溫度對萱藻絲狀體形成率的影響Tab.2 Effect of different temperature on the formation rate of filaments of brown alga Scytosiphon lomentaria　%

葉狀體是由2～5列細(xì)胞組成的細(xì)長藻體，一般形成于盤狀體中部。開始時(shí)盤狀體中部細(xì)胞顏色加深，分裂加快，隨后延伸出盤狀體表面并生長成為葉狀體 （圖2-D）。當(dāng)葉狀體生長到一定長度（200 μm左右）時(shí)生長停止，藻體逐漸失去光澤、變厚，縱裂為2～5條由單列細(xì)胞組成的絲狀體（圖2-E）。葉狀體的產(chǎn)生非常普遍，且每個(gè)盤狀體上產(chǎn)生葉狀體的數(shù)量也較多，部分盤狀體上形成的葉狀體可達(dá)十余棵。

2.3溫度對絲狀體生長的影響

切碎后的絲狀體藻段長度為70～230 μm，平均為160 μm，依靠破碎細(xì)胞溢出的原生質(zhì)黏附在基質(zhì)上。絲狀體生長時(shí)，首先細(xì)胞拉長，細(xì)胞內(nèi)的盤狀色素體也隨之變細(xì)拉長，隨后細(xì)胞中間產(chǎn)生隔閡，色素體和原生質(zhì)也被分隔，分裂為2個(gè)細(xì)胞，在顯微鏡下可見多個(gè)細(xì)胞同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞分裂，藻體長度增加很快，在20℃下培養(yǎng)1個(gè)月時(shí)，可生長成長度為5 mm左右的單列細(xì)胞絲狀體。隨后絲狀體兩側(cè)產(chǎn)生少數(shù)分枝并延長為分枝絲狀體，培養(yǎng)2個(gè)月時(shí)，生長成直徑為5 mm左右的絲狀體藻團(tuán)。

不同溫度對絲狀體生長的影響如表3所示。從表3可見，培養(yǎng)30 d時(shí)，絲狀體的長度在20℃下達(dá)到 （6.4±0.3）mm，在15℃下為 （4.7±0.4）mm，在10℃下僅為 （3.0±0.1）mm。結(jié)果表明，在設(shè)定的3個(gè)溫度條件下，絲狀體在20℃下生長最快，15℃下次之，10℃下最慢。

隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，絲狀體藻團(tuán)細(xì)胞分裂旺盛，長度快速增加，同時(shí)部分細(xì)胞縮短變粗，細(xì)胞內(nèi)原生質(zhì)濃度增加呈黑褐色。之后，筒狀細(xì)胞逐漸膨大，在其上端或下端向周邊環(huán)生出多個(gè)圓形小細(xì)胞，經(jīng)生長后聚集在一起形成節(jié)狀細(xì)胞團(tuán)。節(jié)狀細(xì)胞團(tuán)多環(huán)生于細(xì)胞隔閡處，由十余個(gè)或幾十個(gè)直徑為6～10 μm的圓形細(xì)胞組成，細(xì)胞內(nèi)具有1個(gè)盤狀色素體和豐富的原生質(zhì)，呈黑褐色。培養(yǎng)后絲狀體藻團(tuán)的絲狀體上形成大量節(jié)狀細(xì)胞團(tuán)（圖2-F）。

表3　不同溫度對萱藻絲狀體生長 （長度）的影響Tab.3 Effect of different temperature on growth（length）of filaments of brown alga Scytosiphon lomentaria　mm

2.4幼苗的形成與生長

擴(kuò)增后的絲狀體如圖3-A所示，經(jīng)切碎后的絲狀體藻段長度為110～230 μm，平均為155 μm，依靠切斷細(xì)胞溢出的原生質(zhì)黏附在基質(zhì)上。在10℃下切碎3 d后，在顯微鏡下可見絲狀體細(xì)胞逐漸變短，細(xì)胞內(nèi)原生體濃度增加并呈褐色，細(xì)胞表面產(chǎn)生突起并向上延伸呈透明棒狀，細(xì)胞內(nèi)的盤狀色素體及原生質(zhì)向棒狀細(xì)胞內(nèi)移動(dòng)，使棒狀細(xì)胞呈淺褐色，隨后棒狀細(xì)胞逐漸拉長并分裂為2～3個(gè)細(xì)胞，上部細(xì)胞頂端生出透明無色毛，基部細(xì)胞向下延伸出透明假根絲，附著在基質(zhì)上成為萱藻幼苗。一般情況下，絲狀體藻段與基質(zhì)接觸的兩端細(xì)胞先形成幼苗，未與基質(zhì)接觸的細(xì)胞和絲狀體藻段的中間細(xì)胞形成幼苗相對較晚，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長，幾乎所有絲狀體藻段細(xì)胞均能形成幼苗，顯微鏡下可見1個(gè)絲狀體藻段上有多棵幼苗生出（圖3-B）。

節(jié)狀細(xì)胞團(tuán)被打碎后散落在基質(zhì)上，在10℃下，圓形細(xì)胞3 d時(shí)開始增大，與基質(zhì)的附著面變?yōu)楸鈭A形，隨后表面產(chǎn)生突起并延伸成棒狀細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)的色素體和原生質(zhì)移動(dòng)到棒狀細(xì)胞內(nèi)后成為透明細(xì)胞空殼，并與棒狀細(xì)胞相連。隨后棒狀細(xì)胞基部產(chǎn)生隔閡并分裂成3～5個(gè)細(xì)胞，上部細(xì)胞頂端生出無色毛，下部細(xì)胞生出假根絲并延伸到基質(zhì)表面成為萱藻幼苗。

不同溫度對幼苗形成率的影響見表4。從表4可見，溫度對幼苗形成率的影響極顯著 （P＜0.01）。10℃下，絲狀體細(xì)胞切碎5 d時(shí)便開始形成幼苗，10 d時(shí)幼苗形成率為 （24.0±2.0）%，20 d時(shí)形成率為 （85.0±8.0）%，30 d時(shí)形成率達(dá)到100%；15℃下，絲狀體細(xì)胞切碎10 d時(shí)開始形成幼苗，20 d時(shí)幼苗形成率為 （18.0±2.0）%，30 d時(shí)形成率為（45.0±5.0）%；20℃下，絲狀體只進(jìn)行旺盛的細(xì)胞分裂，切碎30 d時(shí)也沒有幼苗形成。

表4　不同溫度對萱藻幼苗形成率的影響Tab.4 Effect of different temperature on formation rate of brown alga Scytosiphon lomentaria juveniles　%

不同溫度對幼苗生長的影響如表5所示。從表5可見：在10℃下，培養(yǎng)10 d時(shí)幼苗長度為（1.2±0.2）mm，20 d時(shí)長度增加至 （5.2±0.1）mm，30 d時(shí)長度達(dá)到 （11.0±0.3）mm；在15℃下，培養(yǎng)10 d時(shí)幼苗長度為 （0.8±0.1）mm，20 d時(shí)長度為 （3.2±0.3）mm，30 d時(shí)長度為 （6.2± 0.4）mm；20℃下，培養(yǎng)10 d時(shí)幼苗長度為（0.5±0.1）mm，20 d時(shí)長度為 （1.2±0.2）mm，30 d時(shí)長度僅增至 （2.4±0.1）mm，顯微鏡下可見幼苗呈彎曲狀，藻體表面細(xì)胞凹凸不平，部分藻體已經(jīng)死亡。

表5　不同溫度對萱藻幼苗生長 （長度）的影響Tab.5 Effect of different temperature on growth（length）of brown alga Scytosiphon lomentaria juveniles　mm

2.5幼苗培育及栽培

附著在維尼綸網(wǎng)簾上的絲狀體細(xì)胞在培育10 d左右時(shí)陸續(xù)形成幼苗，培養(yǎng)40 d時(shí)幼苗藻體長度已達(dá)1.0 cm左右 （圖3-C），隨后于2014年11月30日，研究人員將生長在維尼綸繩網(wǎng)簾的幼苗移至海區(qū)浮筏上栽培，4個(gè)月后生長成藻體長度為60 cm左右的萱藻成體 （圖3-D）。

圖2　萱藻孤雌生殖絲狀體的發(fā)生和發(fā)育Fig.2 Formation and development of parthenogenetic filaments of brown alga Scytosiphon lomentaria

圖3　萱藻孤雌生殖絲狀體育苗Fig.3 Seedling by parthenogenetic filaments of brown alga Scytosiphon lomentaria

3　討論

萱藻的常規(guī)人工育苗要經(jīng)歷合子采集、盤狀體孢子體室內(nèi)培育、游孢子采集和幼苗培育等階段，一般需要6個(gè)月左右的培育時(shí)間。由于育苗時(shí)間長，特別是在夏季高溫期內(nèi)，雜藻大量繁衍導(dǎo)致盤狀孢子體死亡或發(fā)育程度降低，難以獲得大量孢子，導(dǎo)致育苗失?。?1-12］。本研究中，根據(jù)萱藻配子異宗結(jié)合的特點(diǎn)［6］，從單株種藻采集的配子孤雌生殖形成盤狀體上獲得絲狀體，經(jīng)增殖后，采用絲狀體采苗的方法，將絲狀體切碎并撒在維尼綸繩等附著基上，絲狀體細(xì)胞直接萌發(fā)形成萱藻幼苗，將育苗時(shí)間縮短到20～30 d。張澤宇等［13］報(bào)道了使用從萱藻配子結(jié)合后的合子萌發(fā)形成的盤狀體上獲得的絲狀體進(jìn)行采苗和育苗的研究結(jié)果，但該方法中切碎后的絲狀體仍要經(jīng)歷盤狀孢子體形成、生長，以及單室孢子囊形成、成熟和游孢子放散等階段，同樣存在著育苗時(shí)間長、夏季高溫期難以逾越的問題。

溫度是影響絲狀體形成和幼苗萌發(fā)的最重要因子之一。本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，10～20℃范圍內(nèi)，溫度越高越利于絲狀體的形成和生長，但溫度越低越利于幼苗的形成。10℃下，切碎的絲狀體細(xì)胞在短時(shí)間內(nèi)可形成幼苗，且隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長幾乎所有的細(xì)胞均可形成幼苗，但在此溫度下，絲狀體幾乎不生長；15℃下，只有部分枝端細(xì)胞和與基質(zhì)接觸的絲狀體細(xì)胞形成幼苗，未形成幼苗的絲狀體仍在繼續(xù)生長；20℃下，絲狀體細(xì)胞不形成幼苗，只進(jìn)行細(xì)胞分裂，增加絲狀體長度，且生長速度明顯快于15℃。絲狀體生長和幼苗萌發(fā)適應(yīng)不同溫度的特性為其增殖培養(yǎng)和采苗提供了便利的條件，作者于2014年采用20℃下絲狀體切碎增殖的方法，在2～3個(gè)月內(nèi)獲得了大量的絲狀體，在秋季自然水溫降至12℃左右時(shí)將絲狀體切碎并撒在維尼綸繩等附著基上，在常溫下成功地培育出一定數(shù)量的萱藻幼苗。

不同溫度對圓形細(xì)胞形成幼苗的影響與絲狀體藻段基本相同，20℃下，圓形細(xì)胞拉長后經(jīng)多次細(xì)胞分裂又形成了絲狀體。10℃下，由圓形細(xì)胞形成的幼苗生長很快，藻體先進(jìn)行細(xì)胞橫分裂，成為十余個(gè)細(xì)胞的單列細(xì)胞藻體后，藻體基部細(xì)胞逐漸增大，向下分生出多條假根絲，經(jīng)分裂形成盤狀固著器附著在基質(zhì)上。隨后，自基部細(xì)胞開始細(xì)胞縱分裂，形成多列細(xì)胞藻體，再經(jīng)過多次縱橫分裂后生長成為肉眼可見的圓柱狀萱藻幼苗。

參考文獻(xiàn)：

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中圖分類號(hào)：Q945.51

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

DOI：10.16535/j.cnki.dlhyxb.2016.03.001

文章編號(hào)：2095-1388（2016）03-0231-06

收稿日期：2015-09-23

基金項(xiàng)目：遼寧省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目 （2015020800）

作者簡介：李曉麗 （1980—），女，博士。E-mail：lixiaoli@dlou.edu.cn滴移入數(shù)個(gè)鋪有載玻片的培養(yǎng)皿 （直徑15 cm）內(nèi)，添加培養(yǎng)液后在室溫下靜置過夜，于次日上午移到溫度為20℃、光周期為12 h/d、光照強(qiáng)度為40 μmol/（m2·s）的條件下培養(yǎng)。

Seedling collecting and filaments rearing from parthenogenetic gametes of brown alga Scytosiphon lomentaria

LI Xiao-li，SHEN Yuan，CAO Shu-qing，ZHANG Ze-yu
（Key Laboratory of Mariculture&Stock Enhancement in North China’s Sea，Ministry of Agriculture，Dalian Ocean University，Dalian 116023，China）

Abstract：Filaments were induce by parthenogenetic gametes and seedlings were collected and reared in brown alga Scytosiphon lomentaria in coastal Dalian to investigate seedlings by parthenogenetic gametes.It was found that the gametes released from a single thallus developed into crusts from differentiated filaments with diameter of above 100 μm.The best growth of crusts and filaments and the induction of filaments were observed at water temperature of 20℃，followed by 15℃ and poor at 10℃.The seedlings were collected from filamentous bodys which were stripped after proliferation and then chopped，developed the earliest with the maximal developmental rate at 10℃，followed by 15℃ and no formation of seedlings at 20℃.After isolation and proliferation，the filaments were cut into fragments and then spread on the vinylon nets，and grown into cylindrical plants with body length of（11.0±0.3）mm in 30 days in indoor culture at 10℃.Then the seedlings were transformed to the open sea and cultured in four months to have body length of about 60 cm.

Key words：Scytosiphon lomentaria；gamete；parthenogesis；filament；seedling collecting；indoor culture