2015年浙江省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析

吳贇竑，周彩琴，孫冰冰，吳雪軍，張紅麗，劉愛(ài)軍，柴　娟，趙靈燕

(浙江省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，浙江杭州 311199)

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試驗(yàn)研究

2015年浙江省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析

吳贇竑，周彩琴，孫冰冰，吳雪軍，張紅麗，劉愛(ài)軍，柴娟，趙靈燕

(浙江省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，浙江杭州 311199)

摘要：為提高浙江省各級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力，對(duì)省內(nèi)40個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室H7N9流感病毒抗體檢測(cè)(H7N9-AI Ab)，A型口蹄疫病毒抗體檢測(cè)(A-W Ab)和小反芻獸疫病毒檢測(cè)(PPRV)比對(duì)。結(jié)果表明，參加比對(duì)的40個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中有28個(gè)實(shí)驗(yàn)室H7N9-AI Ab比對(duì)，正確率為70.00%；有37個(gè)實(shí)驗(yàn)室A-W Ab比對(duì)，正確率為92.50%；有16個(gè)實(shí)驗(yàn)室PRRV比對(duì)，正確率為80.00%。

關(guān)鍵詞：檢測(cè)能力；H7N9-AI Ab；A-W Ab；PRRV；獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室

中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)在ISO/IEC導(dǎo)則43中將實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)定義為：按照預(yù)先規(guī)定的條件，由兩個(gè)或多個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)相同或類似被測(cè)物品進(jìn)行檢測(cè)的組織、實(shí)施和評(píng)價(jià)。開展實(shí)驗(yàn)室比對(duì)試驗(yàn)不僅能提高和促進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力，行業(yè)主管部門還能監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力，從而做到識(shí)別和縮小實(shí)驗(yàn)室之間檢測(cè)結(jié)果的差異[1]。而且，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)，還能監(jiān)控已建立測(cè)量方法的有效性和可比性，識(shí)別實(shí)驗(yàn)室的問(wèn)題以采取糾正措施[2]。本文所指的獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室是指隸屬于各級(jí)獸醫(yī)主管部門，承擔(dān)動(dòng)物疫病診斷、檢測(cè)和監(jiān)測(cè)等任務(wù)的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室[3]。開展獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)，是評(píng)價(jià)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)水平的重要手段，也是加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的有效方法[4]。

為提高浙江省各級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力，依據(jù)農(nóng)業(yè)部辦公廳和浙江省畜牧獸醫(yī)局有關(guān)2015年獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作的文件要求[5-6]，浙江省畜牧獸醫(yī)局于2015年8月組織開展浙江省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作。全省共有40個(gè)市、縣、區(qū)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室參加，并在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成了所有比對(duì)項(xiàng)目并上報(bào)結(jié)果。比對(duì)結(jié)果能客觀反應(yīng)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)水平和技術(shù)，對(duì)比對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析能進(jìn)一步做好實(shí)驗(yàn)室管理工作[3]。

1材料與方法

1.1比對(duì)項(xiàng)目根據(jù)浙江省畜牧獸醫(yī)局有關(guān)2015年獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作的文件要求[6]，該次比對(duì)共設(shè)置3個(gè)項(xiàng)目，分別為H7N9流感病毒抗體檢測(cè)(H7N9-AI Ab)、A型口蹄疫病毒抗體檢測(cè)(A-W Ab)和小反芻獸疫病毒檢測(cè)(PPRV)。

1.2比對(duì)方法比對(duì)各項(xiàng)目所采用的方法，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)及所用試劑詳見(jiàn)表1。

表1　比對(duì)試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)、方法和試劑

注：*具備熒光RT-PCR或RT-PCR檢測(cè)能力的實(shí)驗(yàn)室需參加此項(xiàng)能力比對(duì)，不具備該檢測(cè)能力的實(shí)驗(yàn)室無(wú)需參加；**根據(jù)實(shí)驗(yàn)室能力范圍選擇使用RT-PCR熒光，還是RT-PCR方法。其中7個(gè)實(shí)驗(yàn)室采用RT-PCR熒光方法，13個(gè)實(shí)驗(yàn)室采用普通RT-PCR方法。

1.3比對(duì)樣品進(jìn)行比對(duì)的血清及病毒樣品均已進(jìn)行效價(jià)定量和病毒定性試驗(yàn)。

1.3.1H7N9-AI Ab樣品參考值為<1、7、9、11的雞血清中隨機(jī)抽取5份組成1組樣品。

1.3.2A-W Ab樣品參考值為<1∶8、1∶180、1∶720的牛血清中隨機(jī)抽取5份組成1組樣品。

1.3.3PRRV樣品參考值為陽(yáng)性、弱陽(yáng)性和陰性的病毒樣品中隨機(jī)抽取6份組成1組樣品。

1.4評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

1.4.1H7N9-AI Ab評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)全部比對(duì)樣品檢測(cè)值效價(jià)在參考值效價(jià)±1(包括±1)范圍內(nèi)，判為結(jié)果正確；有一個(gè)及以上樣品檢測(cè)值偏離參考值±2及以上，判為比對(duì)結(jié)果存在較大偏差。

1.4.2A-W Ab評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)全部比對(duì)樣品檢測(cè)值效價(jià)在參考值效價(jià)±1(包括±1)范圍內(nèi)，判為結(jié)果正確；有一個(gè)及以上樣品檢測(cè)值偏離參考值±1以上，判為比對(duì)結(jié)果存在較大偏差。

1.4.3PRRV評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)小反芻獸疫病毒檢測(cè)結(jié)果與參考值完全一致，判為結(jié)果正確；與參考值不一致，判為比對(duì)結(jié)果存在較大偏差。

2結(jié)果與分析

2.1總體結(jié)果根據(jù)檢測(cè)結(jié)果評(píng)判，參加比對(duì)的40個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中有22個(gè)實(shí)驗(yàn)室參加的所有比對(duì)項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果全部正確，其中4個(gè)實(shí)驗(yàn)室全部比對(duì)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果與參考值完全一致。有17個(gè)實(shí)驗(yàn)室有1個(gè)比對(duì)項(xiàng)目存在較大偏差，有1個(gè)實(shí)驗(yàn)室有2個(gè)比對(duì)項(xiàng)目部分比對(duì)檢測(cè)值存在較大偏差。

2.2H7N9-AI Ab比對(duì)結(jié)果該項(xiàng)目共有28個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)5份樣品檢測(cè)結(jié)果全部正確，實(shí)驗(yàn)室比對(duì)正確率為70.00%。12個(gè)實(shí)驗(yàn)室的部分樣品檢測(cè)值與參考值存在較大偏差(詳見(jiàn)表2)。

表2　H7N9-AI Ab比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果

2.3A-W Ab比對(duì)結(jié)果該項(xiàng)目共有37個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)5份樣品檢測(cè)結(jié)果全部正確，實(shí)驗(yàn)室比對(duì)正確率為92.50%。3個(gè)實(shí)驗(yàn)室的部分樣品檢測(cè)值與參考值存在較大偏差(詳見(jiàn)表3)。

表3　A-W Ab比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果

2.4PRRV比對(duì)結(jié)果該項(xiàng)目共有16個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)6份樣品檢測(cè)結(jié)果全部正確，實(shí)驗(yàn)室比對(duì)正確率為80.00%。7個(gè)采用熒光RT-PCR方法的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果全部正確，采用普通RT-PCR方法的13個(gè)實(shí)驗(yàn)室中，有4個(gè)實(shí)驗(yàn)室的部分樣品檢測(cè)值與參考值存在較大偏差(詳見(jiàn)表4)。

表4　PRRV比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果

3小結(jié)與討論

本次獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)總體情況良好，其中22個(gè)實(shí)驗(yàn)室參加的所有比對(duì)項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果全部正確，三項(xiàng)比對(duì)項(xiàng)目的正確率均達(dá)到70%或以上；有4個(gè)實(shí)驗(yàn)室全部比對(duì)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果與參考值完全一致，說(shuō)明全省大部分市、縣、區(qū)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室具備相應(yīng)動(dòng)物疫病的檢測(cè)能力和技術(shù)水平。

本次比對(duì)試驗(yàn)中，在需要經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行主觀判斷的檢測(cè)項(xiàng)目中，出現(xiàn)了比需要客觀判斷的項(xiàng)目存在更多偏差，例如H7N9流感抗體血凝抑制試驗(yàn)中，有30%實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)部分比對(duì)樣品檢測(cè)值與參考值存在較大偏差，而相對(duì)的A型口蹄疫病毒抗體檢測(cè)(A-W Ab)，其正確率則達(dá)到92.50%。同樣，在小反芻獸疫病毒檢測(cè)中，采用熒光RT-PCR方法檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室，其正確率為100%，而使用普通RT-PCR方法檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室其正確率僅為69.23%(9/13)，這些需要主觀判斷的項(xiàng)目對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員的操作水平，經(jīng)驗(yàn)和判斷能力提出了更高要求，說(shuō)明部分實(shí)驗(yàn)室在需要主觀判斷的項(xiàng)目中還存在著操作失誤、經(jīng)驗(yàn)不足等問(wèn)題。

本次比對(duì)試驗(yàn)中，設(shè)置了參考值完全相同的平行樣品，部分實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的平行性則相對(duì)較差，對(duì)參考值一致的不同編號(hào)樣品檢測(cè)出不同的結(jié)果，說(shuō)明部分實(shí)驗(yàn)室在檢測(cè)中存在較多的隨機(jī)誤差，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)于細(xì)節(jié)的把握尤為重要，應(yīng)明確試驗(yàn)操作流程，規(guī)范試驗(yàn)操作，以確保實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性。

另外，雖然本次比對(duì)試驗(yàn)中各實(shí)驗(yàn)室報(bào)告和原始記錄的規(guī)范程度有所提高，但仍有部分實(shí)驗(yàn)室的原始記錄中，出現(xiàn)所填檢測(cè)結(jié)果未按說(shuō)明書要求進(jìn)行表述、對(duì)錯(cuò)誤結(jié)果進(jìn)行涂改等現(xiàn)象，個(gè)別實(shí)驗(yàn)室出具的檢測(cè)報(bào)告中出現(xiàn)的樣品原始編號(hào)和上報(bào)結(jié)果中的編號(hào)不一致等錯(cuò)誤現(xiàn)象，有待進(jìn)一步改進(jìn)。

參考文獻(xiàn)

[1]王國(guó)勤，鐘淮濱.實(shí)驗(yàn)室比對(duì)試驗(yàn)的做法與體會(huì)[J].計(jì)量與測(cè)試技術(shù)，2011，38(10)：90-92.

[2]戴潤(rùn)生.計(jì)量管理基礎(chǔ)知識(shí)系列講座：第八講，比對(duì)和能力驗(yàn)證[J].中國(guó)計(jì)量，2008(8)：43-47.

[3]董昕欣，劉偉，邴國(guó)霞等.2014年全國(guó)省級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2014,50(10)：101-103.

[4]王文，張繼紅，蘭玲等.2010年新疆獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)試驗(yàn)的探討與建議[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2011,28(9)：19-21.

[5]農(nóng)業(yè)部辦公廳.農(nóng)業(yè)部辦公廳關(guān)于開展2015年獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作的通知[Z].農(nóng)辦醫(yī)〔2015〕7號(hào).北京：農(nóng)業(yè)部辦公廳，2015-03-03.

[6]浙江省畜牧獸醫(yī)局.關(guān)于印發(fā)《2015年全省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)實(shí)施方案》的通知[Z].浙牧疫發(fā)〔2015〕27號(hào).浙江：浙江省畜牧獸醫(yī)局，2015-05-14.

收稿日期：2015-12-08

中圖分類號(hào)：S854.4

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1005-7307(2016)04-0001-003