不同乙型肝炎病毒e抗原表達的慢性乙型肝炎患者T細胞亞群水平差異性分析

汪峻嶺王穎　李惠劉然　郭春梅李玉梅黑龍江省大慶市第二醫(yī)院檢驗科，黑龍江大慶，6346；黑龍江省大慶油田總醫(yī)院麻醉科，黑龍江大慶，633

不同乙型肝炎病毒e抗原表達的慢性乙型肝炎患者T細胞亞群水平差異性分析

汪峻嶺1王穎2李惠1劉然1郭春梅1李玉梅1
1黑龍江省大慶市第二醫(yī)院檢驗科，黑龍江大慶，163461；2黑龍江省大慶油田總醫(yī)院麻醉科，黑龍江大慶，163311

目的 分析不同的乙型肝炎病毒e抗原 （HBeAg）表達的慢性乙型肝炎患者T細胞亞群水平差異。方法 選擇2014年10月—2015年12月于黑龍江省大慶市第二醫(yī)院就診的慢性乙型肝炎患者65例。根據(jù)HBeAg的表達分為陰性組30例，陽性組35例。比較兩組CD3、CD4、CD、CD4CD25百分率。結(jié)果HBeAg陽性組CD8（31.2±5.6）%、CD4CD25（31.8±5.5）%高于陰性組高于陰性組CD8（27.6±5.3）%、CD4CD25（28.6±4.7）%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.6595、2.5293，P=0.0078、0.0114）。結(jié)論 不同HBeAg表達的慢性乙型肝炎患者T淋巴細胞水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義，且HBeAg表達陽性者更為顯著。

乙型肝炎病毒e抗原；慢性乙型肝炎；T淋巴細胞亞群

［Abstract］Objective To analyze the level of T cell subsets in patients with chronic hepatitis B with different expression of hepatitis B virus e antigen.Methods 65 cases of chronic hepatitis B in our hospital from October 2014 to December 2015 were selected.According to the expression of HBeAg，30 cases were divided into the negative group，35 cases in the positive group.Compared the two groups of CD3，CD4，CD，CD4CD25 percentage.Results HBeAg positive groupCD8（31.2± 5.6）%，CD4CD25（31.8±5.5）%higher than the negative groupCD8（27.6±5.3）%、CD4CD25（28.6±4.7）%，the difference was statistically significant（t=2.6595、2.5293，P=0.0078、0.0114）.Conclusion There was a significant difference in the level of T lymphocytes in the patients with chronic hepatitis B with different HBeAg expression，and the positive expression of HBeAg was more significant.

［Key words］Hepatitis B virus e antigen；Chronic hepatitis B；T lymphocyte subsets

慢性乙型肝炎病情發(fā)展的主要機制是免疫反應(yīng)清除病毒的同時間接破壞肝組織細胞正常結(jié)構(gòu)。而在此過程中，T淋巴細胞起到主導(dǎo)作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)細胞免疫不能有效清除病毒，且往往存在功能紊亂狀態(tài)，然而T淋巴細胞的具體致病機制，不同狀態(tài)下的慢性乙型肝炎患者T淋巴細胞水平及病情發(fā)展機制是否存在差異性尚不明確。筆者選擇2014年 10月—2015年 12月于黑龍江省大慶市第二醫(yī)院就診的慢性乙型肝炎患者65例，分析不同HBeAg表達的慢性乙型肝炎患者T細胞亞群水平差異，旨在探討和分析慢性乙型肝炎患者T細胞亞群變化規(guī)律，為慢性乙型肝炎早期病變機制及檢測指標提供參考，現(xiàn)報告如下。

1　資料與方法

1.1 一般資料

選擇 2014年 10月—2015年 12月于黑龍江省大慶市第二醫(yī)院就診的慢性乙型肝炎患者65例。根據(jù) HBeAg的表達分為陰性組 30例，陽性組 35例。陽性組中，男23例，女12例，年齡16～73歲，平均年齡（30.5±9.6）歲；陰性組中，男20例，女 10例，年齡16～67歲，平均年齡（32.7±8.8）歲。該研究經(jīng)該院倫理委員會批準，所有患者均簽署知情同意書。所有患者均排除肝炎后肝硬化、近期發(fā)生急性感染或合并其他肝炎病毒感染，無器官功能不全及免疫系統(tǒng)疾病。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

取患者肘靜脈血送檢，離心處理后獲得血清2 mL，加入50 μL的EDTA-2K抗凝，加入20 μL白細胞分化抗原CD4/CD8/CD3檢測試劑和20 μL白細胞分化抗原CD4CD25檢測試劑。放入BD FACSCanto II流式細胞儀（國食藥監(jiān)械（進）字 2011第 2402218號）進行分析。

1.3 統(tǒng)計方法

所有數(shù)據(jù)均采用SAS 9.3統(tǒng)計學(xué)軟件分析，觀察指標采用均數(shù)±標準差表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

兩組 CD3、CD4百分率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。陽性組CD8、CD4CD25高于陰性組高于陰性組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1　兩組患者 T淋巴細胞亞群百分率比較［（±s）%］

表1　兩組患者 T淋巴細胞亞群百分率比較［（±s）%］

組別C D 3 C D 4 C D 8 　C D 4 C D 2 5陽性組（n = 3 5）陰性組（n = 3 5 ）t P 7 5 . 6 ± 6 . 4 7 4 . 0 ± 5 . 8 1 . 0 5 6 9 0 . 2 9 0 5 3 6 . 5 ± 6 . 2 3 8 . 9 ± 6 . 8 1 . 4 7 7 2 0 . 1 3 9 6 3 1 . 2 ± 5 . 6 2 7 . 6 ± 5 . 3 2 . 6 5 9 5 0 . 0 0 7 8 3 1 . 8 ± 5 . 5 2 8 . 6 ± 4 . 7 2 . 5 2 9 3 0 . 0 1 1 4

3　討論

T細胞的免疫應(yīng)答決定了乙型肝炎的免疫病理機制［1］，而在此過程中，特異性CD8細胞、CD4細胞、毒性T細胞扮演著重要角色.CD3為T細胞公共表面抗原，用于反映T淋巴細胞總數(shù)［1］；CD4屬于輔助性細胞；CD8通過產(chǎn)生穿孔素等毒素參與抗病毒作用；CD4CD25T淋巴細胞可抑制自身免疫應(yīng)答，使得機體對自身或非自身抗原免疫耐受［2］。江浪進等［3］研究發(fā)現(xiàn)，與健康人群相比，慢性乙型肝炎患者外周血CD3、CD4明顯降低，CD8水平明顯升高。李彩東等［4］研究發(fā)現(xiàn)，高載量者較中低載量者的CD3、CD4、CD8、CD4/CD8水平與健康者血清水平相差更多。苑文雯等［5］研究發(fā)現(xiàn)乙型肝炎

ALT、AST水平與CD8T淋巴細胞呈正相關(guān)，提示肝功能與T淋巴細胞功能紊亂關(guān)系緊密。已有研究［6］證明HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)歸的同時，HBV DNA載量降低，HBeAg轉(zhuǎn)陰，肝功能恢復(fù)，這說明HBeAg的轉(zhuǎn)歸也可能伴隨著T淋巴細胞的改善。冼永超等［7］研究發(fā)現(xiàn)HBeAg陽性患者與HBeAg陽性患者肝組織中T淋巴細胞存在顯著差異，提示二類患者發(fā)病機制及免疫狀態(tài)存在差異。

該研究結(jié)果顯示，HBeAg陽性組 CD8（31.2± 5.6）%、高于陰性組高于陰性組（27.6±5.3）%，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.6595，P=0.0078），提示不同HBeAg表達的慢性乙型肝炎患者T淋巴細胞水平存在明顯差異，且HBeAg表達陽性者更為顯著。這與陳竹等［8］報道 HBeAg陽性組CD8（409.97± 190.00）個/μl、與陰性組（426.64±246.99）個/μL，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（F=0.311，P=0.578）有所不同，這可能與兩個研究病例納入標準不同、計量單位不同及統(tǒng)計學(xué)方法不同有關(guān)。

綜上所述，不同HBeAg表達的慢性乙型肝炎患者T淋巴細胞水平存在明顯差異，且 HBeAg表達陽性者更為顯著，CD8及CD4CD25升高的HBeAg陰性者具有向陽性轉(zhuǎn)化的風(fēng)險，臨床應(yīng)予以重視。而HBeAg表達、HBV DNA載量、肝功能的異常程度與T淋巴細胞水平是否存在相關(guān)性大小的差異，值得進一步研究。

［1］王慰，楊莉，高恒波，等.不同血清HBV DNA載量慢

性乙型肝炎病毒攜帶者外周血T淋巴亞群的變化 ［J］.實用肝臟病雜志，2015，18（1）：74-75.

［2］王蘭舟.CD4+CD25+T細胞在慢性乙型肝炎患者發(fā)病過程的作用［J］.肝臟，2014，19（6）：467-469.

［3］江浪進，陳欣.慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細胞亞群變化臨床研究［J］.中國實驗診斷學(xué)，2013，17（7）：1235-1237.

［4］李彩東，吳斌，陳錫蓮，等.蘭州地區(qū)慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細胞亞群與HBV DNA水平的相關(guān)性研究［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2015，36（6）：731-733.

［5］苑文雯，王晗，朱劍功，等.T細胞免疫應(yīng)答在乙型肝炎病毒感染者診斷中的應(yīng)用及對免疫調(diào)節(jié)治療的影響 ［J］.海南醫(yī)學(xué)，2014，25（24）：3658-3660.

［6］閆紅靜，張新江，賈慧娟，等.慢性乙型肝炎病毒攜帶者HBeAg自然血清學(xué)轉(zhuǎn)換的縱向隊列研究［J］.中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2013，33（1）：15-18.

［7］冼永超，程書權(quán)，倪輝，等.不同HBeAg狀態(tài)下慢性乙型肝炎患者肝組織內(nèi)CD4+、CD8+、CD20+、CD57+T淋巴細胞的表達分析［J］.臨床肝膽病雜志，2015，31（4）：546-550.

［8］陳竹，曾義嵐，唐玉珍，等.HBeAg陽性與HBeAg陰性慢性乙型肝炎的臨床特點及免疫狀態(tài)分析［J］.中國肝臟病雜志（電子版），2015，7（3）：56-58.

Differential Analysis of T Cell Subsets in Chronic Hepatitis B Patients with Different Hepatitis B Virus e Antigen Expression

WANG Jun-ling1，WANG Ying2，LI Hui1，LIU Ran1，GUO Chun-mei1，LI Yv-mei1
1.Department of laboratory，Daqing Second Hospital，Heilongjiang Province，Daqing，Heilongjiang Province163461，China
2.Oncology Department，General Hospital of Daqing Oil Field，Heilongjiang Province，Daqing，Heilongjiang Province，163311，China.

R4

A

1674-0742（2016）07（a）－0083-03

10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.19.083

魏玉鋒（1967.3-），男，甘肅靖遠人，本科，主任醫(yī)師，研究方向：骨科方面。

2016-02-15）