秦靜英

（南寧市衛(wèi)生學校，廣西 南寧 530031）

酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測乙肝兩對半的教學體會

秦靜英

（南寧市衛(wèi)生學校，廣西 南寧 530031）

為達成我校以學生的發(fā)展為本，提高學生的就業(yè)競爭能力、升學競爭能力和可持續(xù)發(fā)展能力的辦學目標，免疫學檢驗課程制訂專業(yè)課教學與臨床崗位零距離對接的教學目標。結合酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測乙肝兩對半的理論及實驗教學談談教學體會。

酶聯(lián)免疫吸附試驗；乙肝兩對半；免疫學檢驗

酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）由于具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優(yōu)點，在臨床免疫檢驗診斷中廣泛應用。乙肝兩對半的檢測常用ELISA法，該實驗檢測項目多，步驟繁瑣，操作上涉及靜脈采血技術，血清稀釋，洗板機、酶標儀、離心機、水浴箱的使用［1］，實驗診斷受到抗原抗體濃度、酶結合物濃度以及質(zhì)量控制等因素的影響。

為達成我校以學生的發(fā)展為本，提高學生的就業(yè)競爭能力、升學競爭能力和可持續(xù)發(fā)展能力的辦學目標，免疫檢驗課程通過制訂專業(yè)課教學與臨床崗位零距離對接的教學目標，實施學生自主學習—教師點撥輔導的實驗教學模式。按照免疫檢驗臨床實際的工作流程和質(zhì)量管理，我們對ELISA檢測乙肝兩對半進行相應教學設計，將理論知識和技術應用能力的訓練滲透到實驗教學過程中，便于學生牢固地掌握理論知識，讓學生學有所得、學有所思、學有所用，以下談談筆者的教學體會。

1　采用的教法、學法

以往的理論授課采用傳統(tǒng)的講授法，由于受到課堂規(guī)則、心理環(huán)境、激勵機制等因素的影響，教師在課堂講授過程中存在許多不盡如人意的地方。如ELISA檢測乙肝兩對半涉及雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、競爭法原理，內(nèi)容上有嚴謹?shù)南到y(tǒng)性和組織性，授課中若只是簡單地將知識點堆積，沒有講清知識之間的內(nèi)在聯(lián)系，會在一定程度上影響課堂教學的實際效果。在實驗教學中，實驗材料的準備、儀器的準備及調(diào)試、標本及試劑的處理等工作基本上是由指導教師包辦，實驗的許多中間環(huán)節(jié)學生沒有親自參與，因而在教學任務完成后，部分學生對實驗的原理、操作還是一知半解，更談不上能力的鍛煉和培養(yǎng)。我們根據(jù)學生的學習特點和認知規(guī)律，通過優(yōu)化教學內(nèi)容，注重理論聯(lián)系實際，在教法上采用任務驅(qū)動法、直觀教學法、討論教學法及實驗教學法等，激發(fā)學生進一步探究問題、積極參與教學活動的欲望。

實驗過程中注重培養(yǎng)學生的職業(yè)能力，提高學生分析問題、解決問題的能力，因而采用自主學習法、合作探究法、分析討論法等。如在教學準備環(huán)節(jié)，將學生分組（5人/組），指定各組組長，布置以下學習任務：（1）乙肝兩對半包括哪些項目？（2）常見的乙肝兩對半檢測結果是哪些？有何臨床意義？（3）應用了ELISA的什么原理？（4）接觸血液、分離血清標本需實施哪些安全保護措施？（5）實驗用品的準備和注意事項有哪些？

2　使用多媒體信息技術手段輔助教學

2.1登錄網(wǎng)站搜集資料，建立QQ、微信討論組

乙肝兩對半檢測與實際生活聯(lián)系較為密切，學生對于乙肝病毒的傳染性、病毒攜帶者、“大三陽”等知識有所了解，但學生對乙肝病毒采用的檢測方法及原理、臨床意義缺乏認識。教學設計中，我們注重理論聯(lián)系實際，讓學生感到所思考的問題是熟悉的、常見的，同時又是新奇的、富有挑戰(zhàn)性的，激發(fā)學生探究問題、尋找答案的欲望。教師布置學習任務后，學生通過查閱書籍、登錄網(wǎng)站搜集資料，并結合自己或家人曾經(jīng)到醫(yī)院檢驗科化驗檢查的結果來獲取乙肝兩對半檢測的相關知識。通過QQ、微信的形式建立討論組，針對ELISA檢測乙肝兩對半的相關知識進行討論，分享學習經(jīng)驗，教師及時跟進、指導，在討論組實現(xiàn)師生、生生討論。

2.2Flash動畫及圖片的應用

ELISA檢測乙肝兩對半涉及雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、競爭法原理，抽象難懂，通過Flash動畫、圖片演示，把實驗原理直觀形象地展示出來，可以增強教學內(nèi)容的可讀性和可接受性，解決內(nèi)容單調(diào)乏味、難以接受的問題。教師針對重要知識點提問，由此突破教學重點、難點，可達到預期的教學效果。

2.3教學錄像、視頻的應用

教學過程中，以學生的學為中心，以符合學生的認知規(guī)律為前提，為使學生對操作步驟有感性認識，我們設計、制作適合于教學對象的教學錄像、視頻，使得操作更為直觀［2］，促使學生對原有知識進行回顧和鞏固，培養(yǎng)學生的思維能力、記憶力、主動學習能力。如通過視頻導入教學，視頻內(nèi)容為某患者出現(xiàn)了肝炎的臨床癥狀，血清乙肝兩對半檢測結果為HBsAg（+）；HBeAg（-）；抗-HBs（-）；抗-HBe（-）；抗-HBc（-），提出問題：（1）乙肝兩對半常用何種方法檢測；（2）患者的檢測結果如何分析？有何意義？從一開始上課就牢牢地吸引學生的注意力，加深學生對乙肝兩對半檢測意義的理解。

此外，我們自制了乙肝兩對半檢測的教學錄像、洗板機及酶標儀的編程錄像。教師針對性地對實驗環(huán)節(jié)如操作步驟、結果觀察、注意事項進行重點講解，激發(fā)學生參與實驗活動的熱情，增強學生做好實驗的自信心。

2.4計算機交互平臺的應用

為了檢驗學生對ELISA檢測乙肝兩對半的理論掌握程度、提高學生的實驗技能、完善學生免疫檢驗課程成績評價體系，我們對學生進行實驗考核，采取以考促學的手段，加大ELISA檢測乙肝兩對半的訓練力度，包括理論考核（30分）和操作考核（70分）。

理論考核采用本教研室的計算機交互平臺進行，根據(jù)教學內(nèi)容的特點，理論考核我們進行這樣的設計：首先收集乙肝兩對半檢測相關試題共25題，內(nèi)容涉及實驗原理、操作、材料、結果觀察及臨床意義。如：（1）乙肝兩對半檢測涉及ELISA的哪些原理？分別檢測什么項目？（2）通過各反應孔顯色，如何判斷疫苗接種者、病毒攜帶者、“大三陽”、“小三陽”？（3）手工洗滌有何要求？（4）加終止液的目的是什么？（5）ELISA常用的酶是哪種？其底物是什么？考慮到學生對理論考核容易產(chǎn)生畏難情緒，在題型上設有填充題、標示題、連線題及填空題等，內(nèi)容直觀、清晰，以PPT形式組卷，使學生“寓考于樂”，輕松愉快地完成理論考核。從試題庫集中抽題組卷，考核內(nèi)容及題型見表1，共組10套試卷。學生抽簽后通過計算機交互平臺進行考試，本教研室的計算機交互平臺可實現(xiàn)全班學生同時測試及無紙化考試。

表lELISA檢測乙肝兩對半理論考核內(nèi)容及題型

圖1　ELISA雙抗體夾心法測HBsAg

2.5開放式微生物教學系統(tǒng)的應用

ELISA檢測乙肝兩對半在內(nèi)容上與醫(yī)學微生物學、生物化學密切相關。開放式微生物教學系統(tǒng)操作簡單、直觀，同時具有良好的交互界面、動態(tài)效果，能夠從視覺上、聽覺上吸引學生的注意力，為學生提供自主學習的平臺，擴充相關學習內(nèi)容。學生在課后可進入開放式微生物教學系統(tǒng)，通過觀看視頻，針對乙肝病毒的內(nèi)容進行學習。該教學系統(tǒng)能幫助學生復習、鞏固相關知識，并能重復學習。

3　督導實驗，及時進行總結

乙肝兩對半共有5個檢測項目，目前多采用商品化的ELISA試劑盒，需用到5種試劑盒，各個項目的操作步驟不同，實驗中若不細心就容易出錯。在學生操作過程中，教師巡視指導，督導每位學生的操作。此外，每個小組由小組長協(xié)助監(jiān)督，及時發(fā)現(xiàn)錯誤并糾正，以免影響結果。

由于學生用的是自體標本，實驗態(tài)度與參與積極性明顯提高，且操作認真。實驗結束后，學生很急切地想要知道自己的檢測方法對不對，結果與預計的是否符合。在教師的組織下，學生對整個實驗進行分析及總結，可加深對乙肝和ELISA檢測法的認知。如本次課學會了什么？有何體會？總結成功的經(jīng)驗、失敗的經(jīng)驗、容易出錯的環(huán)節(jié)等。每組學生對實驗過程和實驗結果進行整理和綜合分析，每名學生完成一份實驗報告。通過總結，進一步加深學生對乙肝兩對半檢測相關知識的理解，加深對免疫學檢驗專業(yè)技能的認知。

4　重視人文關懷，拓展知識，做好防治

我國人群中乙肝病毒感染率為10%，醫(yī)學生是未來的醫(yī)務人員，是高危人群，醫(yī)院內(nèi)污染的器械、血標本及各種不規(guī)范操作均可引起感染。ELISA檢測乙肝兩對半所用的標本為學生自體血清標本，實驗結果顯示，絕大多數(shù)學生為健康人，乙肝兩對半5項全陰性的學生要求在實習前完成乙肝疫苗的全程接種，通過接種疫苗關愛自己，保護他人［3］。對乙肝病毒感染的可疑標本，由指導教師復查，以確定是否具有傳染性，以便讓學生及時到?？圃\治，對感染了乙肝病毒的學生，教師要保護學生的隱私，指導學生以正確的態(tài)度去面對，不要產(chǎn)生心理負擔，同時要重視乙肝的防治。

通過觀看乙肝宣傳片，完成乙肝手抄報作業(yè)，加深學生對乙肝流行情況、臨床表現(xiàn)、臨床類型、檢測方法及防治原則的認知，積累自我保護經(jīng)驗。在集體生活環(huán)境中注意個人衛(wèi)生，不用他人的生活用品，養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習慣［4］。在實際工作中，樹立防范意識，在微生物檢驗、生物化學檢驗、臨床檢驗等專業(yè)課程開設的實驗中正確處理血標本、血污染物品，規(guī)范操作，避免意外感染的發(fā)生。

5　制訂切實可行的評價標準

結合本課題的教學目標、教學內(nèi)容和學生的學習環(huán)境以及學生個體差異等制訂切實可行的評價標準。設計了教師評價、小組評價及個人評價，從各個角度對本課題的實施情況進行評價。以2014級86位學生為例，評價結果見表2。通過評價，有助于學生反思和調(diào)控自己的學習過程，讓每名學生都能體驗到成功的樂趣，非常有利于學生更好地認識自我，樹立自信。

免疫學檢驗課程實踐性強，理論內(nèi)容抽象不易學習。實驗前，學生對ELISA夾心法、競爭法等概念及原理存在模糊、混淆的情況。教師應在ELISA檢測乙肝兩對半的理論和實驗教學過程中強調(diào)理論聯(lián)系實際，對教學內(nèi)容、教學環(huán)節(jié)進行精心設計，使學生很快掌握該實驗的原理、操作、結果判斷及分析，對乙肝的傳播途徑、致病性、防治方法及免疫有一定的認知，使專業(yè)技能得到進一步提高，為實習及將來的工作打好基礎。

表2　ELISA檢測乙肝兩對半的小組評價結果

［1］田兆菊.綜合性實驗在臨床免疫學檢驗實驗教學中的應用及體會［J］.國際檢驗醫(yī)學雜志，2014，35（2）：250-251.

［2］石云.多媒體教學在臨床免疫學及檢驗實驗教學中的應用［J］.中國實驗診斷學，2011，15（2）：1379-1380.

［3］鄧青.乙肝疫苗免疫效果評價［J］.中國衛(wèi)生統(tǒng)計，2010，27（4）：388-389.

［4］程君平.在微生物與免疫實驗教學中開展ELISA檢測乙肝的意義［J］.衛(wèi)生職業(yè)教育，2004，22（18）：108-109.■

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