王春蘭，陳澤林，2，3，李桂蘭，4

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常用實驗動物穴位的標準化定位方法研究*

王春蘭1，陳澤林1，2，3，李桂蘭1，4

（1.天津中醫(yī)藥大學實驗針灸學研究中心，天津300193；2.天津中醫(yī)藥大學針灸學院，天津 300193；3.國家中醫(yī)藥管理局針灸標準化研究中心試點建設單位，天津300193；4.天津中醫(yī)藥大學附屬?？滇t(yī)院，天津300193）

隨著針灸科研水平的逐漸提高和針灸標準化進程的不斷加快，急需對常用實驗動物穴位制定國家級標準，因此研究科學的實驗動物穴位定位方法對于針灸學的發(fā)展具有重要意義。筆者結合近年來動物穴位的相關研究，對常用實驗動物穴位定位方法進行了分析，總結出常見的4種方法：1）中國獸醫(yī)針灸學是實驗動物穴位定位的參考，參考家畜的穴位對實驗動物穴位進行模擬定位。2）比較解剖學是實驗動物穴位定位的基礎，將人的腧穴模擬到實驗動物身上。3）經(jīng)絡穴位特性的現(xiàn)代研究是實驗動物穴位定位的科學依據(jù)，利用現(xiàn)代科學技術手段來進行檢測定位。4）穴位的效應是實驗動物穴位定位的關鍵因素，把發(fā)揮效應的檢測點作為穴位。以上4種方法各有利弊，可以綜合利用上述方法，從而提高動物穴位定位的準確性，使常用實驗動物穴位的標準化成為可能。

實驗動物；穴位；定位方法；標準化

實驗動物的穴位定位是針灸科學研究的基礎及必要條件之一，目前尚無國家標準，筆者以“experimental acupuncture”為檢索詞，統(tǒng)計2009—2011年來SCI發(fā)表的關于針灸的文章有162篇，其中涉及到動物實驗的50篇，在這些文章中，穴位定位方法不一，且穴位位置存在一定偏差。實驗動物穴位定位標準的缺乏，導致其研究結果缺乏可比性和說服力，進而直接影響到針灸科研水平的提高和科研成果的國際交流。目前，韓國已經(jīng)完成了大鼠足三里穴的定位研究，并將發(fā)布實驗動物穴位標準。所以，無論從針灸學科的發(fā)展，還是爭取中國在針灸國際標準制定中的主導權等方面考慮，常用實驗動物穴位定位國家標準的研究和制定迫在眉睫，尋求科學的實驗動物穴位定位方法也就具有著重要的意義。筆者結合近年來的相關研究，對實驗動物穴位定位的方法進行探討，以期為實驗動物的穴位定位提供新的思路，從而使常用實驗動物穴位的標準化成為可能。

1　中國獸醫(yī)針灸學是實驗動物穴位定位的參考

中國獸醫(yī)針灸學的基本理論和中醫(yī)針灸學一脈相承，是古人同家畜疾病進行斗爭的經(jīng)驗總結。其經(jīng)絡也包括縱橫交叉的經(jīng)脈和絡脈，是內(nèi)屬臟腑、外絡肢節(jié)、聯(lián)系全身、運行氣血的通道。在中國古代獸醫(yī)針灸學中，對馬的研究內(nèi)容尤為豐富。秦穆公時期，孫陽的《伯樂針經(jīng)》［1］是中國現(xiàn)存最早的獸醫(yī)針灸專著，其中記錄了馬的穴位74個，見表1。明代的《便民圖纂》［2］卷十四“牧養(yǎng)類”敘述了馬、豬等家畜的飼養(yǎng)和疾病的防治，其中對于豬、羊的疾病只提到“割去尾尖，出血即愈”、“先以瓦片刮疥處令赤”的針灸治療，卻沒有點明穴位，而對馬的針灸治療提到了穴位。明清時期的《元亨療馬集》［3］是一本比較完整而系統(tǒng)的中國獸醫(yī)針灸學古籍，但僅僅介紹了馬、牛、駝的針灸穴位。其中“明堂歌”記載馬的穴名77個，耳內(nèi)一穴未命名；“針牛穴法名圖”標注了33個穴名及其位置；“駝經(jīng)”介紹了駝病的針藥治療。

表1 馬的穴位名Tab.1　Horse acupuncture points

由此可見，古人對馬、牛等大型家畜疾病的針灸治療積累了豐富的經(jīng)驗，對豬、羊等相對較小家畜就比較缺乏，于犬、貓、兔等動物的針灸穴位，沒有記載［4］。但是目前針灸科研主要使用豬、犬、貓、兔、鼠等小型動物。因此，對于實驗動物的部分穴位定位往往只能是參考牛、馬的穴位而來［5］。然而古代的許多動物穴位定位模糊，難以準確定位，如《元亨療馬集》曰：“鼻孔之中，血堂穴二道?！痹偃纭对喁燅R集》［6］許序本中對夜眼穴位置描述不一，一說“夜眼穴在夜眼下四指”，另一說“夜眼之內(nèi)，夜眼穴二道”?？梢?，以中國古代獸醫(yī)針灸學為基礎，僅參考馬、牛等大型家畜的穴位進行模擬定位，還難以對實驗動物進行準確的穴位定位。

2　比較解剖學是實驗動物穴位定位的基礎

比較解剖學是用解剖的方法研究比較脊椎動物的魚綱、兩棲綱、爬行綱、鳥綱和哺乳綱及其類群的器官、系統(tǒng)的形態(tài)和結構的一門學科。許多動物特別是高等哺乳動物，與人在形態(tài)結構、組織解剖、生理生化、病理等方面存在諸多共同之處，其經(jīng)絡與腧穴也可能以某種相似形式存在。通過從大體解剖、巨微解剖和顯微解剖方面對經(jīng)絡和腧穴形態(tài)學的大量比較研究，人們發(fā)現(xiàn)動物經(jīng)絡和腧穴處具有與人類相似的神經(jīng)、血管、淋巴、肥大細胞、縫隙連接等結構。如許小琴等［7］對照人體五腧穴的位置、并依據(jù)各穴的定位理論分別采取自然標志取穴法和同身寸度量法在獼猴身上取穴，觀察穴位處的局部解剖結構，結果發(fā)現(xiàn)穴位處有豐富的神經(jīng)和血管。因此，比較解剖學是實驗動物穴位定位的基礎，可將人的腧穴模擬到實驗動物身上。胡元亮等［8］以解剖結構確定體表定位，根據(jù)人體穴位解剖資料對照家兔解剖標本，結合活體觸摸來進行定位，其確定的穴位被收錄在中國中醫(yī)藥出版社出版的最新版統(tǒng)編教材《實驗針灸學》里，成為了實驗動物家兔定位取穴的重要參考依據(jù)。周浩良［9］依據(jù)這種方法系統(tǒng)而全面地對犬、貓、兔等實驗動物的腧穴進行了定位，為其他常用實驗動物的穴位定位提供了方法學基礎。

比較解剖學為實驗動物的穴位定位提供了新的思路，積累了豐富的解剖數(shù)據(jù)，確立了大量中國古代獸醫(yī)針灸學書籍所未記載的新穴?，F(xiàn)代解剖術語描述定位并附有穴位的局部解剖結構，不僅定位比較精確，便于取穴，而且為針刺安全提供了參考數(shù)據(jù)，彌補了中國古代獸醫(yī)針灸學穴位定位模糊的不足之處。但是動物和人畢竟在形態(tài)結構、體積大小、生理功能等方面存在著一定的差異，其穴位和經(jīng)絡也有別于人。以小白鼠為例，其表面積才60 cm2，而人體的表面積約為15 000 cm2，假如把人的經(jīng)穴定位全部模擬到小鼠身上，所造成的誤差無疑是相當大的［5，10］。在解剖上，動物有尾巴，有尾尖穴，而人沒有，并且動物的前肢臂部和后肢的大腿內(nèi)側與胸廓相貼，施針困難，動物該處的穴位數(shù)目應少于人相應部位的穴位數(shù)目［8］。所以不能簡單地將人體穴位按比例在實驗動物身上模擬投影，而要根據(jù)動物自身的形態(tài)特點，有選擇性地把重要的穴位模擬到實驗動物上。運用比較解剖學所獲得的穴位定位，還需要進一步驗證。

3　經(jīng)絡穴位特性的現(xiàn)代研究是實驗動物穴位定位的科學依據(jù)

現(xiàn)代研究表明［11-12］，人體的穴位和經(jīng)絡具有生物、物理和化學特性，其穴位和經(jīng)絡可以通過皮膚阻抗、低頻振動波、放射性同位素示蹤和紅外輻射成像等方法探測出。動物的穴位和經(jīng)絡也有這樣的特性并能借助于這些現(xiàn)代科學技術手段來進行定位。有學者［13-14］利用鈣離子和鉀離子選擇性針型電極，對家兔部分經(jīng)穴的鈣離子和鉀離子濃度進行了在體探測，并與非經(jīng)穴處對照，發(fā)現(xiàn)家兔部分腧穴、在經(jīng)非穴點的鈣離子和鉀離子濃度明顯高于非經(jīng)穴處。鄭利巖等［15-16］應用皮膚電阻導電量測定及聲測經(jīng)絡技術，將導電量較大、聲波波幅值較高點確定為經(jīng)穴點，從而標定出家兔和大鼠的經(jīng)穴。這是目前運用先進手段所獲得的最新成果。

利用現(xiàn)代科學技術手段進行定位，能夠客觀地檢測出動物的經(jīng)絡和腧穴，增加了定位的準確性。但是運用這種方法對實驗動物穴位進行檢測定位時，需要以前兩種方法為基礎，即在與人體經(jīng)穴的相應處及其周圍進行檢測定位，否則其定位就有一定的盲目性。再者，由于穴位的理化特性易受多種因素的干擾，如穴位的電位會受施加于探測電極的壓力、動物皮膚的濕度、室溫等因素影響。因此，這種方法不能單獨應用。

4　穴位的效應是實驗動物穴位定位的關鍵因素

穴位的效應是指針灸作用在特定經(jīng)絡和穴位之上，從而產(chǎn)生相對特異的治療作用。古人當時已認識到某些特定的穴位與人體五臟六腑有特殊的聯(lián)系，并挖掘和總結出穴位效應的一定規(guī)律。這些穴位就被記載并沿用下來，如《靈樞·九針十二原》曰：“五臟有六腑，六腑有十二原，十二原出于四關，四關主治五臟?！爆F(xiàn)代研究［17-18］也表明穴位的效應具有特異性：穴位與非穴點相比，具有特異性效應；不同經(jīng)脈的腧穴，效應不同；同一經(jīng)脈不同腧穴，效應不同。其規(guī)律表現(xiàn)為所有腧穴對所在經(jīng)脈的病變具有普遍的治療作用，但某些腧穴由于經(jīng)氣會聚的差異，對某些病證具有特殊的治療作用?？梢娧ㄎ慌c非穴點相比較，只有穴位能發(fā)揮特異性效應，而非穴點不能產(chǎn)生，能不能成為穴位，關鍵在于是否具有特異性效應。因此，可以把發(fā)揮特異性效應的檢測點作為穴位。有研究［19-20］應用皮膚電阻導電量測定及聲測經(jīng)絡技術，將導電量較大，聲波波幅值較高點確定為經(jīng)穴點，并觀察電針“足三里”與非經(jīng)非穴點對家兔胃蠕動影響和電針“內(nèi)關”與非經(jīng)非穴點對大鼠血壓的影響。結果顯示動物經(jīng)穴能夠產(chǎn)生效應，則表明該點是穴位。韓國對其以前提出的大鼠足三里的位置以膝關節(jié)為基準點重新定位，并通過電針大鼠足三里穴治療由醋酸誘導的腹部疼痛的實驗，觀察大鼠的翻動反應，結果認為大鼠足三里穴位于脛骨前膝關節(jié)下6.5 mm［21］。穴位的效應，不僅與穴位位置有關，還受到心理、針刺手法等因素的影響，所以定位時，要注意控制影響因素，避免不良干擾。

可以看出，中國獸醫(yī)針灸學為實驗動物穴位定位提供了有力的參考，但是其所記載的動物穴位數(shù)目較少，且定位模糊。比較解剖學豐富了實驗動物的穴位，并且提高了取穴的準確性，但是對于實驗動物體表標志不明顯處的穴位，還難以準確定位。經(jīng)絡穴位特性的現(xiàn)代研究進一步提高了穴位定位的準確性，但是具有特異性的解剖結構和理化性質的位點不一定是穴位，只有同時具備特定效應的位點方可確定為穴位。由此可見，單一地采用某種方法都會降低穴位定位的準確性。筆者認為在對實驗動物穴位定位時，應結合利用這4種方法，即在傳統(tǒng)獸醫(yī)針灸穴位的基礎上，根據(jù)動物自身形態(tài)、生理特點，從比較解剖學角度，對穴位進行比較研究，再應用現(xiàn)代科學技術對常用實驗動物穴位進行特異性檢測，最后以穴位的效應驗證，四者相輔相成，才能對實驗動物的穴位進行準確地定位，從而使常用實驗動物穴位的標準化成為可能。

5　討論

張伯禮［22］院士說：“標準制定是一系列嚴謹?shù)目茖W研究活動，要遵照科研的一般規(guī)律進行?！痹诒狙芯恐?，主要的技術難點有以下幾個方面，一是比較解剖所確定的部位與皮膚低電阻點及高頻發(fā)聲點不一致時穴位位置的判定；二是穴位定位時的誤差允許值；三是描述穴位定位術語的規(guī)范。對于第1個問題，擬采用信度概念來解決，即確定實驗動物常用穴位的定位，凡是比較解剖位置和低電阻點以及穴位高頻發(fā)聲點完全重合者，則定義該穴位為高信度穴位；凡對比解剖位置與其中任一測定點相吻合者，則定義為中信度穴位；低電阻點以及穴位高頻發(fā)聲點完全重合，但與比較解剖位置不符者則為低信度穴位；無一重合者，則不是穴位。根據(jù)以往的研究，高信度穴位應占絕大多數(shù)。第2個問題盡量減小樣本誤差、條件誤差等客觀誤差和主觀誤差來解決。第3個問題擬成立由針灸學、解剖學、中獸醫(yī)學和漢語言專家構成的專家委員會來研討解決。

張伯禮［22］院士說：“標準是科研成果的結晶，是許許多多研究和實踐成果的集成，它能規(guī)范一個行業(yè)、一個領域、一套技術?！睂嶒瀯游锏难ㄎ欢ㄎ唬轻樉幕A研究的起點，因此制定常用動物穴位定位標準不僅是針灸標準化的重要組成部分，而且將為規(guī)范針灸基礎研究打下牢固的基礎，也將為廣大針灸科研工作者提供極大的方便，必將促進針灸事業(yè)的健康發(fā)展。

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（本文編輯：張震之，高杉）

Study on standardization of methods commonly used experimental animal acupoint location

WANG Chun-lan1，CHEN Ze-lin1，2，3，LI Gui-lan1，4
（1.Experiment Acupuncture Research Center，Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China；2.Institute of Acupuncture and Moxibustion，Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China；3.The State Administration of Traditional Chinese Medicine Acupuncture and Moxibustion Standardization Pilot Research Center Construction Unit，Tianjin 300193，China；4.Baokang Hospital Affiliated to Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300193，China）

With the gradual increase in the level of scientific research of acupuncture and acupuncture standardization process accelerate continuously，it is imminent to develop the national standardization of experimental animals acupoints.Therefore the research on experimental animals acupoints positioning method is significant for the development of science of acupuncture and moxibustion.On the basis of the related research of laboratory animal acupuncture point positioning methods in recent years，the author analyzed and summarized the common four methods:1）China veterinary acupuncture is the important reference of experimental animal acupuncture point positioning.2）Comparative anatomy is the foundation of experimental animal acupuncture point positioning.3）Meridian points characteristic of modern research is the scientific basis of experimental animal acupuncture point positioning.4）The effect of acupoint is the key factors of experimental animal acupuncture point positioning.The above four methods each have advantages and disadvantages. The author thinks that we can integrately use the above methods so as to improve the accuracy of the animal acupuncture point positioning and make the standardization of the commonly used experimental animal acupuncture points possible.

experimental animal；acupoint；positioning method；standardization

R245

A

1672-1519（2016）02-0100-04

10.11656/j.issn.1672-1519.2016.02.10

天津市教育科學“十二五”規(guī)劃課題（CEⅫ4016）。

王春蘭（1987-），女，碩士研究生，主要從事針灸標準化相關研究。

陳澤林，E-mail：chenzelin328@163.com。

（2015-11-22）