李桂新，劉士平，徐裕海，武云龍，曹華軍

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116011；2.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 體檢中心，遼寧 大連 116011)

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原發(fā)性高血壓患者血清ficolin-3、免疫球蛋白、補(bǔ)體及CRP水平研究

李桂新1，劉士平2，徐裕海1，武云龍1，曹華軍1

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116011；2.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 體檢中心，遼寧 大連 116011)

目的分析原發(fā)性高血壓患者血清纖維膠凝蛋白3(ficolin-3)、免疫球蛋白、補(bǔ)體及CRP水平與原發(fā)性高血壓的關(guān)系。方法選取大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院高血壓患者98例(其中單純高血壓88例，合并2型糖尿病10例)，同時(shí)選取血壓正常并無(wú)其他疾病的同期健康體檢者42例作為對(duì)照組。采用ELISA法測(cè)定兩組血清ficolin-3水平，采用散射比濁法測(cè)定兩組血清補(bǔ)體(C3、C4)、免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)及CRP水平。比較各組各指標(biāo)的變化。結(jié)果高血壓組ficolin-3、C3、C4水平均高于對(duì)照組(均P<0.01)，CRP水平高于對(duì)照組(P<0.05)，IgM水平低于對(duì)照組(P<0.05)，IgG和IgA水平與對(duì)照組比較未見(jiàn)顯著性差異(P>0.05)。ficolin-3、C3、C4和CRP水平與血壓呈正相關(guān)(P<0.05)；ficolin-3與C3、C4水平呈正相關(guān)，與高血壓病程也呈正相關(guān)(均P<0.05)。結(jié)論血清ficolin-3水平與原發(fā)性高血壓病的發(fā)展有關(guān)，對(duì)原發(fā)性高血壓發(fā)病機(jī)制的研究、病情觀察和預(yù)后有一定的價(jià)值。

原發(fā)性高血壓；補(bǔ)體；免疫球蛋白；ficolin-3；CRP

[引用本文]李桂新，劉士平，徐裕海，等.原發(fā)性高血壓患者血清ficolin-3、免疫球蛋白、補(bǔ)體及CRP水平研究[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016,38(4)：367-370.

原發(fā)性高血壓是一種常見(jiàn)的心血管疾病，隨著病情的持續(xù)，可損傷心、腦、腎等重要器官，嚴(yán)重危害人體健康。有研究表明免疫和炎癥參與原發(fā)性高血壓的不良反應(yīng)[1-2]，但是其機(jī)制并未完全闡明。本研究通過(guò)檢測(cè)免疫球蛋白、補(bǔ)體、CRP以及ficolin-3在高血壓病中的變化，探究其對(duì)原發(fā)性高血壓病影響的可能機(jī)制。

1　資料與方法

1.1研究對(duì)象

收集2015年10月至11月在大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院或體檢的高血壓患者98例(其中單純高血壓88例，合并2型糖尿病10例)，單純高血壓組男46例，女42例，年齡(51.8±9.5)歲；高血壓合并糖尿病組男5例，女5例，年齡(69.0±14.1)歲。高血壓病程0～40年不等，平均(7.2±7.5)年。對(duì)照組選取血壓正常并無(wú)其他疾病的同期健康體檢者42例(男16例，女26例)，年齡(50.7±10.4)歲。組間性別、體重指數(shù)等資料差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。

高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)：收縮壓≥140 mmHg和(或)舒張壓≥90 mmHg。高血壓水平分級(jí)，一級(jí)高血壓(輕度)：收縮壓140～159 mmHg和(或)舒張壓90～99 mmHg；二級(jí)高血壓(中度)：收縮壓160～179 mmHg和(或)舒張壓100～109 mmHg；三級(jí)高血壓(重度)：收縮壓≥180 mmHg和(或)舒張壓≥110 mmHg，并排除繼發(fā)性高血壓、炎癥、傳染病、腫瘤、急性組織損傷者。

1.2標(biāo)本采集

所有檢測(cè)對(duì)象都在清晨空腹采集靜脈血3 mL，置于促凝劑-分離膠的黃帽管中，3500 r/min離心10 min，取血清，儲(chǔ)存于-20 ℃保存待檢。

1.3檢測(cè)方法

ficolin-3檢測(cè)采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。試劑盒采用美國(guó)RD公司的酶聯(lián)免疫試劑盒。免疫球蛋白、補(bǔ)體、CRP檢測(cè)采用散射比濁法，采用西門(mén)子BN-Ⅱ儀器進(jìn)行檢測(cè)。比較各組ficolin-3、免疫球蛋白、補(bǔ)體及CRP的水平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)均以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，資料比較采用t檢驗(yàn)，組間比較采用LSD方法，相關(guān)性分析采用Pearson分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　果

2.1高血壓組與對(duì)照組ficolin-3、免疫球蛋白、補(bǔ)體及CRP水平比較

與對(duì)照組比較，原發(fā)性高血壓組ficolin-3、C3、C4水平升高(P<0.01)，CRP水平升高(P<0.05)，IgM水平降低(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1高血壓組與對(duì)照組ficolin-3、免疫球蛋白、補(bǔ)體及CRP水平比較

Tab 1 Comparison of the levels of ficolin-3, immunoglobulin, complement and CRP between hypertension group and control group

對(duì)照組高血壓組Pficolin-3(μg/mL)9.89±5.6413.47±7.29 <0.01IgG(g/L)12.78±2.65 13.00±2.22 >0.05IgA(g/L)2.48±0.912.63±1.03>0.05IgM(g/L)1.30±0.611.07±0.50<0.05C3(g/L)1.09±0.151.33±0.21<0.01C4(g/L)0.24±0.060.31±0.07<0.01CRP(mg/L)0.65±0.601.00±0.78<0.05

2.2高血壓兩亞組與對(duì)照組間ficolin-3、免疫球蛋白、補(bǔ)體及CRP水平比較

高血壓合并糖尿病組與對(duì)照組比較C3、C4及ficolin-3水平升高(P<0.01)，IgA、CRP水平升高(P<0.05)，IgM水平降低(P<0.05)；與單純高血壓組比較，ficolin-3、IgA及IgG水平均升高(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2高血壓兩亞組與對(duì)照組間ficolin-3、免疫球蛋白、補(bǔ)體及CRP水平比較

Tab 2 Comparison of the levels of ficolin-3, immunoglobulin, complement and CRP among two groups of hypertension (simple hypertension and hypertension accompanied with DMII) and control group

對(duì)照組單純高血壓組高血壓合并糖尿病組ficolin-3(μg/mL)9.89±5.6412.42±6.411) 22.71±8.451)3) IgG(g/L)12.78±2.6512.94±2.26 13.46±1.883) IgA(g/L)2.48±0.912.56±0.953.24±1.482)3)IgM(g/L)1.30±0.611.10±0.502)0.80±0.412)C3(g/L)1.09±0.151.32±0.211)1.37±0.131)C4(g/L)0.24±0.060.31±0.071)0.33±0.101)CRP(mg/L)0.65±0.601.00±0.792)1.05±0.682)

1)與對(duì)照組比較，P<0.01；2)與對(duì)照組比較，P<0.05；3)與單純高血壓組比較，P<0.05

2.3血壓與ficolin-3、免疫球蛋白、補(bǔ)體、CRP水平的關(guān)系

原發(fā)性高血壓組收縮壓與ficolin-3、C3、C4、CRP水平均呈正相關(guān)(P<0.05，r值分別為0.214，0.452，0.466和0.200)，與IgM水平呈負(fù)相關(guān)(P<0.05，r=-0.175)。舒張壓與ficolin-3、C3、C4水平均呈正相關(guān)(P<0.05，r值分別為0.145，0.386和0.318)。

2.4ficolin-3水平與C3、C4水平的相關(guān)性分析

相關(guān)性分析顯示ficolin-3水平與C3和C4水平均呈正相關(guān)(r=0.284，P<0.05與r=0.175，P<0.05)。見(jiàn)圖1和2。

圖1　ficolin-3水平與C3的相關(guān)性 Fig 1 Correlation between ficolin-3 and C3

圖2　ficolin-3水平與C4的相關(guān)性Fig 2 Correlation between ficolin-3 and C4

2.5高血壓病程與ficolin-3、免疫球蛋白、補(bǔ)體、CRP水平的關(guān)系

高血壓病程與ficolin-3水平呈正相關(guān)(r=0.255，P<0.05)。未發(fā)現(xiàn)與其他指標(biāo)相關(guān)。見(jiàn)圖3。

圖3　高血壓病程與ficolin-3水平的相關(guān)性Fig 3 Correlation between hypertension course and ficolin-3

3　討　論

在原發(fā)性高血壓發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，免疫球蛋白發(fā)揮重要作用。原發(fā)性高血壓患者T細(xì)胞水平紊亂及功能異常，引起T細(xì)胞輔助介導(dǎo)的B細(xì)胞活化分泌亢進(jìn)，從而使其分泌免疫球蛋白水平紊亂[3]。IgG可形成抗原抗體復(fù)合物，沉積于血管基底膜，引起血管內(nèi)皮損傷[4-5]。也有研究認(rèn)為高血壓患者IgG水平升高是因?yàn)閯?dòng)脈血壓增高、血管損傷所引起的即發(fā)效應(yīng)[6]。本研究觀察到原發(fā)性高血壓組血清IgG、IgA水平有升高趨勢(shì)，但未觀察到顯著的差異性，可能與觀察病例中高血壓三級(jí)例數(shù)較少有關(guān)。高血壓患者IgM水平降低，可能是由于高血壓漫長(zhǎng)的病程中炎癥的消耗所致。

有研究表明體液免疫中的重要組成部分補(bǔ)體參與原發(fā)性高血壓的病理過(guò)程，可能是在原發(fā)性高血壓發(fā)展過(guò)程中補(bǔ)體可能參與了高血壓患者血管結(jié)構(gòu)和功能改變及血壓升高等病理過(guò)程[7]。

補(bǔ)體系統(tǒng)的激活是通過(guò)3個(gè)不同的機(jī)制激活：經(jīng)典途徑、甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)途徑和旁路途徑。這3個(gè)途徑的中間物質(zhì)是C3，通過(guò)激活C3,可以產(chǎn)生C3b、C3a、C5a、膜攻復(fù)合物C5b-9。其中C3a、C5a在高血壓病程中可能起著重要作用，因?yàn)樗鼈兡芫奂装Y細(xì)胞，引起肥大細(xì)胞脫顆粒，從而增加血管滲透性并引起血管平滑肌收縮[8]。有研究表明C3與高血壓患者的血壓呈正比，參與動(dòng)脈流動(dòng)阻力增加的病理過(guò)程[7]。C3促進(jìn)AngⅡ的釋放，AngⅡ具有收縮動(dòng)脈平滑肌，增強(qiáng)心肌的收縮，促使血壓增高的能力[9-10]。C3參與影響RAAS系統(tǒng)，進(jìn)而作用于動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，促使血壓的增高。補(bǔ)體C3、C4a已被證明是先天性肺動(dòng)脈高壓的生物標(biāo)志物[11]。本研究結(jié)果也證實(shí)了這些觀點(diǎn)，以原發(fā)性高血壓患者與對(duì)照組為研究對(duì)象，檢測(cè)人外周血清的C3、C4水平發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性高血壓組相比于對(duì)照組C3，C4顯著增高，且其水平與高血壓患者的收縮壓，舒張壓呈正相關(guān)。

補(bǔ)體活化后參與許多炎癥反應(yīng)過(guò)程。原發(fā)性高血壓中補(bǔ)體激活的分子機(jī)制尚未完全闡明。在凝集素途徑中發(fā)現(xiàn)了MBL、ficolin-1、ficolin-2、ficolin-3和膠原凝集-11 5個(gè)識(shí)別分子，這些分子都與補(bǔ)體激活有關(guān)。本研究證實(shí)ficolin-3可能通過(guò)激活補(bǔ)體，與原發(fā)性高血壓的發(fā)展有關(guān)。首先，通過(guò)血壓與各指標(biāo)相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)原發(fā)性高血壓患者血壓升高程度與C3、C4水平呈正相關(guān)。其次，通過(guò)對(duì)C3和ficolin-3水平研究，發(fā)現(xiàn)C3水平與ficolin-3水平呈正相關(guān)，驗(yàn)證了ficolin-3可以激活C3的觀點(diǎn)[12]。通過(guò)研究ficolin-3與原發(fā)性高血壓病程的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，ficolin-3與原發(fā)性高血壓病程呈正相關(guān)，表明ficolin-3通過(guò)激活補(bǔ)體與原發(fā)性高血壓病程發(fā)展有重要的聯(lián)系。

CRP是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在感染和非感染性炎癥過(guò)程中濃度都會(huì)增高。有研究表明CRP是心血管疾病和周?chē)芗膊∥ｋU(xiǎn)的獨(dú)立預(yù)測(cè)指標(biāo)。隨著CRP水平的升高，收縮壓也相應(yīng)地增高[13]。CRP聯(lián)合補(bǔ)體能促使動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生，而動(dòng)脈粥樣硬化是高血壓的重要發(fā)病因素。通過(guò)高血壓組與對(duì)照組比較發(fā)現(xiàn)高血壓組CRP水平升高。

有報(bào)道表明2型糖尿病和高血壓有密切的聯(lián)系，患有糖尿病的患者更容易患高血壓，胰島素抵抗在兩種疾病中都起著至關(guān)重要的作用[14-15]。本研究發(fā)現(xiàn)高血壓合并2型糖尿病的患者較單純高血壓患者免疫球蛋白和ficolin-3水平升高更顯著，可能由于胰島素抵抗會(huì)加重原發(fā)性高血壓病的病情。

[1] 曹維鍔，王偉. 高血壓患者免疫球蛋白C反應(yīng)蛋白和CD細(xì)胞值改變的意義[J]. 河北醫(yī)學(xué)，2014，6 (20):978-980.

[2] Markiewski MM, Lambris JD. The role of complement in inflammatory diseases from behind the scenes into the spotlight[J]. Am J Pathol, 2007,171(3):715-727.

[3] 劉志濤.原發(fā)性高血壓與免疫炎癥相關(guān)性的研究進(jìn)展與思考[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2013,33(10):100-101.

[4] 劉生祥,陳樹(shù)蘭.高血壓病患者免疫球蛋白水平的觀察[J].寧夏醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1995,17(1): 9-11.

[5] 王文清,李玲. 原發(fā)性高血壓患者體液免疫水平的變化及影響因素[J].心臟雜志,2007,19(3):320-322.

[6] 浦波,王洪恩.原發(fā)性高血壓與免疫球蛋白的關(guān)系及降壓治療對(duì)其的影響[J].吉林醫(yī)學(xué),2000,21(2): 102-103.

[7] 王泰蓉,湯宜婷.原發(fā)性高血壓患者補(bǔ)體C3水平與血管結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系研究[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,10(9):644-646.

[8] Bjork J,Hugli TE, Smedegard G. Microvascular effect of anaphylatoxins C3a and C5a[J] . J Immunol, 1985, 134(2):1115-1119.

[9] 崔建英.高血壓急癥患者AngⅡ與IL-6、IgG和補(bǔ)體C3的關(guān)系分[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2015,13(14):65-66.

[10] Jessica R, Gomolak, Sean P. Didion.A role for innate immunity in the development of hypertension[J]. Med Hypothes,2014, 83:640-643.

[11] Abdul-Salam VB, Paul GA, Ali JO, et al. Identification Of Plasma Protein Biomarkers Associated With Idiopathic Pulmonary Arterial Hypertension[J]. Proteomics, 2006,82(1):2286-2294.

[12] Zoltán Prohászka,Lea Munthe-Fog,Thor Ueland,et al. Association of ficolin-3 with Severity and Outcome of Chronic Heart Failure[J]. PloS ONE, 2013, 8(4):e60976

[13] 吳壽嶺,趙海燕.高敏C反應(yīng)蛋白對(duì)高血壓前期人群進(jìn)展至高血壓的預(yù)測(cè)價(jià)值[J]. 中華高血壓雜志，2010,18(4):390-394.

[14] 劉圳奮，歐劍鋒. 高血壓與高血壓合并2型糖尿病患者血清IL-4及IL-10水平分析[J]. 臨床進(jìn)展,2007,15(9): 355-358.

[15] 劉紅梅, 宋穎, 楊淑敏, 等. 高血壓患者血清補(bǔ)體C3、超敏C反應(yīng)蛋白與胰島素抵抗指數(shù)相關(guān)性比較[J]. 重慶醫(yī)學(xué)，2011,40(27): 2733-2734.

Analysis of ficolin-3, immunoglobulin, complement and CRP in patients with essential hypertension

LI Gui-xin1, LIU Shi-ping2, XU Yu-hai1, WU Yun-long1, CAO Hua-jun1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,theFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116011,China; 2.PhysicalExaminationCenter,theFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116011,China)

Objective To explore the serum levels of ficolin-3, immunoglobulin, complement and C reactive protein (CRP) in patients with essential hypertension, and to compare and analyze their relationships. Methods Totally 98 patients with essential hypertension, including 88 with simple hypertension, and 10 with hypertension accompanied with DMII, were selected from the first affiliated hospital of Dalian Medical University. The levels of complement (C3, C4), immunoglobulin (IgG, IgA, IgM), and CRP were measured using Nephelometry method. The levels of serum ficolin-3 were determined using ELISA method. Results The levels of ficolin-3, C3, C4, CRP in the hypertension group were significantly higher than those in the control group. The level of IgM in the hypertension group was lower than that in the control group. The significant difference of IgG, IgA between the groups was not observed. In all subjects, a significant correlation was found among C3, C4, ficolin-3, CRP and blood pressure. The positive correlations among ficolin-3, C3, C4, and the medical history of hypertension were also found. Conclusion The levels of serum ficolin-3 may contribute to the development of essential hypertension. Further evaluation of ficilin-3 should have a certain value in the diagnosis and prognosis of essential hypertension.

essential hypertension; complement; immunoglobulin; ficolin-3; CRP

李桂新(1971-)，女，河北秦皇島人，副主任檢驗(yàn)師。E-mail: guixin_li@163.com

曹華軍，主任檢驗(yàn)師。E-mail:chjww@sina.com

論著10.11724/jdmu.2016.04.13

R554.1

A

1671-7295(2016)04-0367-04

2016-05-17；

2016-07-05)