周文平 張輝 張金盈

臨床研究

急性冠脈綜合征患者M(jìn)EF2A與MMP-8血清水平的相關(guān)性分析

周文平 張輝 張金盈

目的 檢測急性冠狀動(dòng)脈綜合征（ACS）患者和健康對照組血清肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2A（MEF2A）及基質(zhì)金屬蛋白酶-8（MMP-8）水平，探討MEF2A與MMP-8變化及其對ACS患者的影響。方法 選擇60例 ACS患者，男性 37例，平均年齡（67.42±10.36）歲，女性 23例，平均年齡（61.42±12.26）歲；30例健康受試者，男性18例，平均年齡（65.25±13.74）歲，女性12例，平均年齡（67.45±11.63）歲。通過病史采集和血樣采集，采用ELISA法檢測觀察ACS患者及健康對照組血液MEF2A及MMP-8水平的變化。結(jié)果 ①ACS組患者 MEF2A 血液水平為（88.70±4.38）ng/L，與對照組 MEF2A（640.42±46.66）ng/L 相比明顯降低（P<0.05）。②ACS組患者 MMP-8血液水平為（74.96±6.78）μg/L，與對照組 MMP-8（2.16±0.87）μg/L 相比明顯升高（P<0.05）。③在ACS組中，MEF2A水平與MMP-8水平變化呈負(fù)相關(guān)（r=-0.853，P<0.01）。結(jié)論 ACS患者血液MEF2A水平明顯降低，MEF2A與MMP-8水平變化呈明顯負(fù)相關(guān)。血液MEF2A、MMP-8水平變化對ACS動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)和斑塊的穩(wěn)定程度評價(jià)具有重要的臨床意義。

肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2A； 急性冠脈綜合征； 基質(zhì)金屬蛋白酶-8

急性冠脈綜合征（ACS）病變形成始動(dòng)因素是內(nèi)皮損傷，血管內(nèi)皮出現(xiàn)結(jié)構(gòu)和功能紊亂、損害，血液中單核細(xì)胞通過內(nèi)皮細(xì)胞間隙沉積于內(nèi)膜下，引起一系列血管炎性改變?nèi)缰|(zhì)沉積、內(nèi)膜增厚、血栓形成[1]。本研究通過檢測急性冠脈綜合征患者和健康對照者血清肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2A（MEF2A）及基質(zhì)金屬蛋白酶-8（MMP-8）水平的變化，觀察MEF-2A與MMP-8之間的相關(guān)性及其與冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度的關(guān)系，對其深層機(jī)制進(jìn)行研究。

1 對象與方法

1.1 研究對象 本院心內(nèi)科2013年6月至2015年1月住院的60例ACS患者，男性37例，年齡43～82（67.42±10.36）歲；女性 23 例，年齡 52～79（61.42±12.26）歲。正常對照組為30例健康受試者，男性18例，平均年齡（65.25±13.74）歲；女性12例，平均年齡（67.45±11.63）歲。兩組間性別、年齡、血壓、血糖、血脂等比較均未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具有可比性。本研究經(jīng)鄭州大學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)并事先由患者簽署知情同意書后進(jìn)行。

1.2 ACS診斷標(biāo)準(zhǔn) ACS診斷按照葛均波、徐永健主編《內(nèi)科學(xué)》（人民衛(wèi)生出版社，第8版）中有關(guān)ACS 的標(biāo)準(zhǔn)[2]。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 病史采集 詳細(xì)的患者調(diào)查問卷包括高血壓病史、糖尿病病史、高脂血癥病史、吸煙史及其他疾病史等信息。血壓、心率等信息在入院時(shí)由醫(yī)生采集。

1.3.2 血樣采集 入選者均空腹8 h以上，清晨空腹抽取靜脈血5 ml，3000 r/min離心15 min，分離血清，密封封管，-20℃保存，應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法測定血清高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、總膽固醇、甘油三酯和高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平等。

1.3.3 血清MEF2A、MMP-8水平檢測 血樣經(jīng)3000 r/min離心15 min后取上層血清，采用ELISA法測定血清MEF2A、MMP-8水平。所有步驟均按試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以±s表示，多樣本均數(shù)間的兩兩比較采用least significant difference（LSD）檢驗(yàn)和 Student-Newman-Keuls（SNK）檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究對象一般臨床資料比較 對ACS組、對照組研究對象的一般臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組性別、年齡、吸煙史、高血壓病史、高脂血癥史等一般情況比較未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），見表1。

2.2 MEF2A與MMP-8血清水平變化情況比較與對照組相比，ACS組MEF2A血清濃度明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與對照組相比，ACS組MMP-8血清濃度明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表 2。

表1 兩組研究對象的一般臨床資料比較（±s）

表1 兩組研究對象的一般臨床資料比較（±s）

組別 例數(shù) 年齡（歲） 男/女 吸煙史（有/無） 高血壓史（有/無） 高脂血癥史（有/無）對照組 30 61.43±8.60 18/12 12/18 18/12 17/13 ACS 組 60 63.40±7.44 37/23 36/24 42/18 44/16 χ2值 0.99 0.32 3.26 1.06 2.55 P值 0.38 0.85 0.19 0.59 0.46

表2 兩組MEF2A和MMP-8血清水平變化情況比較（±s）

表2 兩組MEF2A和MMP-8血清水平變化情況比較（±s）

組別 例數(shù) MEF2A（ng/L） MMP-8（μg/L）對照組 30 640.42±46.66 2.16±0.87 ACS 組 60 88.70±4.38 74.96±6.78 F值 8170.2 1499.04 P值 0.001 0.001

2.3 血漿MEF2A水平與MMP-8水平的相關(guān)性分析 對MEF2A與MMP-8間的相互關(guān)系，進(jìn)一步進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果見圖1。

圖1 ACS組MEF2A水平與MMP-8水平相關(guān)性散點(diǎn)圖

ACS組患者血清MEF2A水平與血清MMP-8水平存在明顯相關(guān)性，血清MEF2A水平與血清MMP-8水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.853，P<0.01）。

3 討論

血管內(nèi)皮功能障礙、血管壁炎癥及增生結(jié)構(gòu)的損傷性改變是動(dòng)脈粥樣硬化血管結(jié)構(gòu)損傷的發(fā)病基礎(chǔ)。在動(dòng)脈粥樣硬化的形成及斑塊破裂中，巨噬細(xì)胞能夠產(chǎn)生多種細(xì)胞因子發(fā)揮作用，可促進(jìn)單核細(xì)胞趨化、聚集、黏附，遷至受損的內(nèi)皮細(xì)胞，巨噬細(xì)胞可吞噬類脂質(zhì)、泡沫細(xì)胞和脂質(zhì)池形成，構(gòu)成動(dòng)脈粥樣硬化早期的脂質(zhì)病變[3]。

MMP-8最早在中性粒細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等均表達(dá)MMP-8。血液MMP-8水平升高與動(dòng)脈粥樣硬化、血管狹窄及心肌梗死等心血管病變的形成密切相關(guān)[4]。肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2A（MEF2A）具有多種調(diào)節(jié)方式，其結(jié)合位點(diǎn)廣泛存在于肌肉、內(nèi)皮的特異性基因調(diào)控區(qū)，在心血管系統(tǒng)和內(nèi)皮組織中都有表達(dá)[5]，最突出功能是控制肌細(xì)胞分化過程中的基因轉(zhuǎn)錄，在骨骼肌、心肌和平滑肌的發(fā)育過程中介導(dǎo)細(xì)胞的分化，并參與血管的發(fā)育[6]。細(xì)胞原癌基因c-jun參與細(xì)胞的生長、分化、信息傳遞等生理功能，是血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移的重要因素之一。激活的c-jun可促進(jìn)單核細(xì)胞趨化蛋白-1基因的表達(dá)，促使單核細(xì)胞轉(zhuǎn)化為巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞釋放炎癥因子，使MMP-8的表達(dá)增加，減少細(xì)胞外的基質(zhì)，進(jìn)而降解纖維帽內(nèi)的膠原，增加斑塊的不穩(wěn)定性，從而促使斑塊的破裂，擴(kuò)大炎癥進(jìn)程[7]。MEF2A蛋白的表達(dá)發(fā)生在增殖的血管平滑肌細(xì)胞核中，可抑制c-jun基因表達(dá)，減少血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移。MEF2A基因通過調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的生存、維持血管完整性、調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)和調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡參與血管平滑肌及血管內(nèi)膜的維護(hù)[8]。因此，MEF2A的突變，會(huì)促進(jìn)c-jun的轉(zhuǎn)錄活性增加，單核細(xì)胞趨化作用增強(qiáng)，促進(jìn)單核細(xì)胞遷移內(nèi)皮下，活化生成巨噬細(xì)胞，進(jìn)而加速血管平滑肌細(xì)胞的增殖，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞遷移，形成動(dòng)脈粥樣硬化的典型病理變化。MMP-8在人動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)高表達(dá)，在快速進(jìn)展的動(dòng)脈粥樣斑塊中表達(dá)增加，MMP-8參與了動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展過程[9]。

在本研究中，我們檢測了ACS患者血液中MEF2A和MMP-8水平的變化，并與健康對照組進(jìn)行了對比研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ACS患者血液中MEF2A水平與對照組相比明顯降低，MMP-8水平與對照組相比明顯升高，MEF2A水平與MMP-8水平呈明顯負(fù)相關(guān)。因此，血液中MEF2A水平與MMP-8水平可用來評價(jià)動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)程度和斑塊的穩(wěn)定性，并對ACS患者冠脈病變嚴(yán)重程度具有較好的預(yù)測判斷作用。

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The relative analysis on the serum levels of MEF2A and MMP-8 in patients with acute coronary syndrome

ZHOU Wen-ping＊，ZHANG Hui，ZHANG Jin-ying.＊Department of Cardiovascular Medicine，the Third Affiliated Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450052，China

Objective To test the level changes of Serum myocyte enhancer factor 2A（MEF2A）and matrix metalloproteinase-8（MMP-8）in patients with acute coronary syndrome（ACS），and discuss the change and impact of MEF2A and MMP-8 on patients with ACS.Methods 60 patients with ACS［37 males，average age（67.42±10.36）years old，23 females，average age（61.42±12.26）years old］and 30 cases of healthy subjects［18 males，average age（65.25±13.74）years old，12 females，average age（67.45±11.63）years old］were analyzed and the changes of MEF2A and MMP-8 in ACS patients and healthy controls were observed by ELISA method through history collection and blood samples.Results ⑴The Serum level of MEF2A was（88.70±4.38）ng/L in ACS patients，compared with normal control group （640.42±46.66）ng/L，a dramatic decrease of serum concentration of MEF2A was displayed in ACS patients（P<0.05）.⑵The Serum level of MMP-8 was（74.96±6.78）μg/L in ACS patients，compared with normal control（2.16±0.87）μg/L，the ACS patients showed considerable higher serum concentrations of MMP-8（P<0.05）.⑶The negative correlations between MEF2A and MMP-8 were found in ACS（r=-0.853，P<0.01）.Conclusion The serum level of MEF2A was lower significantly in ACS patients，and the serum concentration of MEF2A was negative correlation with MMP-8.These results suggested that the changes of serum concentrations of MEF2A and MMP-8 on the ACS atherosclerosis degree of inflammation and plaque stability evaluation have important clinical significance.

Myocyte enhancer factor 2A； Acute coronary syndrome； Matrix metalloproteinase-8

河南省高?？萍紕?chuàng)新團(tuán)隊(duì)支持項(xiàng)目（項(xiàng)目編號：14IRTSTHN018）

450052 河南省鄭州市，鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院心內(nèi)科（周文平）；鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科（張輝、張金盈）

10．3969/j．issn．1672－5301．2016．07．011

R543.3

A

1672-5301（2016）07-0617-03

2016-01-31）