廖桂周

抗核抗體和抗核抗體譜聯(lián)合檢測在自身免疫性疾病診斷和篩查中的應(yīng)用價值

廖桂周①

目的：探討抗核抗體（ANA）和抗核抗體譜（ANAs）聯(lián)合檢測在自身免疫性疾病診斷和篩查中的應(yīng)用價值。方法：回顧性分析2014年1月-2015年1月本院門診和住院部已確診的80例自身免疫性疾?。ˋID）患者的臨床資料，并選取20例健康體檢者作為對照組。ANA檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），而ANAs檢測采用免疫印跡法（IBT），統(tǒng)計分析各檢測結(jié)果及其相互關(guān)系。結(jié)果：ANA在各種AID中均有一定的陽性檢出率，以在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的陽性率最高，為93.75%；而ANA在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）、干燥綜合征（SS）、特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）、混合性結(jié)締組織病（MCTD）、系統(tǒng)性硬化?。≒SS）及對照組中的陽性率分別為25.00%、66.67%、50.00%、62.50%、50.00%和0；ANAs中的自身抗體在不同AID中均有不同的陽性檢出率。結(jié)論：ANA敏感性好，但缺乏特異性，可作為AID的初篩試驗，而ANAs中的自身抗體在不同的AID中有不同的陽性檢出率，特異性好。兩者聯(lián)合檢測在AID診斷中具有互補(bǔ)性，可提高陽性檢出率，對AID的診斷有著重要的臨床意義。

抗核抗體； 抗核抗體譜； 自身免疫性疾病； 診斷

First-author’s address：Chaoyang District Dafeng Hospital of Shantou City，Shantou 515154，China doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.24.017

自身免疫性疾病（AID）是指機(jī)體對自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)而導(dǎo)致自身組織損害所引起的疾病，臨床表現(xiàn)為器官特異性自身免疫病和系統(tǒng)性自身免疫疾病。研究顯示，抗核抗體（ANA）對很多AID均有一定的診斷價值，酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）是常用的ANA篩查方法，操作簡單快捷，重復(fù)性好，且還能避免人為主觀判斷的影響[1]。近年來，隨著免疫印跡法（IBT）的推廣應(yīng)用，抗核抗體譜（ANAs）檢測應(yīng)用于AID診斷和篩選的熱點已受到廣泛的關(guān)注[2]。本研究旨在探討ANA和ANAs聯(lián)合檢測在AID診斷和篩查中的應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析2014年1月-2015年1月本院門診和住院部已確診的80例AID患者的臨床資料，其中男31例，女49例，年齡4～79歲，平均（43.52±1.02）歲，系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）32例，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）28例，干燥綜合征（SS）6例，特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）2例，混合性結(jié)締組織?。∕CTD）8例，系統(tǒng)性硬化?。≒SS）4例。AID患者的診斷均符合相關(guān)國際學(xué)會的診療指南標(biāo)準(zhǔn)。選取同期收治的20例門診體檢健康者作為對照組，男8例，女12例，年齡18～71歲，平均（44.62±2.23）歲。兩組患者年齡組成、性別結(jié)構(gòu)等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2檢測方法 抽取清晨空腹靜脈血3 mL，不加抗凝劑，室溫靜置30 min后，離心分離血清。（1）ANA檢測采用ELISA法，試劑盒由上海泰諾中國公司公司提供，且操作須嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行，檢測從0～24、25～200、201～300、>300 U/mL濃度水平進(jìn)行統(tǒng)計分析，ANA≥25 U/mL，則為ANA檢測陽性；（2）ANAs檢測采用IBT，可檢測抗nRNP、Sm、SS-A、SS-B、SCL-70、Jo-1、PM-Scl、CENP-B、Ro-52、PCNA、dsDNA、AMA-M2、核小體、組蛋白和核糖體P蛋白等15項特異性抗體。試劑盒由德國歐蒙公司提供，且操作須嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行，觀察檢測的結(jié)果。

2　結(jié)果

2.180例AID患者和對照組健康體檢者ANA檢測結(jié)果 ANA在各種AID中均有一定的陽性檢出率，在SLE的陽性率最高，為93.75%；而ANA在RA、SS、ITP、MCTD、PSS及對照組中的陽性率分別為25.00%、66.67%、50.00%、62.50%、50.00%和 0。見表1。

表1　80例AID患者和對照組健康體檢者ANA檢測結(jié)果比較

2.280例AID患者和對照組健康體檢者ANAs檢測結(jié)果比較 ANAs中的自身抗體在不同AID中有不同的陽性檢出率?？筍m抗體僅在SLE中檢出，陽性檢出率為37.50%，而在其他AID中并未發(fā)現(xiàn)；抗ds-DNA抗體、抗核小體抗體在SLE患者中具有較高的陽性檢出率，分別為62.50%、68.75%；抗nRNP、抗SS-A抗體、抗SS-B抗體、抗CENP-B抗體、抗CENP-B抗體、抗PCNA抗體、抗組蛋白抗體以及抗核糖體P蛋白抗體等均與SLE有一定的相關(guān)性；抗SS-A和抗SS-B抗體在SS中的陽性檢出率分別為50.00%、33.33%，與SS密切相關(guān)；抗ds-DNA抗體、AMA-M2抗體和抗組蛋白抗體在RA有一定的檢出；抗SCL-70抗體與ITP、MCTD和PSS亦有一定的相關(guān)性。見表2。

表2　80例AID患者和對照組健康體檢者ANAs檢測結(jié)果比較 例（%）

續(xù)表2

3　討論

抗核抗體（ANA）又稱抗核酸抗原抗體，是一組將自身真核細(xì)胞的各種成分脫氧核糖核蛋白、可提取的核抗原、DNA和RNA等作為靶抗原的自身抗體的總稱[3]。研究顯示，ANA在多種自身免疫疾?。ˋID）中均呈不同程度的陽性率，且發(fā)現(xiàn)ANA可在AID任何臨床癥狀出現(xiàn)前10 d左右檢測到[4-5]。而不同的AID又有著不同的抗核抗體譜（ANAs）[6]，故臨床上ANA和ANAs的檢測在AID診斷和篩查中具有重要的應(yīng)有價值。ANA是AID重要的血清學(xué)指標(biāo)之一，臨床上ANA的檢測常采用間接免疫熒光法（IIF），研究顯示，IIF是檢測ANA的金標(biāo)準(zhǔn)，亦是目前應(yīng)用最為廣泛的自身抗體篩查試驗[7]。本研究ANA的檢測采用ELISA，取其操作簡單快捷，費用低廉，重復(fù)性好的特點，且ELISA還可排除人為主觀判斷的影響。而ANAs檢測則采用操作簡單快捷、易自動化和結(jié)果判讀方便的IBT。

本研究結(jié)果顯示，ANA在各種AID中均有一定的陽性檢出率，而對照組健康體檢者中均為ANA陰性。而ANA以在SLE中的陽性檢出率最高，高達(dá)93.75%，而在RA、SS、ITP、MCTD和PSS的陽性檢出率分別為25.00%、66.67%、50.00%、62.50%和50.00%，研究結(jié)果與文獻(xiàn)[8]報道相符，表明ANA與AID有著密切的聯(lián)系，且ANA在各AID中具有較高的敏感性，有助于AID的臨床診斷。但ANA的特異性較差，常作為AID的初篩試驗。有研究亦表明，ANA不能作為某種AID的特異性指標(biāo)，多作為篩查試驗[9]。ANA在SLE患者中具有較高的陽性檢出率，對SLE的診斷和篩查具有一定的參考價值。

本研究結(jié)果亦顯示，抗Sm抗體僅在SLE中檢出，陽性檢出率為37.50%，而在其他AID中并未發(fā)現(xiàn)。研究表明，抗Sm不會在健康人群和SLE外的其他疾病中出現(xiàn)，可作為SLE的特異性指標(biāo)[10-11]?？筪s-DNA抗體、抗核小體抗體在SLE患者中陽性檢出率分別為62.50%和68.75%，對SLE均具有較高的特異性。有研究表明，抗ds-DNA抗體是SLE的特異性指標(biāo)之一，可應(yīng)用于SLE的診斷，且其抗體滴度與SLE活動相平行，亦可應(yīng)用于SLE的治療評估，而其它的特異性抗體如抗nRNP、抗SS-A抗體、抗SS-B抗體、抗CENP-B抗體、抗CENP-B抗體、抗PCNA抗體、抗組蛋白抗體以及抗核糖體P蛋白抗體等均與SLE有一定的相關(guān)性[12]。抗ds-DNA抗體在RA和SS也有一定的檢出，陽性檢出率分別14.29%和16.67%，與文獻(xiàn)[6]報道結(jié)果相符。抗nRNP抗體在MCTD中的陽性檢出率為62.50%，特異性高，可作為MCTD的特異性指標(biāo)，且抗nRNP抗體還可應(yīng)用于結(jié)締組織病與非結(jié)締組織病鑒別[13]。文獻(xiàn)[14]報道顯示，抗nRNP抗體陽性SLE患者如果同時檢出抗ds-DNA和抗Sm抗體，則患者表現(xiàn)為狼瘡性腎炎的可能性會顯著增大?？筍S-A抗體和抗SS-B抗體在SS中的陽性檢出率分別為50.00%和33.33%，與SS有著密切的聯(lián)系。有研究表明，抗SS-A抗體和抗SS-B抗體與SS密切相關(guān)，可作為SS的特異性指標(biāo)[15]。亦有研究顯示，抗SS-A抗體敏感性強(qiáng)而抗SS-B抗體特異性高，兩者聯(lián)合檢測可提高SS確診率，對SS的診斷有著重要的意義[16-17]?？筍CL-70抗體與ITP、MCTD和PSS有一定的相關(guān)性，有研究顯示，抗SCL-70抗體為PSS的特異性指標(biāo)，與皮膚硬化及腫瘤發(fā)生相關(guān)[18]。此外，抗AMA-M2抗體、抗組蛋白抗體與RA亦有一定的相關(guān)性[19]。80例AID患者中未檢測出抗Jo-1抗體陽性病例。

綜上所述，ANA敏感性好，但缺乏特異性，可作為AID的初篩試驗，而ANAs中的自身抗體在不同的AID中有不同的陽性檢出率，特異性好。兩者聯(lián)合檢測在AID診斷中具有互補(bǔ)性，可提高陽性檢出率，對AID的診斷有著重要的臨床意義。

[1]林益強(qiáng)，曾燕麗.抗核抗體與抗核抗體譜聯(lián)合檢測在自身免疫性疾病診斷上的應(yīng)用[J].免疫學(xué)雜志，2012，28（10）：892-895.

[2]張道強(qiáng)，隋秀梅，林榮海，等.抗核抗體間接免疫熒光法檢測結(jié)果與抗核抗體譜免疫印跡法檢測結(jié)果對比分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（11）：1212-1214.

[3]許淵.抗核抗體譜在自身免疫性疾病中的臨床應(yīng)用[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（8）：945-946.

[4]李蘇亮.多種自身抗體聯(lián)合檢測對自身免疫性疾病臨床診斷的意義[J].實用醫(yī)藥雜志，2008，25（5）：539-541.

[5]胡朝軍，李俊，張道強(qiáng)，等.間接免疫熒光法篩查抗核抗體與特異性抗體檢測的相互關(guān)系[J].中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志，2011，5（3）：179-185.

[6]滕賢麟，翁巍，戚建鋒.抗核抗體譜檢測對自身免疫性疾病診斷的價值[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2015，25（8）：1209-1211.

[7]吳麗娜，郭萍，丁寧.抗核抗體熒光核型與特異性抗體相關(guān)性分析[J].免疫學(xué)雜志，2010，26（11）：973-976.

[8]王嫻默.120例ANA譜的檢測結(jié)果分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2011，40（9）：864-866.

[9]周仁芳，胡朝軍，張蜀瀾.臨床標(biāo)本抗核抗體102651例檢測結(jié)果回顧性分析[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2009，32（12）：1339-1343.

[10]彭俊華，張華欣，齊心亮，等.143例系統(tǒng)性紅斑狼瘡的自身抗體和常規(guī)檢查分析[J].甘肅科學(xué)學(xué)報，2009，21（1）：53-56.

[11]巫志宇，吳斌.1708例自身免疫性疾病抗核抗體與抗ENA抗體聯(lián)合檢測的結(jié)果分析[J].免疫學(xué)雜志，2013，29（12）：1067-1070.

[12]陳佩，王奇軍，羅建平.2236例血清抗核抗體與抗核抗體譜檢測結(jié)果分析[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2014，24（16）：2368-2370.

[13] Ihn H，Yamane K，Yazawa N.Distribution and antigen specificity of anti-ulRNP antibodies in patients with systemic[J]. Clin Exp Immunol，1999，117（2）：383.

[14]吳茜，胡冬，朱華強(qiáng).自身免疫性疾病患者抗核抗體譜檢測的臨床意義[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8（23）：2900-2901.

[15]喬娜，王心聲.SSA、SSB及SS56在干燥綜合征患者唇腺組織中表達(dá)的研究[J].臨床皮膚科雜志，2015，44（3）：140-143.

[16] Hemandez-Molina G，Leal-Alegre G，Michel-Peregrina M.The meaning of anti-Ro and anti-La antibodies in primary Sjogren’s syndrome[J].Autoimmun Rev，2011，10（3）：123-125.

[17] Lisi S，Amore M D，Scagliusi P，et al.Anti-Ro/SSA autoantibody-mediated regulation of extracellular matrix fibulins in human epithelial cells of the salivary gland[J].Scand J Rheumatol，2009，38（3）：198-206.

[18]楊海，梁宗夏，張慧娟.抗Scl-70抗體檢測與臨床應(yīng)用[J].中國免疫學(xué)雜志，2014，30（4）：533-534.

[19]陳舒，宋秀軍，呂進(jìn).500例自身免疫性疾病患者抗核抗體譜檢測結(jié)果的分析[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2013，23（15）：3128-3130.

Clinical Application of ANA and ANAs in the Diagnosis and Screening of Autoimmune Diseases

LIAO Gui-zhou.

Medical Innovation of China，2016，13（24）：063-066

Objective：To discuss the clinical application of antinuclear antibodies（ANA） and antinuclear antibodies spectrum（ANAs）and in the diagnosis and screening of autoimmune diseases.Method：Clinical data of80 patients with autoimmune diseases form January 2014 to January 2015 in outpatient department and in-patient department were reviewed retrospectively while 20 healthy people were taken as the control group.ANA was detected quantitatively by enzyme-linked immuno sorbent assay while ANAs detected by immunoblotting technique，Counted and analyzed the detected result and it’s correlation.Result：ANA has certain positive rate in all kinds of AID，but in SLE had the highest positive rate（93.75%）.The positive rate of RA，SS，ITP，MCTD，PSS and healthy people were 25.00%，66.67%，50.00%，62.50%，50.00% and 0.The autoantibody in ANAs in different autoimmune diseases with different positive rate.Conclusion：ANA with good sensitivity but lack of specificity，which is appropriate for primary screening test.ANAs with good specificity，and the autoantibody in ANAs in different autoimmune diseases with different positive rate.The co-detections of ANA and ANAs are complementary with each other，upgrade the detectable rate and have important clinical value in the diagnosis and screening of autoimmune diseases.

Antinuclear antibodies； Antinuclear antibodies spectrum； Autoimmune diseases；Diagnosis

2016-03-02） （本文編輯：程旭然）

①廣東省汕頭市潮陽區(qū)大峰醫(yī)院 廣東 汕頭 515154

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