程從遠　李海云

（南陽市中心血站，河南 南陽 473000）

D抗原遮斷引起Rh（D）定型困難的分析

程從遠李海云

（南陽市中心血站，河南 南陽 473000）

目的正確鑒定新生兒的血型，找出新生兒溶血病原因，制定合理的治療方案。方法用直抗、游離試驗、放散試驗、不規(guī)則抗體篩選及抗體鑒定試驗鑒定其Rh（D）血型。結(jié)果該患兒為B型Rh（D）陽性，由母體IgG抗-D抗體引起新生兒溶血。結(jié)論由于抗-D抗體致敏了紅細胞而誤認為Rh（D）血型為陰性。

抗原遮斷；Rh（D）定型；抗體鑒定

Rh（D）的鑒定是加入試劑和待檢紅細胞懸液，混合均勻，鹽水立即離心的結(jié)果。因其試劑效價高，凝集明顯，很容易判斷結(jié)果?，F(xiàn)有1例因母親有抗-D抗體產(chǎn)生而影響Rh（D）定型困難，實驗過程如下。

1　材料與方法

1.1一般材料：KA-2200型離心機（日本久保田）、FYQ型免疫微柱孵育器（長春博研）、數(shù)字顯示式恒溫水浴箱（上海一恒）、TD-3A型血型血清學用離心機（長春博研）、Baso 2005-1離心機（臺灣貝索）。紅細胞試劑；IgM型抗-D血清、IgG型抗-D血清、標準抗-A、抗-B血清、抗人球蛋白、抗-IgG、抗-C3d、抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗人球蛋白試劑、篩選細胞、譜細胞（上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司）；Rh血型分型卡、抗人球蛋白卡（長春博迅）；生理鹽水（河南華利制藥公司）；AB血漿（本實驗室自制）。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。血型定型法、抗體篩選與鑒定、吸收放散試驗等按文獻［1-2］方法操作。

1.2方法

1.2.1直接抗人球蛋白試驗：多特異性抗人球蛋白反應3+，單抗-IgG3+，抗-C3d陰性，AB血漿陰性（陰性對照）。結(jié)果表明患者紅細胞上致敏的為單一IgG抗體。

1.2.2血型鑒定：氯喹放散患者紅細胞，使其放散后直接抗人球蛋白試驗陰性，此時檢查其紅細胞血型為B RhD陰性。

1.2.3抗體篩選：首先對患者血清中進行檢測，結(jié)果見表1，說明患者血清中無IgM類抗體，而有IgG類抗體。需要進一步鑒定抗體類型。

2　血型檢測

2.1加入待檢紅細胞懸液50 μL，標準血清50 μL，抗-D血清50 μL，做鹽水法，結(jié)果見表1。

表1　新生兒正定型及抗-D檢測

依據(jù)上述結(jié)果初步判斷：該患兒血型為“B”型，Rh（D）陰性。嬰兒尚未產(chǎn)生自己的抗體或有從母親被動獲得的抗體，故對新生兒通常不做血型反定型。

2.2抗-D鑒定：加入抗-D試劑各50 μL，待檢紅細胞懸液50 μL，做鹽水法和間接抗人球法，結(jié)果見表2。

表2　抗-D鑒定

依據(jù)上述結(jié)果判斷，患兒的Rh（D）血型為陽性。

2.3不規(guī)則抗體篩選：加入待檢血清100 μL，篩選細胞50 μL，做鹽水法和間接抗人球法，結(jié)果見表3。

表3　不規(guī)則抗體篩選

查篩選細胞反應格局表，初步判斷為抗-D抗體，但患兒為Rh （D）陰性，做Rh分型，結(jié)果為：CCee（因未采集母親血樣，故未做母親的Rh分型）。

2.4直抗檢測：加入直抗試劑50 μL，待檢紅細胞懸液50 μL，做鹽水法，結(jié)果見表4。

表4　直抗檢測

依據(jù)上述結(jié)果初步判斷：患兒紅細胞上致敏了不規(guī)則抗體，可能為Rh系統(tǒng)的抗體。

2.5抗體鑒定：加待檢紅細胞1 mL，生理鹽水1 mL，乙醚2 mL，離心3400 rpm 2 min，充分混合均勻。離心3400 rpm 5 min，取最下層的放散液，平均分配至11支試管，各加入譜細胞50 μL，做間接抗人球法，查譜細胞反應格局表，該不規(guī)則抗體為抗-D抗體。結(jié)果見表5。

3　討 論

經(jīng)上述證實該患兒為B型Rh（D）陽性，由母體IgG抗-D抗體引起新生兒溶血。

表5　抗體鑒定

上述試驗中Rh（D）檢測的陰性為假陰性，是由于母體的抗-D抗體致敏了患兒紅細胞所致，且抗-D抗體相對過剩，患兒紅細胞表面的抗原位點全部被抗體占據(jù)，故Rh（D）檢測為陰性。孕婦有輸血史或者妊娠史，都可導致孕婦產(chǎn)生高效價的抗-D抗體，高效價抗-D抗體進入胎兒血液循環(huán)，講胎兒紅細胞上的D抗原完全封閉，此時患兒紅細胞直接抗人球蛋白試驗程強陽性，此時鹽水法抗-D結(jié)果會得到假陰性，這種現(xiàn)象成為遮斷現(xiàn)象。通過乙醚放散及譜細胞鑒定才最終確認患兒為Rh（D）陽性。該患兒Rh定型情況符合遮斷現(xiàn)象引起的假陰性［4］。正確鑒定新生兒的血型，找出新生兒溶血病真正原因，才能制定合理的治療方案。我們廣大的醫(yī)學工作者遇到此類問題時，一定要細心，冷靜，選擇合理的試驗方法，對照試驗，務必使我們得出真是的結(jié)論，為臨床提供權(quán)威的試驗數(shù)據(jù)，保障每一名就醫(yī)患者的生命安全。

［1］丁蘇鄂.常用血清學技術［M］//劉達莊.免疫血液學.上海：上?？茖W技術出版社，2002：194-220.

［2］中華人民共和國醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學出版社，2006：246-270.

［3］劉達莊.免疫血液學［M］.上海：上海科學技術出版社，2002：136.

［4］李延孝，閆東河，冀寶軍.孕婦高效價抗-D遮斷D抗原致新生兒Rh定型假陰性1例［J］.中國輸血雜志，2005，18（3）：245-246.

D Antigen Interrupt Cause Difficulties Rh (D) to Finalize the Design Analysis

CHENG Cong-yuan， LI Hai-yun
（Nanyang Blood Center， Nanyang 473000， China）

ObjectiveTo correct identification of neonatal blood types， and identify the reasons for newborns hemolytic disease， formulate reasonable treatment scheme. MethodsUsing direct resistance， free trial， tossing in the test， irregular antibody screening antibody evaluation test and evaluation the Rh blood type （D）. ResultsThe children with positive for type B Rh （D）， caused by anti-D matrix IgG antibody neonatal hemolysis. ConclusionDue to the anti-D sensitization of red blood cells and antibodies for Rh negative blood type （D）.

Interrupt； Rh antigen （D）； Antibody identification

R457.1+1

B

1671-8194（2016）24-0036-02