韓峰　黃華　呂黃勇　聶川　林玲解放軍第五十九中心醫(yī)院消化內(nèi)科，云南　開(kāi)遠(yuǎn)　66600昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，昆明　650000

膜聯(lián)蛋白Ⅱ在胃癌組織中的表達(dá)及其在胃癌轉(zhuǎn)移中的作用

韓峰1黃華2#呂黃勇1聶川1林玲1
1解放軍第五十九中心醫(yī)院消化內(nèi)科，云南開(kāi)遠(yuǎn)661600
2昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，昆明650000

目的探討膜聯(lián)蛋白Ⅱ（AnnexinⅡ）在胃癌組織中的表達(dá)及其在胃癌轉(zhuǎn)移中的作用。方法采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)AnnexinⅡ在51例胃癌組織和24例癌旁組織中的表達(dá)，并統(tǒng)計(jì)AnnexinⅡ陽(yáng)性表達(dá)與胃癌患者臨床特征的關(guān)系。用AnnexinⅡ特異性siRNA在胃癌HGC-27細(xì)胞抑制AnnexinⅡ的表達(dá)，應(yīng)用黏附實(shí)驗(yàn)、侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)抑制AnnexinⅡ表達(dá)后對(duì)胃癌細(xì)胞的黏附、侵襲能力的影響。結(jié)果AnnexinⅡ蛋白在胃癌組織中陽(yáng)性率為82.4%，在癌旁組織中陽(yáng)性率為37.5%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；并且AnnexinⅡ陽(yáng)性表達(dá)與患者的性別與年齡無(wú)關(guān)（P＞0.05），而與腫瘤大小、組織分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移臨床特征有關(guān)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。在胃癌HGC-27細(xì)胞轉(zhuǎn)染AnnexinⅡsiRNA后，細(xì)胞中AnnexinⅡ的蛋白和mRNA水平均下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。并且抑制AnnexinⅡ表達(dá)后，胃癌HGC-27細(xì)胞的黏附、侵襲能力下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論AnnexinⅡ在胃癌組織中高表達(dá)，AnnexinⅡ蛋白表達(dá)與腫瘤大小、組織分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移臨床特征有關(guān)，并且AnnexinⅡ高表達(dá)可促進(jìn)胃癌轉(zhuǎn)移。因此，AnnexinⅡ可以作為抑制胃癌轉(zhuǎn)移的潛在靶點(diǎn)，開(kāi)發(fā)靶向AnnexinⅡ的藥物可能成為治療胃癌轉(zhuǎn)移的新方法。

胃癌；AnnexinⅡ；轉(zhuǎn)移

Oncol Prog，2016，14（7）

胃癌是我國(guó)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在消化道惡性腫瘤中居首位，在世界范圍內(nèi)也具有較高的發(fā)病率和病死率。由于其癥狀隱匿，病情發(fā)展較快，診斷時(shí)多為中晚期，治療效果往往較差，嚴(yán)重威脅人類健康。但早期胃癌的治療效果好，行根治術(shù)后5年生存率可達(dá)90%以上，因此深入研究胃癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制，對(duì)于早期診斷胃癌及指導(dǎo)胃癌的治療有著十分重要的臨床意義。膜聯(lián)蛋白Ⅱ（AnnexinⅡ）是一種鈣離子依賴性的磷脂結(jié)合蛋白，主要以單體、二聚體及四聚體形式存在，研究顯示，AnnexinⅡ在肝癌、乳腺癌、腸癌等多種惡性腫瘤中均有高表達(dá)，并在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。本研究通過(guò)采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)AnnexinⅡ在51例胃癌組織和24例癌旁組織中的表達(dá)，統(tǒng)計(jì)AnnexinⅡ陽(yáng)性表達(dá)與胃癌患者臨床特征的關(guān)系。并用AnnexinⅡ特異性siRNA在胃癌HGC-27細(xì)胞抑制AnnexinⅡ的表達(dá)，檢測(cè)細(xì)胞黏附、侵襲能力的變化?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1材料

收集解放軍第五十九中心醫(yī)院2012年1月至2014年12月手術(shù)切除胃癌標(biāo)本51例，51例胃癌組織標(biāo)本中27例取自2012年1月至2013年10月胃癌術(shù)后制作好的蠟塊組織，沒(méi)有癌旁組織標(biāo)本。其中男30例，女21例；年齡32～78歲，平均年齡58.6歲；病理分級(jí)：低分化36例，高分化15例；TNM分期：Ⅰ期0例，Ⅱ期17例，Ⅲ期26例，Ⅳ期8例（患者出現(xiàn)明顯的消化道出血且內(nèi)科治療效果差或出現(xiàn)消化道梗阻，患者及其家屬要求行減瘤手術(shù)姑息治療）。以上病例術(shù)前均未作放療、化療等抗腫瘤治療。從以上51例胃癌患者的胃正常切緣組織中隨機(jī)抽取24例作為對(duì)照組。所有標(biāo)本用甲醛固定，石蠟包埋，切片。胃癌HGC-27細(xì)胞購(gòu)自上海生化與細(xì)胞生物學(xué)研究所細(xì)胞庫(kù)。

1.2方法

1.2.1免疫組織化學(xué)法染色AnnexinⅡ抗體購(gòu)自Abcam試劑公司；免疫組化檢測(cè)試劑盒、DAB試劑盒購(gòu)自碧云天試劑公司。切片進(jìn)行高溫高壓組織抗原修復(fù)。染色步驟按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，用已知陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照，用磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffer saline，PBS）代替一抗作陰性對(duì)照。結(jié)果判斷：AnnexinⅡ陽(yáng)性表達(dá)為細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒狀物質(zhì)。每張切片選擇5個(gè)具有代表性的高倍視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)約100個(gè)細(xì)胞，將陽(yáng)性細(xì)胞的百分率和染色強(qiáng)度分別計(jì)分。具體判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：①根據(jù)染色程度進(jìn)行評(píng)分，無(wú)染色為0分，染色強(qiáng)度弱為1分，中等染色強(qiáng)度為2分，染色強(qiáng)度強(qiáng)為3分。②根據(jù)著色細(xì)胞百分率進(jìn)行評(píng)分，著色細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞百分率＜5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，＞75%為4分。①+②為總積分，總分0～7分?？偡?分為陰性（-），1～2分為弱陽(yáng)性（+），3～5分為陽(yáng)性（++），6～7分為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。

1.2.2細(xì)胞培養(yǎng)胃癌HGC-27細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清（BSA）的RPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)液中，置于5%CO2、37℃、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.2.3細(xì)胞轉(zhuǎn)染胃癌HGC-27細(xì)胞（1×105/ml）接種于24孔板，在37℃、5%CO2及飽和濕度條件下培養(yǎng)過(guò)夜。無(wú)血清培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞，將1μ（l20 pmol）AnnexinⅡsiRNA溶于49 μl無(wú)血清培養(yǎng)基，再將脂質(zhì)體1 μl溶于59 μl無(wú)血清培養(yǎng)基，室溫靜置10 min后，將兩種液體混合，室溫靜置20 min。然后將混合液加入待轉(zhuǎn)染細(xì)胞的24孔板，補(bǔ)加無(wú)血清培養(yǎng)基至500 μl，置于37℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)，6 h后更換為含10%新生牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基。

1.2.4實(shí)時(shí)定量PCR用Trizol法提取細(xì)胞的總RNA，將提取的細(xì)胞總RNA樣品反轉(zhuǎn)錄成cDNA，用如下反應(yīng)體系：2 μg模板RNA、1 μl Oligo dT primer、2 μl dNTP mixture、1 μl Ace反轉(zhuǎn)錄酶、1 μl RNase inhibitor、4 μl 5×RT buffer，10 μl RNase-free水。反應(yīng)條件：第一步37℃30 min，第二步84℃30 s。反應(yīng)產(chǎn)物4℃保存，然后進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)。用如下反應(yīng)體系：12.5 μl RealMasterMix（SYBR I）、2 μl模板cDNA、1 μl正向引物、1 μl反向引物、8.5 μl RNase-free水。反應(yīng)條件：第一步94℃5 min；第二步94℃60 s、57℃30 s、72℃30 s，共30個(gè)循環(huán)；第三步72℃5 min；最后4℃結(jié)束反應(yīng)。用實(shí)時(shí)定量PCR儀的Option Monitor V3.1軟件分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)。

1.2.5免疫印記實(shí)驗(yàn)將生長(zhǎng)狀態(tài)良好的待檢測(cè)細(xì)胞用裂解液冰上裂解，收集裂解液，用BCA蛋白定量試劑盒對(duì)細(xì)胞裂解液進(jìn)行總蛋白定量，上樣后，進(jìn)行SDS電泳，轉(zhuǎn)膜后用5%脫脂奶粉封閉，接著加入待檢測(cè)AnnexinⅡ蛋白的抗體室溫孵育2 h，洗膜后加入相應(yīng)HRP標(biāo)記二抗。取化學(xué)發(fā)光檢測(cè)A液和B液各0.1 ml混勻后，避光滴加至PVDF膜上。將PVDF膜置于Western Blot化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)中，曝光適當(dāng)時(shí)間后，進(jìn)行拍照與定量。

1.2.6細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)取0.1 ml的Matrigel膠加入96孔培養(yǎng)板中，4℃預(yù)冷過(guò)夜。吸出上清液后用含5%BSA的PBS室溫封閉30 min，然后用PBS洗2次。細(xì)胞計(jì)數(shù)后用含0.1%BSA的RPMI 1640培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，以1×105/孔接種于Matrigel膠包被的孔中。37℃培養(yǎng)箱中孵育45 min后，吸出上清培養(yǎng)液和未黏附的細(xì)胞，每孔加入0.1 ml含0.2% Cristal viole（t75%乙醇配制）室溫染色15 min后，流水沖洗2 min，然后將培養(yǎng)板置于空氣中干燥。每孔加入0.1 ml含5%SDS的50%乙醇裂解細(xì)胞，靜置30 min后，用酶標(biāo)儀在540 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)吸光值。

1.2.7細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)將1∶3稀釋的Matrige（lRMPI 1640稀釋）加入Matrigel侵襲小室上室，37℃放置2 h，將2×104胃癌細(xì)胞分別重懸于0.1%胎牛血清培養(yǎng)液中并接種于小室上室，在小室下室的24孔板內(nèi)加入含10%胎牛血清的RMPI 1640培養(yǎng)液，37℃培養(yǎng)24 h。取出侵襲小室，用棉簽輕輕擦去上室中未穿過(guò)的細(xì)胞，甲醛固定10 min，蘇木精-伊紅染色，切下濾膜，中性樹(shù)膠封片，光鏡下計(jì)數(shù)穿膜的細(xì)胞數(shù)。光鏡下任取10個(gè)視野計(jì)算穿膜的細(xì)胞數(shù)。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16-.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1胃癌組織及癌旁組織中AnnexinⅡ的表達(dá)

AnnexinⅡ蛋白的陽(yáng)性表達(dá)為細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)黃色顆粒狀物質(zhì)，主要定位于細(xì)胞質(zhì)中（圖1）。在51例胃癌組織中有42例為陽(yáng)性，其中強(qiáng)陽(yáng)性3例，陽(yáng)性12例，弱陽(yáng)性27例，陰性9例，陽(yáng)性率為82.4%。在24例癌旁組織中，有9例陽(yáng)性表達(dá)，其中強(qiáng)陽(yáng)性0例，陽(yáng)性3例，弱陽(yáng)性6例，陽(yáng)性率為37.5%。胃癌組織中AnnexinⅡ蛋白的表達(dá)明顯高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.0001）。

圖1　免疫組化檢測(cè)AnnexinⅡ蛋白在胃癌組織和癌旁組織中的表達(dá)

2.2AnnexinⅡ蛋白的表達(dá)與胃癌患者臨床特征的關(guān)系

AnnexinⅡ蛋白的陽(yáng)性表達(dá)與患者的性別與年齡無(wú)關(guān)（P＞0.05），而與腫瘤大小、組織分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移臨床特征有關(guān)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表2）

2.3AnnexinⅡ在胃癌轉(zhuǎn)移中的作用

表2　AnnexinⅡ蛋白表達(dá)與胃癌患者臨床特征的關(guān)系

2.3.1siRNA抑制AnnexinⅡ的表達(dá)將靶向AnnexinⅡ的siRNA片段（AnnexinⅡsiRNA）轉(zhuǎn)染人胃癌HGC-27細(xì)胞，24 h后采用Western Blot和Real Time-PCR檢測(cè)人胃癌HGC-27細(xì)胞中AnnexinⅡ的蛋白表達(dá)和mRNA轉(zhuǎn)錄的情況，并轉(zhuǎn)染無(wú)關(guān)干涉siRNA片段（control siRNA）作為陰性對(duì)照組。Western Blot結(jié)果表明，AnnexinⅡsiRNA可以顯著抑制人胃癌HGC-27細(xì)胞中AnnexinⅡ的蛋白表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=15.81，P＜0.05），詳見(jiàn)圖2。Real Time-PCR結(jié)果表明，AnnexinⅡsiRNA可以顯著抑制人胃癌HGC-27細(xì)胞中AnnexinⅡ的mRNA轉(zhuǎn)錄，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=8.04，P＜0.05），詳見(jiàn)圖3。

圖2　AnnexinⅡsiRNA對(duì)人胃癌HGC-27細(xì)胞中AnnexinⅡ蛋白表達(dá)的影響

圖3　AnnexinⅡsiRNA對(duì)人胃癌HGC-27細(xì)胞中AnnexinⅡmRNA轉(zhuǎn)錄的影響

2.3.2AnnexinⅡ?qū)ξ赴┘?xì)胞黏附能力的影響為檢測(cè)AnnexinⅡ?qū)ξ赴┘?xì)胞黏附能力的作用，將胃癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染AnnexinⅡsiRNA抑制AnnexinⅡ的表達(dá)，采用細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞黏附能力變化。與對(duì)照組比較，人胃癌HGC-27細(xì)胞轉(zhuǎn)染AnnexinⅡsiRNA后細(xì)胞的黏附能力降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=7.02，P＜0.05）。（圖4）

圖4　AnnexinⅡsiRNA對(duì)人胃癌HGC-27細(xì)胞黏附能力的影響

2.3.3AnnexinⅡ?qū)ξ赴┘?xì)胞侵襲能力的影響為檢測(cè)AnnexinⅡ?qū)ξ赴┘?xì)胞侵襲能力的作用，將胃癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染AnnexinⅡsiRNA抑制AnnexinⅡ的表達(dá)，采用細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力變化。與對(duì)照組比較，人胃癌HGC-27細(xì)胞轉(zhuǎn)染AnnexinⅡsiRNA后細(xì)胞的侵襲能力降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=7.82，P＜0.05）。（圖5、圖6）

圖5　AnnexinⅡsiRNA對(duì)人胃癌HGC-27細(xì)胞侵襲能力的影響

圖6　統(tǒng)計(jì)學(xué)分析AnnexinⅡsiRNA對(duì)人胃癌HGC-27細(xì)胞侵襲率的影響

3　討論

膜聯(lián)蛋白（Annexin，ANX）是一類鈣離子依賴性的磷脂結(jié)合蛋白，廣泛存在于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞外基質(zhì)中，在結(jié)構(gòu)上均具有兩個(gè)基本的功能結(jié)構(gòu)域：高度保守的C末端核心區(qū)和高度可變的N末端結(jié)構(gòu)域，前者具有Ca2+與膜的結(jié)合位點(diǎn)，以鈣離子依賴的方式可逆的與細(xì)胞膜磷脂結(jié)合，后者決定了Annexin特異的生物學(xué)功能。Annexin參與細(xì)胞的一系列活動(dòng)，如胞吞、胞吐、細(xì)胞增殖、分化和凋亡、細(xì)胞骨架活動(dòng)及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等。AnnexinⅡ作為Annexin家族A亞家族的一員，又名p36、AXA2、LIP2等，其基因位于15q21～q22，含1.4 kb編碼基因，蛋白分子量為36 kD，其具有RNA結(jié)合的特性，除在細(xì)胞分泌、增殖、細(xì)胞骨架連接及纖溶等方面發(fā)揮作用外，還可以結(jié)合到C-myc mRNA上，可上調(diào)C-myc蛋白，其表達(dá)異常與胃癌發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，如介導(dǎo)凋亡、誘導(dǎo)分化等［4-6］。

本研究對(duì)胃癌組織、癌旁組織中AnnexinⅡ的表達(dá)情況進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示胃癌組織中AnnexinⅡ蛋白的表達(dá)明顯高于癌旁組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），并且發(fā)現(xiàn)AnnexinⅡ陽(yáng)性表達(dá)與患者的性別與年齡無(wú)關(guān)（P＞0.05），而與腫瘤大小、組織分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移臨床特征有關(guān)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。以上研究結(jié)果提示AnnexinⅡ蛋白與胃癌的惡性程度密切相關(guān)。

腫瘤轉(zhuǎn)移是腫瘤最重要的惡性表現(xiàn)，是造成高致死率的直接原因。腫瘤轉(zhuǎn)移需要在腫瘤細(xì)胞本身、宿主細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)之間相互作用下才能完成，涉及一系列復(fù)雜過(guò)程與步驟，包括腫瘤細(xì)胞從原發(fā)瘤灶脫離，通過(guò)分泌基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）降解細(xì)胞外基質(zhì)進(jìn)入血管或淋巴管中遷移到遠(yuǎn)處，再侵襲到繼發(fā)組織或器官中形成轉(zhuǎn)移灶［7-11］。因此研究腫瘤轉(zhuǎn)移對(duì)于臨床診治有重要意義。為明確AnnexinⅡ是否在胃癌轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮作用，我們對(duì)胃癌HGC-27細(xì)胞應(yīng)用AnnexinⅡ特異性siRNA抑制AnnexinⅡ的表達(dá)，研究在AnnexinⅡ的表達(dá)降低后，胃癌HGC-27細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力，包括黏附、侵襲能力的變化。在研究中發(fā)現(xiàn)，在胃癌HGC-27細(xì)胞中應(yīng)用AnnexinⅡ特異性siRNA抑制AnnexinⅡ的表達(dá)后，胃癌細(xì)胞的黏附、侵襲能力均降低，提示AnnexinⅡ在胃癌轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用。

綜上所述，AnnexinⅡ在胃癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，并與胃癌組織分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移臨床特征有關(guān)，應(yīng)用AnnexinⅡ特異性siRNA在胃癌HGC-27細(xì)胞抑制AnnexinⅡ的表達(dá)后，胃癌細(xì)胞黏附、侵襲、遷移能力均降低，提示AnnexinⅡ在胃癌轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用。胃癌的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的多因素參與的綜合結(jié)果，目前關(guān)于胃癌的病因?qū)W和發(fā)病機(jī)制研究較多，但并未明了，本研究證實(shí)了AnnexinⅡ在胃癌組織中高表達(dá)并且具有促進(jìn)胃癌轉(zhuǎn)移的重要作用。隨著相關(guān)研究的不斷深入，AnnexinⅡ基因的表達(dá)、生物學(xué)功能及在胃癌進(jìn)展中的作用將逐步明確，有望應(yīng)用于胃癌的早期檢測(cè)、診斷和治療，成為胃癌預(yù)測(cè)預(yù)后的標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。

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The expression of Annexin II in gastric cancer and the role in gastric cancer metastasis

HAN Feng1HUANG Hua2#LV Huang-yong1NIE Chuan1LIN Ling1
1Deparement of Gastroenterology，the PLANo.59 Hospital，Kaiyuan 661600，Yunnan，China
2Deparement of Gastroenterology，the Second Affiliated Hospital of Kunming Medical University，Kunming 650000，Yunnan，China

ObjectiveTo investigate the significance and the role of Annexin II expression in gastric cancer tissues and gastric cancer metastasis.MethodExpression of annexin II in 51 cases of gastric cancer and 24 cases of adjacent normal gastric tissues was detected by immunohistochemistry staining，then the correlation between positive expression of Annexin II and clinical characteristics of gastric cancer patients were summarized and analyzed.Annexin II specific siRNA interference was established in human gastric cancer HGC-27 cells to downregulate the expressions of Annexin II，and cell adherence test and cell invasion test were performed to evaluate the adhesion and invasion potential of gastric cancer cells as Annexin II expression was inhibited.ResultThe positive expression rate of Annexin II in gastric cancer tissues was 82.4%，significantly higher than that in the adjacent normal gastric tissues at 37.5%，with significant difference observed（P＜0.01）；Besides，the positive expression of Annexin II was independent of gender or age of gastric cancer patients（P＞0.05），while was correlated with tumor size，histological differentiation，clinical TNM stage，and lymph nodes metastasis（all P＜0.05）.The transfection of Annexin II siRNA in human gastric cancer HGC-27 cells led to significant decreases of Annexin II protein and mRNA（P＜0.05），and as the Annexin II expression was downregulated，the adhesion and invasion potential of human HGC-27 gastric cancer cells were significantly decreased（P＜0.05）.Conclusion Annexin II is over-expressed in gastric cancer tissues and the positive expression of Annexin II is correlated with tumor size，histological differentiation and lymph node metastasis，and the high expression of Annexin II may promote the metastasis of gastric cancer，so Annexin II may be an alternative and potential target for preventing metastasis of gastric cancer，and annexin II targeted medication is a promising option in countering cancer metastasis.

gastric cancer；annexin II；metastasis

R735.2

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.07.11

2016-01-15）

（corresponding author），郵箱：hanfeng568@sohu.com